Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 594 Protein Synthesis Assay Kit

Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 594タンパク質合成アッセイキットでは、迅速、高感度、無毒、および非放射性の方式を使用して、蛍光顕微鏡、ハイコンテントイメージング、またはフローサイトメトリーで新生タンパク質合成を検出できます。このキットには、L-homopropargylglycine（HPG）、アルキン部分を含むメチオニンのアミノ酸類似体、Alexa Fluor™ 594アジドが含まれています。HPGは培養細胞に供給され、活性タンパク質合成中にタンパク質に取り込まれます。Alexa Fluor™ 594アジドを添加すると、緑色の蛍光アジドとアルキンとの間に化学選択的ライゲーションまたは「クリック」反応が生じ、画像ベースの分析によって修飾タンパク質を検出できるようになります。

•非放射性代替物—従来の³⁵Sメチオニンの代替になります
• バルクタンパク質動力学の可視化—タンパク質の蛍光標識により、凝集を含め、タンパク質の局在化を判別できます
• 特異性—標識と検出タグの間に選択的な特異反応が生じます
• 安定 —製品には不可逆的な共有結合が含まれています
• マルチプレックス化可能—Click™-iT AHA（アジドアミノ酸およびアルキン色素）と一緒に使用することで、空間的および時間的差異を検出します
• 生体サンプルに使用可能—複雑度に関係なく、簡単に検出でき、高感度で低バックグラウンドです

Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 594タンパク質合成アッセイキットは、HeLa、A549、U-2 OS細胞において、シクロヘキシミドやアニソマイシンなどのタンパク質合成を阻害するさまざまな試薬で適切にテストされています。また、これらのプローブがタンパク質分解のモニタリングに適用できるかどうかは、HeLa細胞内のプロテアソームの阻害剤（MG132およびボルテゾミブ）およびオートファジーの遮断薬（クロロキン）を使用して示されています。

さらに、Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 594タンパク質合成アッセイキットとClick-iT™ AHA Alexa Fluor™ 488 HCSキットの間にはClick-iT™ケミストリーにおける相違があるため、これらのキットを一緒に使用することで、新生タンパク質合成の差異を空間的または時間的に判別することができます。