CellLight™ Golgi-RFP, BacMam 2.0
CellLight™ Golgi-RFP, BacMam 2.0
Invitrogen™

CellLight™ Golgi-RFP, BacMam 2.0

CellLight™ゴルジ-RFP、BacMam 2.0は、生細胞中の赤色蛍光タンパク質(RFP)でゴルジを標識する簡単な方法を提供します。試薬を細胞に添加し、一晩インキュベートするだけで、翌朝にはイメージングの準備が整います。他の細胞構造をラベリングするには?CellLight™蛍光タンパク質ラベリングツールの詳細はこちらこのすぐに使用可能なコンストラクトをBacMam詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
C105931バイアル
製品番号(カタログ番号) C10593
価格(JPY)
52,000
Each
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数量:
1バイアル
CellLight™ゴルジ-RFP、BacMam 2.0は、生細胞中の赤色蛍光タンパク質(RFP)でゴルジを標識する簡単な方法を提供します。試薬を細胞に添加し、一晩インキュベートするだけで、翌朝にはイメージングの準備が整います。

他の細胞構造をラベリングするには?CellLight™蛍光タンパク質ラベリングツールの詳細はこちら

このすぐに使用可能なコンストラクトをBacMam 2.0テクノロジーを用いて細胞に導入し、RFPのヒトのゴルジレジデント酵素(N-アセチルガラクトサミン転移酵素)への融合を発現させます。蛍光イメージングを使用し、他の蛍光タンパク質や有機色素と多重化することで、生細胞におけるゴルジ-RFPの挙動を観察できます。

CellLight™コンストラクトを発現する細胞をホルムアルデヒドで固定し、免疫細胞化学技術を用いたマルチプレックスイメージングを行うこともできます。

CellLight™テクノロジーとは:
迅速で便利:CellLight試薬™を細胞に添加し、アッセイに対応した凍結細胞を一晩インキュベートし、イメージング—または保存するだけで、後で使用できるようになります。
高効率:初代細胞、幹細胞、神経細胞など、さまざまな哺乳類細胞株の最大90%の形質導入。
柔軟性:マルチプレックス実験や共局在研究向けに複数のBacMam試薬を共輸送。線量を簡単に変化させることで、発現レベルを厳密に制御します。
低毒性:CellLight™試薬は哺乳類細胞では複製されず、バイオセーフティレベル(BSL)1の取り扱いに適しています。

BacMamテクノロジー
CellLight™ゴルジ-GFP、BacMam 2.0は、ヒトのゴルジレジデント酵素(N-アセチルガラクトサミン転移酵素)とTagRFPの融合コンストラクトで、細胞のゴルジ-RFPを正確かつ特異的に標的にします。この融合コンストラクトは昆虫ウイルスであるバキュロウイルスにパッケージされており、ヒト細胞では再現されず、ほとんどのラボで生物学的安全レベル(BSL)1で使用することが安全であると指定されています。BacMam技術により、ほとんどの哺乳類細胞タイプが、高効率かつ最小限の毒性で形質導入およびトランスフェクションされます。この一過性トランスフェクションは、一晩のインキュベーション後に最大5日間検出できます—ほとんどの動的細胞分析を実行するのに十分な期間です。あらゆるトランスフェクションおよび形質導入技術と同様に、BacMam法はすべての細胞を同等の効率でトランスフェクション/形質導入しないため、細胞集団研究または自動イメージングおよび自動カウントにはあまり適していません。CellLight™試薬は、細胞または細胞内の共局方化が必要な実験や、特別な分解能を必要とする細胞機能研究に最適です。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
赤-オレンジ, オレンジ
検出法蛍光
染色剤タイプRFP(TagRFP)
発光可視
励起波長域555⁄584
使用対象 (装置)共焦点顕微鏡, 蛍光顕微鏡
形状液体
製品ラインCellLight
数量1バイアル
出荷条件湿氷
技術蛍光強度
標識タイプ蛍光タンパク質
製品タイプゴルジ
SubCellular Localizationゴルジ
Unit SizeEach
組成および保存条件
2°C∼6°Cで保管し、遮光してください。冷凍しないでください。

よくあるご質問(FAQ)

CellLight や Premo FUCCI cell cycle sensor などの BacMam 2.0試薬にて、どのようにすれば形質転換効率を上げることができますか?

様々な濃度 (particle-to-cell ratio (PPC))、インキュベーション時の容量、温度、時間、細胞密度を検討してください。 接着細胞の場合、70%程度のコンフレンシーを推奨します。 PPCを調整後、容量が次の重要なパラメーターとなります。 もしそれでもうまくいかない時、BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107) で効率を上げることもできます。

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

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Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

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For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

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引用および参考文献 (31)

引用および参考文献
Abstract
Faecal excretion of ciprofloxacin after a single oral dose and its effect on faecal bacteria in healthy volunteers.
Authors:Pecquet S, Ravoire S, Andremont A,
Journal:J Antimicrob Chemother
PubMed ID:2211433
'High concentrations of ciprofloxacin have been shown to persist in the faeces of volunteers for several days after a week of oral treatment with this drug, which was also found to have a prolonged effect on aerobic Gram-negative intestinal bacteria. To determine whether a shorter course of ciprofloxacin would have ... More
Intracellular trafficking mechanism, from intracellular uptake to extracellular efflux, for phospholipid/cholesterol liposomes.
Authors:Un K, Sakai-Kato K, Oshima Y, Kawanishi T, Okuda H,
Journal:Biomaterials
PubMed ID:22858002
'Liposomes are widely used as drug delivery vehicles to transfer chemotherapeutic agents, proteins, and nucleic acids into target cells. To improve therapeutic effects and reduce unexpected toxic side-effects, it is necessary to understand the mechanism of liposomal uptake into cells, and the intracellular fate of internalized liposomes. The intracellular fate ... More
Utilization of fluorescent probes for the quantification and identification of subcellular proteomes and biological processes regulated by lipid peroxidation products.
Authors:Cummins TD, Higdon AN, Kramer PA, Chacko BK, Riggs DW, Salabei JK, Dell'italia LJ, Zhang J, Darley-Usmar VM, Hill BG,
Journal:Free Radic Biol Med
PubMed ID:22954622
Oxidative modifications to cellular proteins are critical in mediating redox-sensitive processes such as autophagy, the antioxidant response, and apoptosis. The proteins that become modified by reactive species are often compartmentalized to specific organelles or regions of the cell. Here, we detail protocols for identifying the subcellular protein targets of lipid ... More
Quadriwave lateral shearing interferometry for quantitative phase microscopy of living cells.
Authors:Bon P, Maucort G, Wattellier B, Monneret S,
Journal:Opt Express
PubMed ID:19654713
Phase imaging with a high-resolution wavefront sensor is considered. This is based on a quadriwave lateral shearing interferometer mounted on a non-modified transmission white-light microscope. The measurement technology is explained both in the scope of wave optics and geometrical optics in order to discuss its implementation on a conventional microscope. ... More
Combination of Cl-IB-MECA with paclitaxel is a highly effective cytotoxic therapy causing mTOR-dependent autophagy and mitotic catastrophe on human melanoma cells.
Authors:Soares AS, Costa VM, Diniz C, Fresco P,
Journal:
PubMed ID:24659394
Metastatic melanoma is the deadliest form of skin cancer. It is highly resistant to conventional therapies,particularly to drugs that cause apoptosis as the main anticancer mechanism. Recently, induction of autophagic cell death is emerging as a novel therapeutic target for apoptotic-resistant cancers. We aimed to investigate the underlying mechanisms elicited ... More