CellLight™ Talin-GFP, BacMam 2.0

Citations & References (6)

Invitrogen™

CellLight™ Talin-GFP, BacMam 2.0

製品番号（カタログ番号）	数量
C10611	1バイアル

製品番号（カタログ番号） C10611

価格（JPY）

52,000

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1バイアル

CellLight™タリン-GFP、BacMam 2.0は、生細胞中の緑色蛍光タンパク質（GFP）でタリンを標識する簡単な方法を提供します。試薬を細胞に添加し、一晩インキュベートするだけで、翌朝にはイメージングの準備が整います。

他の細胞構造をラベリングするには？CellLight™蛍光タンパク質ラベリングツールの詳細はこちら

このすぐに使用可能なコンストラクトをBacMam 2.0テクノロジーを用いて細胞に形質導入／導入し、GFPのヒトのタリンのC末端への融合を発現させます。生細胞におけるタリン-GFPの挙動を観察し、複数のトラッキング色素またはトレーシング色素を使用してインテグリンの焦点接着およびアクチンフィラメントとの相互作用を研究して動的細胞プロセスをイメージングできます。

CellLight™コンストラクトを発現する細胞をホルムアルデヒドで固定し、免疫細胞化学技術を用いたマルチプレックスイメージングを行うこともできます。

CellLight™テクノロジーとは：
•迅速で便利：CellLight試薬™を細胞に添加し、アッセイに対応した凍結細胞を一晩インキュベートし、イメージング—または保存するだけで、後で使用できるようになります。
• 高効率：初代細胞、幹細胞、神経細胞など、さまざまな哺乳類細胞株の最大90%の形質導入。
• 柔軟性：マルチプレックス実験や共局在研究向けに複数のBacMam試薬を共輸送。線量を簡単に変化させることで、発現レベルを厳密に制御します。
• 低毒性：CellLight™試薬は哺乳類細胞では複製されず、バイオセーフティレベル（BSL）1の取り扱いに適しています。

BacMam技術
CellLight™タリン-GFP、BacMam 2.0は、ヒトのタリンC末端とemGFPの融合コンストラクトで、細胞のタリン-GFPを正確かつ特異的に標的にします。この融合コンストラクトは昆虫ウイルスであるバキュロウイルスにパッケージされており、ヒト細胞では再現されず、ほとんどのラボで生物学的安全レベル（BSL）1で使用することが安全であると指定されています。BacMam技術により、ほとんどの哺乳類細胞タイプが、高効率かつ最小限の毒性で形質導入およびトランスフェクションされます。この一過性トランスフェクションは、一晩のインキュベーション後に最大5日間検出できます—ほとんどの動的細胞分析を実行するのに十分な期間です。あらゆるトランスフェクションおよび形質導入技術と同様に、BacMam法はすべての細胞を同等の効率でトランスフェクション/形質導入しないため、細胞集団研究または自動イメージングおよび自動カウントにはあまり適していません。CellLight™試薬は、細胞または細胞内の共局方化が必要な実験や、特別な分解能を必要とする細胞機能研究に最適です。

研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。

色Green

検出法蛍光

染色剤タイプGFP(EmGFP)

励起波長域488⁄510

使用対象 (装置)共焦点顕微鏡, 蛍光顕微鏡

製品ラインCellLight

数量1バイアル

出荷条件湿氷

技術蛍光強度

標識タイプ蛍光タンパク質

製品タイプタリン

SubCellular Localization細胞骨格

Unit SizeEach

組成および保存条件

2°C∼6°Cで保管し、遮光してください。冷凍しないでください。

よくあるご質問（FAQ）

CellLight や Premo FUCCI cell cycle sensor などの BacMam 2.0試薬にて、どのようにすれば形質転換効率を上げることができますか？

様々な濃度 (particle-to-cell ratio (PPC))、インキュベーション時の容量、温度、時間、細胞密度を検討してください。接着細胞の場合、70%程度のコンフレンシーを推奨します。 PPCを調整後、容量が次の重要なパラメーターとなります。もしそれでもうまくいかない時、BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107) で効率を上げることもできます。

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

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Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

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For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

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引用および参考文献 (6)

引用および参考文献

Abstract

Baculovirus-mediated gene transfer into mammalian cells.

Authors:Boyce FM, Bucher NL,

Journal:Proc Natl Acad Sci U S A

PubMed ID:8637876

This paper describes the use of the baculovirus Autographa californica multiple nuclear polyhedrosis virus (AcMNPV) as a vector for gene delivery into mammalian cells. A modified AcMNPV virus was prepared that carried the Escherichia coli lacZ reporter gene under control of the Rous sarcoma virus promoter and mammalian RNA processing ... More

BacMam technology and its application to drug discovery.

Authors:Ames RS, Kost TA, Condreay JP,

Journal:Expert Opin Drug Discov

PubMed ID:23488908

The recombinant baculovirus/insect cell system was firmly established as a leading method for recombinant protein production when a new potential use for these viruses was revealed in 1995. It was reported that engineered recombinant baculoviruses could deliver functional expression cassettes to mammalian cell types; a system which has come to ... More

Transferrin-targeted porous silicon nanoparticles reduce glioblastoma cell migration across tight extracellular space.

Authors:

Journal:Sci Rep

PubMed ID:32047170

Stress fiber anisotropy contributes to force-mode dependent chromatin stretching and gene upregulation in living cells.

Authors:

Journal:Nat Commun

PubMed ID:32994402

Force-activatable coating enables high-resolution cellular force imaging directly on regular cell culture surfaces.

Authors:

Journal:Phys Biol

PubMed ID:29785968

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