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Invitrogen™
Click-iT™ Plus EdU Alexa Fluor™ 488 Flow Cytometry Assay Kit
Click-iT™ Plus EdU Alexa Fluor™ 488フローサイトメトリーアッセイキットは、従来のBrdU法と比較して、増殖細胞のDNA複製を分析するための、シンプルで堅牢なアッセイを提供します。新たに合成されたDNAは詳細を見る
製品番号（カタログ番号） C10632
価格（JPY）お問い合わせください ›
140,300
Each
数量:
50 assays
Click-iT™ Plus EdU Alexa Fluor™ 488フローサイトメトリーアッセイキットは、従来のBrdU法と比較して、増殖細胞のDNA複製を分析するための、シンプルで堅牢なアッセイを提供します。新たに合成されたDNAは、フローサイトメーターの488 nmレーザーを使用して分析されます。Click-iT™ Plusの組成は、R-PEやR-PEタンデムなどの標準的なフルオロフォアや蛍光タンパク質に対応しています。
•マルチプレックス化可能—R-PE（およびタンデム）および蛍光タンパク質に対応
•正確—BrdUアッセイと比較して優位な結果
•高速—わずか60分
フローサイトメトリーのすべてのClick-iT™ EdUおよびClick-iT™ Plus EdUアッセイの選択ガイドを見る。
マルチプレックス化可能
Click-iT™ の組成は、オリジナルのClick-iT™ EdUフローサイトメトリーアッセイと比べてマルチプレックス性が向上しています。Click-iT™ Plus EdUアッセイは、オリジナルのClick-iT™ EdUアッセイの精度や速度を損なうことなく、R-PEおよびR-PEタンデム、ならびにGFPやmCherryなどの蛍光タンパク質と組み合わせて使用できます。
BrdUよりも優れた結果をもたらす高度な方法
増殖分析の最も正確な方法はDNA合成の直接測定です。これは当初、放射性ヌクレオシドの組み込みによって行われていました。この方法は、ヌクレオシドアナログブロモデオキシウリジン（BrdU）の抗体ベースの検出に置き換えられました。Click-iT™ Plus EdUフローサイトメトリーアッセイは、BrdUアッセイの新たな代替品です。EdU（5-エチニル-2´-デオキシウリジン）は、活性DNAの合成中にDNAに取り込まれるチミジンアナログです。検出は、クリックケミストリーに基づいています。クリックケミストリーは、アジドとアルキンの間の銅触媒共有結合反応です。このアプリケーションでは、アルキンはEdUのエチニル基に、アジドはAlexa™ Fluor色素に結合しています。標準的なフローサイトメトリー法は、集団におけるS相細胞の割合を測定するために使用されます。
穏やかな条件では細胞周期色素と抗体を使用できる
少量の色素アジドを使用することで、穏やかな条件で統合されたEdUを効率的に検出できます。一方、標準的なアルデヒドベースの固定および界面活性剤透過化では、Click-iT™ Plus検出試薬でDNAにアクセスできます。これは、抗BrdU抗体で検出できるようにBrdUを露出させるために（HCl、熱、またはDNaseでの消化を使用して）DNAの変性を必要とするBrdUアッセイとは対照的です。BrdUアッセイのサンプル処理は、HCl法を使用する際に、細胞周期分布のシグナル変化や抗原認識部位の破壊を引き起こす可能性があります。対照的に、使いやすいClick-iT™ Plus EdUアッセイは、細胞周期色素に対応しています。Click-iT™ Plus EdUアッセイは、表面および細胞内マーカーに対する抗体、およびR-PE、R-PEタンデム、蛍光タンパク質（GFPおよびmCherry）などの標準蛍光色素で標識されたコンジュゲートでマルチプレックス化することもできます。
迅速かつシンプルなプロトコル
Click-iT™ Plus EdUプロトコルは、免疫組織化学抗体標識のアルデヒド固定および界面活性剤透過化ステップに基づいています。ただし、EdUはサポニンやメタノールなどの他の固定／透過処理剤に対応しています。’わずか5ステップで細胞増殖データを解析できます。
1.EdUで細胞を処理します。
2.細胞を固定し透過します。
3.Click-iT™ Plus検出カクテルを使用して30分間、S相細胞を検出します。
4.1回洗浄します。
5分析します。
状況によっては、わずか60分で結果を確認できますが、すべてのアプリケーションに90分を推奨します。
•マルチプレックス化可能—R-PE（およびタンデム）および蛍光タンパク質に対応
•正確—BrdUアッセイと比較して優位な結果
•高速—わずか60分
フローサイトメトリーのすべてのClick-iT™ EdUおよびClick-iT™ Plus EdUアッセイの選択ガイドを見る。
マルチプレックス化可能
Click-iT™ の組成は、オリジナルのClick-iT™ EdUフローサイトメトリーアッセイと比べてマルチプレックス性が向上しています。Click-iT™ Plus EdUアッセイは、オリジナルのClick-iT™ EdUアッセイの精度や速度を損なうことなく、R-PEおよびR-PEタンデム、ならびにGFPやmCherryなどの蛍光タンパク質と組み合わせて使用できます。
BrdUよりも優れた結果をもたらす高度な方法
増殖分析の最も正確な方法はDNA合成の直接測定です。これは当初、放射性ヌクレオシドの組み込みによって行われていました。この方法は、ヌクレオシドアナログブロモデオキシウリジン（BrdU）の抗体ベースの検出に置き換えられました。Click-iT™ Plus EdUフローサイトメトリーアッセイは、BrdUアッセイの新たな代替品です。EdU（5-エチニル-2´-デオキシウリジン）は、活性DNAの合成中にDNAに取り込まれるチミジンアナログです。検出は、クリックケミストリーに基づいています。クリックケミストリーは、アジドとアルキンの間の銅触媒共有結合反応です。このアプリケーションでは、アルキンはEdUのエチニル基に、アジドはAlexa™ Fluor色素に結合しています。標準的なフローサイトメトリー法は、集団におけるS相細胞の割合を測定するために使用されます。
穏やかな条件では細胞周期色素と抗体を使用できる
少量の色素アジドを使用することで、穏やかな条件で統合されたEdUを効率的に検出できます。一方、標準的なアルデヒドベースの固定および界面活性剤透過化では、Click-iT™ Plus検出試薬でDNAにアクセスできます。これは、抗BrdU抗体で検出できるようにBrdUを露出させるために（HCl、熱、またはDNaseでの消化を使用して）DNAの変性を必要とするBrdUアッセイとは対照的です。BrdUアッセイのサンプル処理は、HCl法を使用する際に、細胞周期分布のシグナル変化や抗原認識部位の破壊を引き起こす可能性があります。対照的に、使いやすいClick-iT™ Plus EdUアッセイは、細胞周期色素に対応しています。Click-iT™ Plus EdUアッセイは、表面および細胞内マーカーに対する抗体、およびR-PE、R-PEタンデム、蛍光タンパク質（GFPおよびmCherry）などの標準蛍光色素で標識されたコンジュゲートでマルチプレックス化することもできます。
迅速かつシンプルなプロトコル
Click-iT™ Plus EdUプロトコルは、免疫組織化学抗体標識のアルデヒド固定および界面活性剤透過化ステップに基づいています。ただし、EdUはサポニンやメタノールなどの他の固定／透過処理剤に対応しています。’わずか5ステップで細胞増殖データを解析できます。
1.EdUで細胞を処理します。
2.細胞を固定し透過します。
3.Click-iT™ Plus検出カクテルを使用して30分間、S相細胞を検出します。
4.1回洗浄します。
5分析します。
状況によっては、わずか60分で結果を確認できますが、すべてのアプリケーションに90分を推奨します。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
検出法蛍光
染色剤タイプAlexa Fluor™ 488
フォーマットチューブ
グリーン機能危険性が低い
数量50 assays
出荷条件室温
Emission488
使用対象 (装置)フローサイトメーター
製品ラインClick-iT
製品タイプFlow Cytometry Assay Kit
Unit SizeEach
組成および保存条件
EdU（5-エチニル-2'-デオキシウリジン）、Alexa Fluor™ 488ピコリルアジド、無水ジメチルスルホキシド（DMSO）、Click-iT™固定剤、Click-iT™サポニンベースの透過処理および洗浄バッファー、銅保護剤、Click-iT™ EdU添加バッファーを含みます。2℃～8℃で保存してください 乾燥した状態で、遮光してください。
よくあるご質問（FAQ）
Click-iT® EdU kitを用いて 細胞増殖アッセイを行っています。 どのポイントで途中停止をかけられますか？ あるいは、全てのステップを連続して行う必要がありますか？
Click-iT Plus EdU Imaging Kit は、今までの Click-iT EdU Imaging Kit と何が異なるのですか？
What is the excitation/emission maxima of the Alexa Fluor 488 dye?
What are the main characteristics of a Click-iT reaction?
I will be performing a cell proliferation assay using Click-iT EdU kit. At what point can I stop overnight, or do I have to perform all the steps continuously?
引用および参考文献 (5)
引用および参考文献
Abstract
A portable BRCA1-HAC (human artificial chromosome) module for analysis of BRCA1 tumor suppressor function.
Journal:
PubMed ID:25260588
'BRCA1 is involved in many disparate cellular functions, including DNA damage repair, cell-cycle checkpoint activation, gene transcriptional regulation, DNA replication, centrosome function and others. The majority of evidence strongly favors the maintenance of genomic integrity as a principal tumor suppressor activity of BRCA1. At the same time some functional aspects
The microanatomic segregation of selection by apoptosis in the germinal center.
Journal:Science
PubMed ID:28935768
'B cells undergo rapid cell division and affinity maturation in anatomically distinct sites in lymphoid organs called germinal centers (GCs). Homeostasis is maintained in part by B cell apoptosis. However, the precise contribution of apoptosis to GC biology and selection is not well defined. We developed apoptosis-indicator mice and used
BRCA2 suppresses replication stress-induced mitotic and G1 abnormalities through homologous recombination.
Journal:Nat Commun
PubMed ID:28904335
Mutations in the tumor suppressor BRCA2 predominantly predispose to breast cancer. Paradoxically, while loss of BRCA2 promotes tumor formation, it also causes cell lethality, although how lethality is triggered is unclear. Here, we generate BRCA2 conditional non-transformed human mammary epithelial cell lines using CRISPR-Cas9. Cells are inviable upon BRCA2 loss,
Pulmonary pericytes regulate lung morphogenesis.
Journal:Nat Commun
PubMed ID:29934496
Blood vessels are essential for blood circulation but also control organ growth, homeostasis, and regeneration, which has been attributed to the release of paracrine signals by endothelial cells. Endothelial tubules are associated with specialised mesenchymal cells, termed pericytes, which help to maintain vessel wall integrity. Here we identify pericytes as
Single-cell transcriptomics reveals a new dynamical function of transcription factors during embryonic hematopoiesis.
Journal:Elife
PubMed ID:29555020
Recent advances in single-cell transcriptomics techniques have opened the door to the study of gene regulatory networks (GRNs) at the single-cell level. Here, we studied the GRNs controlling the emergence of hematopoietic stem and progenitor cells from mouse embryonic endothelium using a combination of single-cell transcriptome assays. We found that