CellLight™ Lysosomes-RFP, BacMam 2.0
CellLight™ Lysosomes-RFP, BacMam 2.0
Invitrogen™

CellLight™ Lysosomes-RFP, BacMam 2.0

CellLight™リソソームGFP、BacMam 2.0は、生細胞中の赤色蛍光タンパク質(RFP)でリソソームをラベリングする簡単な方法を提供します。試薬を細胞に添加し、一晩インキュベートするだけで、翌朝にはイメージングの準備が整います。他の細胞構造をラベリングするには?CellLight™蛍光タンパク質ラベリングツールの詳細をご覧ください詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
C105971バイアル赤-オレンジ, オレンジ
製品番号(カタログ番号) C10597
価格(JPY)
52,000
Each
お問い合わせください ›
数量:
1バイアル
色:
赤-オレンジ, オレンジ
CellLight™リソソームGFP、BacMam 2.0は、生細胞中の赤色蛍光タンパク質(RFP)でリソソームをラベリングする簡単な方法を提供します。試薬を細胞に添加し、一晩インキュベートするだけで、翌朝にはイメージングの準備が整います。

他の細胞構造をラベリングするには?CellLight™蛍光タンパク質ラベリングツールの詳細をご覧ください。

このすぐに使用可能なコンストラクトは、BacMam 2.0技術を使用して細胞にトランスフェクションされ、RFPをLamp1(リソソーム膜タンパク質1)に融合して発現させます。複数のトラッキング色素またはトレーシング色素を使用して、オルガネラのpHやラベルに関係なく、生細胞のリソソームRFPの挙動を観察し、細胞の動的なプロセスをイメージングできます。

CellLight™コンストラクトを発現する細胞は、免疫細胞化学技術を使用したマルチプレックスイメージングのためにホルムアルデヒドで固定することもできます。

CellLight™テクノロジー:
迅速で便利:CellLight試薬™を細胞に添加し、アッセイに対応した凍結細胞を一晩インキュベートし、イメージング—または保存するだけで、後で使用できるようになります。
高効率:初代細胞、幹細胞、神経細胞など、さまざまな哺乳類細胞株の最大90%の形質導入。
柔軟性:マルチプレックス実験や共局在研究向けに複数のBacMam試薬を共輸送。線量を簡単に変化させることで、発現レベルを厳密に制御します。
低毒性:CellLight™試薬は、哺乳類細胞では非複製であり、生物学的安全レベル(BSL)1の処理には適しています。

BacMam技術
CellLight™リソソームGFP、BacMam 2.0は、Lamp1(リソソーム膜タンパク質1)とTagRFPの融合コンストラクトで、細胞リソソームRFPに正確かつ特異的な標的を提供します。この融合コンストラクトは昆虫ウイルスであるバキュロウイルスにパッケージされており、ヒト細胞では再現されず、ほとんどのラボで生物学的安全レベル(BSL)1で使用することが安全であると指定されています。BacMam技術により、ほとんどの哺乳類細胞タイプが、高効率かつ最小限の毒性で形質導入およびトランスフェクションされます。この一過性トランスフェクションは、一晩のインキュベーション後に最大5日間検出できます—ほとんどの動的細胞分析を実行するのに十分な期間です。あらゆるトランスフェクションおよび形質導入技術と同様に、BacMam法はすべての細胞を同等の効率でトランスフェクション/形質導入しないため、細胞集団研究または自動イメージングおよび自動カウントにはあまり適していません。CellLight™試薬は、細胞または細胞内の共局方化が必要な実験や、特別な分解能を必要とする細胞機能研究に最適です。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
赤-オレンジ, オレンジ
検出法蛍光
染色剤タイプRFP(TagRFP)
発光可視
励起波長域555⁄584
使用対象 (装置)共焦点顕微鏡, 蛍光顕微鏡
形状液体
製品ラインCellLight
数量1バイアル
出荷条件湿氷
技術蛍光強度
標識タイプ蛍光タンパク質
製品タイプリソソームプローブ
SubCellular Localizationリソソーム
Unit SizeEach
組成および保存条件
2°C∼6°Cで保管し、遮光してください。冷凍しないでください。

よくあるご質問(FAQ)

CellLight や Premo FUCCI cell cycle sensor などの BacMam 2.0試薬にて、どのようにすれば形質転換効率を上げることができますか?

様々な濃度 (particle-to-cell ratio (PPC))、インキュベーション時の容量、温度、時間、細胞密度を検討してください。 接着細胞の場合、70%程度のコンフレンシーを推奨します。 PPCを調整後、容量が次の重要なパラメーターとなります。 もしそれでもうまくいかない時、BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107) で効率を上げることもできます。

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

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Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

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For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

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引用および参考文献 (22)

引用および参考文献
Abstract
Cell entry and trafficking of human adenovirus bound to blood factor X is determined by the fiber serotype and not hexon:heparan sulfate interaction.
Authors:Corjon S, Gonzalez G, Henning P, Grichine A, Lindholm L, Boulanger P, Fender P, Hong SS,
Journal:PLoS One
PubMed ID:21637339
'Human adenovirus serotype 5 (HAdV5)-based vectors administered intravenously accumulate in the liver as the result of their direct binding to blood coagulation factor X (FX) and subsequent interaction of the FX-HAdV5 complex with heparan sulfate proteoglycan (HSPG) at the surface of liver cells. Intriguingly, the serotype 35 fiber-pseudotyped vector HAdV5F35 ... More
Particles on the move: intracellular trafficking and asymmetric mitotic partitioning of nanoporous polymer particles.
Authors:Yan Y, Lai ZW, Goode RJ, Cui J, Bacic T, Kamphuis MM, Nice EC, Caruso F,
Journal:
PubMed ID:23713907
'Nanoporous polymer particles (NPPs) prepared by mesoporous silica templating show promise as a new class of versatile drug/gene delivery vehicles owning to their high payload capacity, functionality, and responsiveness. Understanding the cellular dynamics of such particles, including uptake, intracellular trafficking, and distribution, is an important requirement for their development as ... More
GX15-070 (obatoclax) induces apoptosis and inhibits cathepsin D- and L-mediated autophagosomal lysis in antiestrogen-resistant breast cancer cells.
Authors:Schwartz-Roberts JL, Shajahan AN, Cook KL, Wärri A, Abu-Asab M, Clarke R,
Journal:Mol Cancer Ther
PubMed ID:23395885
'In estrogen receptor-positive (ER+) breast cancer cells, BCL2 overexpression contributes to antiestrogen resistance. Direct targeting of the antiapoptotic BCL2 members with GX15-070 (obatoclax), a BH3-mimetic currently in clinical development, is an attractive strategy to overcome antiestrogen resistance in some breast cancers. Recently, GX15-070 has been shown to induce both apoptosis ... More
The possible
Authors:Benjaminsen RV, Mattebjerg MA, Henriksen JR, Moghimi SM, Andresen TL,
Journal:Mol Ther
PubMed ID:23032976
Polycations such as polyethylenimine (PEI) are used in many novel nonviral vector designs and there are continuous efforts to increase our mechanistic understanding of their interactions with cells. Even so, the mechanism of polyplex escape from the endosomal/lysosomal pathway after internalization is still elusive. The  ... More
Inhibitors of intravesicular acidification protect against Shiga toxin in a pH-independent manner.
Authors:Dyve Lingelem AB, Bergan J, Sandvig K,
Journal:Traffic
PubMed ID:22132807
Shiga toxin inhibits protein synthesis after being transported from the cell surface to endosomes and retrogradely through the Golgi apparatus to the endoplasmic reticulum (ER) and into the cytosol. In this study, we have abolished proton gradients across internal membranes in different ways and investigated the effect on the various ... More