CellLight™ Tubulin-RFP, BacMam 2.0

Citations & References (12)

Invitrogen™

CellLight™ Tubulin-RFP, BacMam 2.0

製品番号（カタログ番号）	数量	色	ターゲット
C10614	1バイアル	Red	細胞骨格, チューブリン

製品番号（カタログ番号） C10614

価格（JPY）

52,000

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1バイアル

ターゲット:

細胞骨格, チューブリン

CellLight™チューブリンGFP、BacMam 2.0は、生細胞中の赤色蛍光タンパク質（RFP）でチューブリンをラベリングする簡単な方法を提供します。試薬を細胞に添加し、一晩インキュベートするだけで、翌朝にはイメージングの準備が整います。

他の細胞構造をラベリングするには？CellLight™蛍光タンパク質ラベリングツールの詳細をご覧ください。

このすぐに使用可能なコンストラクトは、BacMam 2.0技術を使用して細胞にトランスフェクションされ、RFPをヒトチューブリンに融合して発現させます。複数のトラッキング色素またはトレーシング色素を使用して、細胞毒性とラベルをほとんど含まない生細胞のチューブリンRFPの挙動を観察し、細胞の動的なプロセスをイメージングできます。

CellLight™コンストラクトを発現する細胞は、免疫細胞化学技術を使用したマルチプレックスイメージングのためにホルムアルデヒドで固定することもできます。

CellLight™テクノロジー：
•迅速で便利：CellLight試薬™を細胞に添加し、アッセイに対応した凍結細胞を一晩インキュベートし、イメージング—または保存するだけで、後で使用できるようになります。
• 高効率：初代細胞、幹細胞、神経細胞など、さまざまな哺乳類細胞株の最大90%の形質導入。
• 柔軟性：マルチプレックス実験や共局在研究向けに複数のBacMam試薬を共輸送。線量を簡単に変化させることで、発現レベルを厳密に制御します。
• 低毒性：CellLight™試薬は、哺乳類細胞では非複製であり、生物学的安全レベル（BSL）1の処理には適しています。

BacMam技術
CellLight™チューブリンGFP、BacMam 2.0は、ヒトチューブリンとTagRFPの融合コンストラクトで、細胞チューブリンRFPに正確かつ特異的な標的を提供します。この融合コンストラクトは昆虫ウイルスであるバキュロウイルスにパッケージされており、ヒト細胞では再現されず、ほとんどのラボで生物学的安全レベル（BSL）1で使用することが安全であると指定されています。BacMam技術により、ほとんどの哺乳類細胞タイプが、高効率かつ最小限の毒性で形質導入およびトランスフェクションされます。この一過性トランスフェクションは、一晩のインキュベーション後に最大5日間検出できます—ほとんどの動的細胞分析を実行するのに十分な期間です。あらゆるトランスフェクションおよび形質導入技術と同様に、BacMam法はすべての細胞を同等の効率でトランスフェクション/形質導入しないため、細胞集団研究または自動イメージングおよび自動カウントにはあまり適していません。CellLight™試薬は、細胞または細胞内の共局方化が必要な実験や、特別な分解能を必要とする細胞機能研究に最適です。

研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。

検出法蛍光

染色剤タイプRFP(TagRFP)

励起波長域555⁄584

使用対象 (装置)共焦点顕微鏡, 蛍光顕微鏡

製品ラインCellLight

数量1バイアル

出荷条件湿氷

ターゲット細胞骨格, チューブリン

技術蛍光強度

標識タイプ蛍光タンパク質

製品タイプチューブリン

SubCellular Localizationチューブリン, 細胞骨格, Tubulin

Unit SizeEach

組成および保存条件

2°C∼6°Cで保管し、遮光してください。冷凍しないでください。

よくあるご質問（FAQ）

CellLight や Premo FUCCI cell cycle sensor などの BacMam 2.0試薬にて、どのようにすれば形質転換効率を上げることができますか？

様々な濃度 (particle-to-cell ratio (PPC))、インキュベーション時の容量、温度、時間、細胞密度を検討してください。接着細胞の場合、70%程度のコンフレンシーを推奨します。 PPCを調整後、容量が次の重要なパラメーターとなります。もしそれでもうまくいかない時、BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107) で効率を上げることもできます。

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

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Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

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For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

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引用および参考文献 (12)

引用および参考文献

Abstract

Sperm-associated antigen 4, a novel hypoxia-inducible factor 1 target, regulates cytokinesis, and its expression correlates with the prognosis of renal cell carcinoma.

Authors:Shoji K, Murayama T, Mimura I, Wada T, Kume H, Goto A, Ohse T, Tanaka T, Inagi R, van der Hoorn FA, Manabe I, Homma Y, Fukayama M, Sakurai T, Hasegawa T, Aburatani H, Kodama T, Nangaku M,

Journal:Am J Pathol

PubMed ID:23602831

'Hypoxia plays a crucial role in many pathophysiological conditions, including cancer biology, and hypoxia-inducible factor (HIF) regulates transcriptional responses under hypoxia. To elucidate the cellular responses to hypoxia, we performed chromatin immunoprecipitation with deep sequencing in combination with microarray analysis and identified HIF-1 targets. We focused on one of the ... More

Optimization of gene delivery methods in Xenopus laevis kidney (A6) and Chinese hamster ovary (CHO) cell lines for heterologous expression of Xenopus inner ear genes.

Authors:Ramirez-Gordillo D, Trujillo-Provencio C, Knight VB, Serrano EE,

Journal:In Vitro Cell Dev Biol Anim

PubMed ID:21959846

'The Xenopus inner ear provides a useful model for studies of hearing and balance because it shares features with the mammalian inner ear, and because amphibians are capable of regenerating damaged mechanosensory hair cells. The structure and function of many proteins necessary for inner ear function have yet to be ... More

Dynamic Imaging of the Hepatitis C Virus NS5A Protein during a Productive Infection.

Authors:Eyre NS, Fiches GN, Aloia AL, Helbig KJ, McCartney EM, McErlean CS, Li K, Aggarwal A, Turville SG, Beard MR,

Journal:

PubMed ID:24429364

Hepatitis C virus (HCV) NS5A is essential for viral genome replication within cytoplasmic replication complexes and virus assembly at the lipid droplet (LD) surface, although its definitive functions are poorly understood. We developed approaches to investigate NS5A dynamics during a productive infection. We report here that NS5A motility and efficient ... More

MicroRNA and protein profiling of brain metastasis competent cell-derived exosomes.

Authors:Camacho L, Guerrero P, Marchetti D,

Journal:

PubMed ID:24066071

Exosomes are small membrane vesicles released by most cell types including tumor cells. The intercellular exchange of proteins and genetic material via exosomes is a potentially effective approach for cell-to-cell communication and it may perform multiple functions aiding to tumor survival and metastasis. We investigated microRNA and protein profiles of ... More

Nucleocytoplasmic coagulation: an injury-induced aggregation event that disulfide crosslinks proteins and facilitates their removal by plasmin.

Authors:Samson AL, Knaupp AS, Sashindranath M, Borg RJ, Au AE, Cops EJ, Saunders HM, Cody SH, McLean CA, Nowell CJ, Hughes VA, Bottomley SP, Medcalf RL,

Journal:Cell Rep

PubMed ID:23041318

Cellular injury causes a myriad of processes that affect proteostasis. We describe nucleocytoplasmic coagulation (NCC), an intracellular disulfide-dependent protein crosslinking event occurring upon late-stage cell death that orchestrates the proteolytic removal of misfolded proteins. In vitro and in vivo models of neuronal injury show that NCC involves conversion of soluble intracellular proteins, ... More

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