Click-iT™ EdU Proliferation Assay for Microplates
Click-iT™ EdU Proliferation Assay for Microplates
Invitrogen™

Click-iT™ EdU Proliferation Assay for Microplates

マイクロプレート用Click-iT EdU増殖アッセイは、哺乳類細胞増殖の測定において、従来のBrdUベースの方法よりもシンプルで堅牢な方法を提供します。EdU(修飾チミジンアナログ)を新たに合成したDNAに組み込むと、西洋ワサビペルオキシダーゼ(HRP)が特異性の高いクリック反応により共有結合します詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
C10499400 Assays
製品番号(カタログ番号) C10499
価格(JPY)
107,700
キャンペーン価格
Ends: 27-Mar-2026
153,900
割引額 46,200 (30%)
Each
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数量:
400 Assays
マイクロプレート用Click-iT EdU増殖アッセイは、哺乳類細胞増殖の測定において、従来のBrdUベースの方法よりもシンプルで堅牢な方法を提供します。EdU(修飾チミジンアナログ)を新たに合成したDNAに組み込むと、西洋ワサビペルオキシダーゼ(HRP)が特異性の高いクリック反応により共有結合します。その後、HRP基質であるAmplex UltraRed試薬を添加し、得られた蛍光シグナルを検出します。このアッセイは、HRPがEdUに非常に特異的に結合しているため、マイクロプレートフォーマットでの哺乳動物細胞増殖の高感度かつ信頼性の高い測定を実現します。

マイクロプレート用Click-iT EdU増殖アッセイの特長:
性能の改善 — 組み込まれたEdUにHRPが直接結合することでアッセイ感度と精度が向上
信頼性の向上 — アッセイフォーマットの改善によりウェル間のばらつきが低下
プロトコルの簡素化 — データ取得までの時間が短縮し、プロトコルへの準拠が容易
マルチプレックス対応 — アッセイが他のセルヘルス試薬と簡単にマルチプレックス化できるため、サンプルあたりのデータ量が増加

細胞増殖の測定は、細胞の健康の評価、遺伝子毒性の測定、および抗がん剤の評価の基本的な方法です。増殖を測定する最も正確な方法は、DNA合成を直接検出することです。本来、これは、放射性ヌクレオシド(例:3H-チミジン)を組み込むことで実現されていました。この方法に代わって、ヌクレオシドアナログブロモデオキシウリジン(BrdU)の抗体ベースの検出が使用されるようになりました。BrdUを新たに合成されたDNAに組み込み、BrdU分子を抗BrdU抗体に曝露させるには変性が必要です。変性には過酷な方法(HCl、熱、または酵素)が使用され、時間がかかり、一定した実行することが困難です。

Click-iT EdU増殖アッセイはBrdUアッセイに代わる方法です。ヌクレオシドアナログEdU(5-エチニル-2´-デオキシウリジン)が生細胞に添加され、活性DNAの合成中にDNAに取り込まれます。組み込まれたEdUにはアルキン基が含まれており、高特異性の銅触媒共有結合反応(「クリック反応」)を使用してHRPに存在するアジド基に共有結合します。次に、Amplex UltraRed試薬を添加し、HRPによる高蛍光製品への変換が記録されます。その際には、蛍光マイクロプレートリーダー(励起:568、発光:585 nm)が使用されます。Amplex UltraRed試薬は、高い吸光係数、優れた量子効率、および自動酸化に対する耐性を備え、他の蛍光または比色HRP基質よりも高い感度と幅広いアッセイ範囲を提供します。また、蛍光または吸光度測定による検出により、汎用性も提供します。

Click-iT EdU増殖アッセイは、抗BrdUベースのマイクロプレート増殖アッセイと比較して少量の反応部分を使用し、抗体やDNAの変性を必要としません。どちらもアッセイ性能を低下させる可能性があります。さらに、ストレプトアビジン-ビオチン結合は不要であり、高レベルの内在性ビオチンを有する細胞に必要なビオチンブロッキングステップもありません。

研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
検出法蛍光
フォーマット96-ウェルプレート
グリーン機能危険性が低い
数量400 Assays
出荷条件室温またはウェットアイスでの出荷
使用対象(アプリケーション)増殖アッセイ
使用対象 (装置)マイクロプレートリーダー
製品ラインCyQUANT
製品タイプ増殖アッセイ
Unit SizeEach
組成および保存条件
遮光し、-20℃で、乾燥した場所に保存。

よくあるご質問(FAQ)

I am not getting any signal with the Click-iT EdU Cell Proliferation Assay for Microplates. What can cause this?

If the Amplex UltraRed reagent was spontaneously oxidized, all samples would have high levels of signal. The lack of any signal indicates that some component in the reaction is non-functional or little or no EdU was incorporated by the cells. The HRP-azide (Component B), the Click-iT EdU reaction additive (Component F), and the hydrogen peroxide (Component J) are the most labile components in the kit. HRP can be denatured and inhibited by sodium azide. The Click-iT Edu reaction additive (Component F) should be diluted only shortly before use and dilute solutions should not be stored. Hydrogen peroxide does spontaneously degrade over time, but more readily when diluted; prepare the hydrogen peroxide stock solution shortly before use and do not store.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

With the Click-iT EdU Cell Proliferation Assay for Microplates, can we use another HRP substrate other than the Amplex UltraRed reagent provided in the kit?

This may be possible, but the final working concentrations and incubation steps would have to be optimized by the user. Be advised that chromogenic substrates are not as sensitive as the fluorogenic Amplex UltraRed reagent.

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Can endogenous peroxidase activity interfere with the Click-iT EdU Cell Proliferation Assay for Microplates?

The Click-iT EdU Cell Proliferation Assay for Microplates protocol requires samples to be fixed and permeabilized prior to the click reaction. Most endogenous peroxidases may be inactivated after fixation/permeabilization and after the click reaction. If this is of concern, apply the Amplex UltraRed reaction mixture without added H2O2 to the samples after fixation, but before the click reaction (i.e., no HRP-azide added to the sample). In the absence of added H2O2 and HRP-azide, if you see any change in Amplex UltraRed fluorescence intensity, this is indicative of endogenous peroxidase activity.

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