Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 647フローサイトメトリーアッセイキットにより、従来のBrdU法と比較して、増殖細胞におけるDNA複製を分析するためのシンプルで堅牢なアッセイが可能となります。新たに合成されたDNAは、フローサイトメーターの633／5 nmレーザーを使用して解析されます。

•正確--BrdUアッセイより優れた結果を提示
• 高速--わずか90分で解析が完了
• 経済的--

キットあたりのアッセイ数の増加フローサイトメトリー用の すべてのClick-iT™ EdUおよびClick-iT™ Plus EdUアッセイの選択ガイドを表示。

BrdUより優れた結果が得られる先進的な方法
増殖解析のもっとも正確な方法は、DNA合成の直接測定です。当初は、放射性ヌクレオシド、すなわち 、3H-チミジンを組み込むことで実施されていました。この方法は、ヌクレオシドアナログブロモデオキシウリジン（BrdU）の抗体ベースの検出に置き換えられました。Click-iT™ EdUフローサイトメトリーアッセイキットは、BrdUアッセイに代わる新しいアッセイキットです。EdU（5-エチニル-2´-デオキシウリジン）は、活性DNA合成の際にDNAに取り込まれるチミジンアナログです。検出は、クリックケミストリー（銅触媒を用いたアジドとアルキンの共有結合反応）に基づいています。このアプリケーションでは、アルキンはEdU のエチニル部位に、アジドはAlexa Fluor™ 488色素、Alexa Fluor™ 647色素、またはPacific BlueTM色素に結合しています。標準的なフローサイトメトリー法は、集団中のS期細胞の割合を決定するために使用されます（図1）。

穏やかな条件で、細胞周期色素や抗体を使用可能
Click-iT™ EdU標識の利点は、アッセイを実行している間に明らかになります（図2）。アジ化色素のサイズは小さいため、穏やかな条件下で組み込まれたEdUを効率的に検出できます。また、標準的なアルデヒドベースの固定および界面活性剤の浸透は、Click-It™検出試薬でDNAにアクセスするのに十分です。これは、抗BrdU抗体で検出できるようにBrdUを露出させるためにDNAの変性（HCl、熱、またはDNaseによる消化）を必要とするBrdUアッセイとは対照的です。BrdUアッセイのサンプル処理は、HCl法を使用した場合、細胞周期分布のシグナル変化や抗原認識部位の破壊を引き起こす可能性があります。対照的に、使いやすいEdU細胞増殖キットは、細胞周期色素に対応しています。このEdUアッセイキットは、表面マーカーや細胞内マーカーに対する抗体とのマルチプレックス化も可能です。

迅速でシンプルなプロトコル
Click-iT™ EdUプロトコルは、免疫組織化学的抗体標識のためのアルデヒド固定と洗剤浸透ステップに基づいていますが、EdUはサポニンやメタノールを含む他の
固定／浸透剤と互換性があります。わずか5ステップで細胞増殖データを分析できます。

•細胞のEdUM処理
• 細胞の固定および浸透処理
•Click-iT™検出カクテルでS期細胞を30分間検出
•1回の洗浄
• 分析

正確な結果を経済的に取得
キットあたりのアッセイ数を増やすことで、Click-IT™ EdU Alexa Fluor™ 647フローサイトメトリーアッセイキットは従来のBrdUアッセイよりも安価で、大規模な実験に最適です。

研究用途にのみご使用ください。ヒトおよび動物の治療または診断用には使用できません。