CellLight™ Actin-RFP, BacMam 2.0
CellLight™ Actin-RFP, BacMam 2.0
Invitrogen™

CellLight™ Actin-RFP, BacMam 2.0

CellLight™アクチンRFP、BacMam 2.0は、生細胞中の赤色蛍光タンパク質(RFP)でアクチンをラベリングする簡単な方法を提供します。試薬を細胞に添加し、一晩インキュベートするだけで、翌朝にはイメージングの準備が整います。他の細胞構造をラベリングするには?CellLight™蛍光タンパク質ラベリングツールの詳細をご覧ください詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
C105831バイアル(s)
製品番号(カタログ番号) C10583
価格(JPY)
52,000
Each
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数量:
1バイアル(s)
CellLight™アクチンRFP、BacMam 2.0は、生細胞中の赤色蛍光タンパク質(RFP)でアクチンをラベリングする簡単な方法を提供します。試薬を細胞に添加し、一晩インキュベートするだけで、翌朝にはイメージングの準備が整います。

他の細胞構造をラベリングするには?CellLight™蛍光タンパク質ラベリングツールの詳細をご覧ください。

このすぐに使用可能なコンストラクトは、BacMam 2.0技術を使用して細胞にトランスフェクションされ、細胞毒性の影響をほとんど受けずに、RFPをヒトアクチンに融合して発現させます。生細胞におけるアクチンフィラメントの動的作用を研究し、他の蛍光タンパク質や有機色素と多重化します。

CellLight™コンストラクトを発現する細胞は、免疫細胞化学技術を使用したマルチプレックスイメージングのためにホルムアルデヒドで固定することもできます。

CellLight™テクノロジー:
迅速で便利:CellLight試薬™を細胞に添加し、アッセイに対応した凍結細胞を一晩インキュベートし、イメージング—または保存するだけで、後で使用できるようになります。
高効率:初代細胞、幹細胞、神経細胞など、さまざまな哺乳類細胞株の最大90%の形質導入。
柔軟性:マルチプレックス実験や共局在研究向けに複数のBacMam試薬を共輸送。線量を簡単に変化させることで、発現レベルを厳密に制御します。
低毒性:CellLight™試薬は、哺乳類細胞では非複製であり、生物学的安全レベル(BSL)1の処理には適しています。

BacMamテクノロジー

CellLight™アクチンRFP、BacMam 2.0は、ヒトアクチンとTagRFPの融合コンストラクトで、細胞アクチンRFPに正確かつ特異的な標的を提供します。この融合コンストラクトは昆虫ウイルスであるバキュロウイルスにパッケージされており、ヒト細胞では再現されず、ほとんどのラボで生物学的安全レベル(BSL)1で使用することが安全であると指定されています。BacMam技術により、ほとんどの哺乳類細胞タイプが、高効率かつ最小限の毒性で形質導入およびトランスフェクションされます。この一過性トランスフェクションは、一晩のインキュベーション後に最大5日間検出できます—ほとんどの動的細胞分析を実行するのに十分な期間です。あらゆるトランスフェクションおよび形質導入技術と同様に、BacMam法はすべての細胞を同等の効率でトランスフェクション/形質導入しないため、細胞集団研究または自動イメージングおよび自動カウントにはあまり適していません。CellLight™試薬は、細胞または細胞内の共局方化が必要な実験や、特別な分解能を必要とする細胞機能研究に最適です。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
赤色∼オレンジ
検出法蛍光
染色剤タイプRFP(TagRFP)
発光可視
励起波長域555⁄584
使用対象 (装置)蛍光顕微鏡, フローサイトメーター, 蛍光イメージャー
形状液体
製品ラインCellLight, Molecular Probes
数量1バイアル(s)
出荷条件湿氷
標的機能細胞構造
標識タイプ蛍光タンパク質
製品タイプアクチン
SubCellular Localizationアクチン
Unit SizeEach
組成および保存条件
2°C∼6°Cで、遮光してください。冷凍不可。

よくあるご質問(FAQ)

CellLight や Premo FUCCI cell cycle sensor などの BacMam 2.0試薬にて、どのようにすれば形質転換効率を上げることができますか?

様々な濃度 (particle-to-cell ratio (PPC))、インキュベーション時の容量、温度、時間、細胞密度を検討してください。 接着細胞の場合、70%程度のコンフレンシーを推奨します。 PPCを調整後、容量が次の重要なパラメーターとなります。 もしそれでもうまくいかない時、BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107) で効率を上げることもできます。

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

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Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

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For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

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引用および参考文献 (14)

引用および参考文献
Abstract
A Review of Reagents for Fluorescence Microscopy of Cellular Compartments and Structures, Part III: Reagents for Actin, Tubulin, Cellular Membranes, and Whole Cell and Cytoplasm.
Authors:Kilgore JA, Dolman NJ, Davidson MW,
Journal:
PubMed ID:24510770
'Non-antibody commercial fluorescent reagents for imaging of cytoskeletal structures have been limited primarily to tubulin and actin, with the main factor in choice based mainly on whether cells are live or fixed and permeabilized. A wider range of options exist for cell membrane dyes, and the choice of reagent primarily ... More
Stress fibers stabilize the position of intranuclear DNA through mechanical connection with the nucleus in vascular smooth muscle cells.
Authors:Nagayama K, Yahiro Y, Matsumoto T,
Journal:FEBS Lett
PubMed ID:22094165
Actin stress fibers (SFs) running across the top surface of the nucleus in vascular smooth muscle cells were dissected using laser nano-dissection technique to release its pretension, and the dynamic behavior of SFs, nucleus, and intranuclear DNA were investigated. SFs shortened across the top surface of the nuclei after their ... More
Role of c-Met/phosphatidylinositol 3-kinase (PI3k)/Akt signaling in hepatocyte growth factor (HGF)-mediated lamellipodia formation, reactive oxygen species (ROS) generation, and motility of lung endothelial cells.
Authors:Usatyuk PV, Fu P, Mohan V, Epshtein Y, Jacobson JR, Gomez-Cambronero J, Wary KK, Bindokas V, Dudek SM, Salgia R, Garcia JG, Natarajan V,
Journal:
PubMed ID:24634221
Hepatocyte growth factor (HGF) mediated signaling promotes cell proliferation and migration in a variety of cell types and plays a key role in tumorigenesis. As cell migration is important to angiogenesis, we characterized HGF-mediated effects on the formation of lamellipodia, a pre-requisite for migration using human lung microvascular endothelial cells ... More
Viscoelastic cell mechanics and actin remodelling are dependent on the rate of applied pressure.
Authors:Pravincumar P, Bader DL, Knight MM,
Journal:PLoS One
PubMed ID:22984454
Living cells are subjected to external and internal mechanical stresses. The effects of these stresses on the deformation and subsequent biological response of the cells remains unclear. This study tested the hypothesis that the rate at which pressure (or stress) is applied influence the viscoelastic properties of the cell associated ... More
Baculovirus-mediated gene transfer into mammalian cells.
Authors:Boyce FM, Bucher NL,
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:8637876
This paper describes the use of the baculovirus Autographa californica multiple nuclear polyhedrosis virus (AcMNPV) as a vector for gene delivery into mammalian cells. A modified AcMNPV virus was prepared that carried the Escherichia coli lacZ reporter gene under control of the Rous sarcoma virus promoter and mammalian RNA processing ... More