Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 488 Protein Synthesis Assay Kit

Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 488タンパク質合成アッセイキットは、蛍光顕微鏡法、ハイコンテントイメージング、またはフローサイメトリーを利用し、迅速かつ高感度で新生タンパク質合成を検出する、非毒性、非放射性の方法を提供します。このキットには、アルキン部分を含むメチオニンのアミノ酸アナログであるL-ホモプロパルギルグリシン（HPG）と、Alexa Fluor™ 488アジドが含まれています。HPGを培養細胞に供給すると、アクティブなタンパク質合成の過程でタンパク質に取り込まれます。Alexa Fluor™ 488アジドを添加することで、緑色の蛍光アジドとアルキンの間に化学選択的ライゲーション（クリック反応）が生じ、イメージングベースの分析による修飾タンパク質の検出が可能になります。

•非放射性—従来の³⁵S-メチオニン法の非放射性代替法
• バルクタンパク質の動力学を可視化—タンパク質の蛍光標識により、凝集を含む局在の特定が可能
• 特異的—ラベル標識と検出標識の間の選択的、特異的な反応
• 安定性 —不可逆的な共有結合を実現
• マルチプレックス化—Click™-iT AHA（アジドアミノ酸およびアルキン色素）と同時に使用することで空間的および時間的差異を測定
• 生体サンプルに適用可能—複雑さにかかわらず、高感度かつ低バックグラウンドで容易に検出

Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 488タンパク質合成アッセイキットは、HeLa、A549、およびU-2 OS細胞において、シクロヘキシミドやアニソマイシンなどのどタンパク質合成阻害剤を使用した試験で良好な結果を示しています。これらのプローブをタンパク質分解のモニターに使用できることも、HeLa細胞でプロテオーム阻害剤（MG132およびボルテゾミブ）とオートファジーの遮断薬（クロロキン）を使用して証明されています。

また、Click-It™ HPG Alexa Fluor™ 488タンパク質合成アッセイキットと、Click™-iT AHAをAlexa Fluor™ 594アルキンと共に使用した場合のClick-iT™ケミストリーの違いにより、これらの試薬を併用することで、新生タンパク質合成における空間的または時間的な違いを判別できます。