Click-iT™ EdU Colorimetric IHC Detection Kit

Click-iT™ EdU Colorimetric IHC（免疫組織化学）検出キットは、組織切片内の増殖細胞の比色検出における従来の方法に代わる優れた選択肢です。このアッセイでは、アルキルモイティを含有するチミジンのヌクレオシドアナログである 5- エチニル -2'-deoxyuridine（EdU）が新たに合成された DNA に取り込まれます。アジド基を含むビオチンを添加すると、簡単な「クリック反応」によってアジドが EdU 分子のアルキルイン部分に結合します。ストレプトアビジンディノペルオキシダーゼとペルオキシダーゼ基質を添加すると、酵素反応によってシグナルが生成されます。このシグナルは、光顕微鏡で検出し、将来の分析のために保存できます。

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• 最適化—組織または細胞サンプルのいずれかの増殖細胞の比色検出を可能にします
• 効率的—変性ステップや過酷な処理は不要
• 堅牢性—細胞形態と細胞環境の保存の改善により、コンテンツが豊富な結果が得られます
•一貫性—検出のために可変抗体ロットに依存しません
• シンプル—従来の方法よりも短時間で一貫して機能するように設計されています

従来法では一貫性のない結果が生じる
細胞増殖の変化を測定することは、細胞の健康状態の評価、遺伝毒性の判定、抗がん剤研究の評価などの基本的な方法となります。そのためのもっとも正確な方法は、DNA合成を直接測定することです。従来の方法では、ヌクレオシドアナログ 5- ブロモ -2'- デオキシウリジン（BrdU）を使用していました。これは、新たに転写された DNA に取り込まれたチミジンのヌクレオシドアナログです。取り込み後、サンプルは過酷な方法（HCl、熱、または酵素）で処理され、DNA を変性させ、BrdU 分子を抗 BrdU 抗体で検出できるようになります。これらの過酷な処理は、サンプルの完全性、細胞形態、および画像品質に悪影響を与える可能性があります。また、製造時のばらつき、非特異的結合、交差反応の問題により、結果の一貫性が損なわれる可能性があります。


他のアッセイよりも優れた点 Click-iT EdU Colorimetric IHC 検出キット は、BrdU アッセイなどの従来の方法よりも多くの利点を提供します。ビオチン - アジド基のサイズが小さいため、穏やかな条件下での EdU の効率的な検出が可能です。一方、BrdU アッセイでは、HCl や熱誘導エピトープ回復（HIER）を使用した強力な変性法が必要です。さらに、非特異的結合を示す可能性がある抗体に依存する BrdU アッセイとは異なり、Click-iT EdU Colorimetric IHC 検出キットは、生体直交（生物学的にユニークな）部分—を利用しているため、バックグラウンドシグナルが低く、検出感度が高く、交差反応性の問題がありません。

このキットには、ホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE）組織サンプルに存在する、内蔵 EdU の検出に必要なすべてのコンポーネントが含まれています。このキットには、検査ごとに 100 μL 反応試薬を使用して、50（50） 18 x 18 mm カバースリップをラベリングするのに十分な試薬が含まれています。