BODIPY™ FL-X NHS Ester (Succinimidyl Ester)
BODIPY™ FL-X NHS Ester (Succinimidyl Ester)
Invitrogen™

BODIPY™ FL-X NHS Ester (Succinimidyl Ester)

BODIPY™ FL-X色素は、フルオレセイン(FITC)やAlexa Fluor™ 488色素と同等の励起特性と発光特性を備えた明るい緑色の蛍光色素です。高い吸光係数と蛍光量子収率を有し、溶媒極性やpHの変化に比較的影響を受けません。水溶性の高いフルオロフォアAlexa詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
D6102
または、製品番号D-6102
5 mg
製品番号(カタログ番号) D6102
または、製品番号D-6102
価格(JPY)
89,200
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数量:
5 mg
BODIPY™ FL-X色素は、フルオレセイン(FITC)やAlexa Fluor™ 488色素と同等の励起特性と発光特性を備えた明るい緑色の蛍光色素です。高い吸光係数と蛍光量子収率を有し、溶媒極性やpHの変化に比較的影響を受けません。水溶性の高いフルオロフォアAlexa Fluor™ 488色素やフルオレセイン(FITC)とは異なり、BODIPY™色素は脂質、膜、およびその他の親油性化合物の染色に最適な独自の疎水性特性を有しています。BODIPY™ FL-X色素は、励起状態の持続時間が比較的長く(通常5ナノ秒以上)、蛍光偏光を使用したアッセイや、多光子励起用の大きな2光子断面で効果的です。当社では、反応性色素の組成のほか、細胞の標識化と検出に最適化したさまざまな抗体、ペプチド、タンパク質、トレーサー、増幅基質を標識するBODIPY™ FL-X色素を用意しています(詳細はこちら)。

BODIPY™ FL-XのNHSエステル(スクシンイミジルエステル)は、色素によるタンパク質または抗体の標識に広く使用されているツールです。NHSエステルは、タンパク質、アミン修飾オリゴヌクレオチド、およびその他のアミン含有分子の一級アミン(R-NH2)を標識化できます。得られたBODIPY™ FL-Xコンジュゲートは、明るい蛍光、狭い発光波長帯域、比較的長い励起状態持続時間を備えています。これは、蛍光偏光アッセイや2光子励起(TPE)顕微鏡で効果的です。

この反応性色素には、蛍光色素とNHSエステル基の間に7原子アミノヘキサノイル('X')スペーサーが含まれます。このスペーサーは、蛍光色素分子をその結合点から分離するのに役立ち、蛍光色素分子と結合先の生体分子との相互作用を低減する可能性があります。

このBODIPY™ FL-X NHSエステルの詳細情報

:蛍光色素分子標識:BODIPY™ FL-X色素
反応基:NHSエステル(スクシンイミジルエステル)
反応性:タンパク質およびリガンドの一級アミン、アミン修飾オリゴヌクレオチド
コンジュゲートの励起/発光:504/510 nm
減衰係数:85,000 cm-1M-1
分子量:502.32

標準的な結合反応
アミノ基反応性試薬をほぼあらゆるタンパク質またはペプチドと結合させることができます。提供されているプロトコルはIgG抗体用に最適化されています。反応は任意の量のタンパク質に対応させることができますが、最適な結果を得るにはタンパク質の濃度を2 mg/mL以上にする必要があります。反応試薬とタンパク質の3つのモル比を使用して、3つの異なる標識度を試すことが推奨されます。

BODIPY™ NHSエステルは通常、高品質の無水ジメチルホルムアミド(DMF)またはジメチルスルホキシド(DMSO)に溶解し、反応は室温で0.1~0.2 Mの炭酸水素ナトリウム緩衝液(pH 8.3)で1時間行います。末端アミンのpKaはリジンのエプシロンアミノ基のpKaよりも低いため、中性pHに近いバッファーを使用するとアミン末端をより選択的に標識できます。

コンジュゲート精製
標識抗体は、通常、Sephadex™ G-25、BioGel™ P-30、または同等のゲルろ過カラムを使用して、遊離BODIPY™色素から分離されます。大容量または小容量のタンパク質の場合は、適切な分子量のカットオフまたは透析による精製を行うゲルろ過培地を選択してください。当社は、さまざまな量の抗体コンジュゲート用に最適化された精製キットを複数提供しています:
0.5~1 mg用Antibody Conjugate Purification Kit(A33086
20~50 µg用Antibody Conjugate Purification Kit(A33087
50~100 µg用Antibody Conjugate Purification Kit(A33088

タンパク質および抗体の標識に関する詳細
当社は、 お客様の出発物質および実験のセットアップに適したMolecular Probes™抗体およびタンパク質標識キットを幅広く提供しています。その他の選択肢は、当社の抗体標識キットをご覧になるか、当社の標識化学選択ツールをご利用ください。標識キットの詳細については、Molecular Probes™ハンドブックのタンパク質および核酸の標識キット—セクション 1.2をご覧ください。

当社では、お客様に合わせてカスタムコンジュゲートを実施
当社のオンラインカタログで目的の製品が見つからない場合は、カスタム抗体またはタンパク質コンジュゲートをご用意ください。当社のカスタム結合サービスは効率的かつ機密性が確保され、品質が保証されています。当社はISO 9001:2000認証を取得しています。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
化学反応性アミン
発光510 nm
励起504 nm
標識または色素BODIPY™ FL
製品タイプNHSエステル(スクシンイミジルエステル)
数量5 mg
反応性部分活性エステル、スクシンイミジルエステル
出荷条件室温
標識タイプBODIPY色素
製品ラインBODIPY
Unit SizeEach
組成および保存条件
フリーザー(-5∼-30度)に保存し、遮光してください。

引用および参考文献 (5)

引用および参考文献
Abstract
Fluorescent labeling of cell-free synthesized proteins by incorporation of fluorophore-conjugated nonnatural amino acids.
Authors:Kang SH, Jun SY, Kim DM
Journal:Anal Biochem
PubMed ID:17113028
'Although fluorescent dyes, such as fluorescein derivatives, have bulky and complex structures, nonnatural amino acids carrying these fluorescein derivatives are acceptable by the Escherichia coli ribosome and are useful for the cotranslational fluorescent labeling of cell-free synthesized proteins. Surprisingly, the incorporation efficiency of nonnatural amino acids carrying fluorescein derivatives into ... More
Controlling the intracellular localization of fluorescent polyamide analogues in cultured cells.
Authors:Crowley KS, Phillion DP, Woodard SS, Schweitzer BA, Singh M, Shabany H, Burnette B, Hippenmeyer P, Heitmeier M, Bashkin JK
Journal:Bioorg Med Chem Lett
PubMed ID:12699756
The intracellular distribution of fluorescent-labeled polyamides was examined in live cells. We showed that BODIPY-labeled polyamides accumulate in acidic vesicles, mainly lysosomes, in the cytoplasm of HCT116 colon cancer cells and human rheumatoid synovial fibroblasts (RSF). Verapamil blocked vesicular accumulation and led to nuclear accumulation of the BODIPY-labeled polyamide in ... More
Influence of fluorophore and linker composition on the pharmacology of fluorescent adenosine A1 receptor ligands.
Authors:Baker JG, Middleton R, Adams L, May LT, Briddon SJ, Kellam B, Hill SJ,
Journal:Br J Pharmacol
PubMed ID:20105183
BACKGROUND AND PURPOSE: The introduction of fluorescence-based techniques, and in particular the development of fluorescent ligands, has allowed the study of G protein-coupled receptor pharmacology at the single cell and single molecule level. This study evaluated how the physicochemical nature of the linker and the fluorophore affected the pharmacological properties ... More
A novel subfractionation approach for mitochondrial proteins: a three-dimensional mitochondrial proteome map.
Authors:Hanson BJ, Schulenberg B, Patton WF, Capaldi RA
Journal:Electrophoresis
PubMed ID:11332763
As mitochondria play critical roles in both cell life and cell death, there is great interest in obtaining a human mitochondrial proteome map. Such a map could potentially be useful in diagnosing diseases, identifying targets for drug therapy, and in screening for unwanted drug side effects. In this paper, we ... More
Binding and internalization of lipopolysaccharide by Cla-1, a human orthologue of rodent scavenger receptor B1.
Authors:Vishnyakova TG, Bocharov AV, Baranova IN, Chen Z, Remaley AT, Csako G, Eggerman TL, Patterson AP
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:12651854
Scavenger receptor, class B, type I (SR-BI) mediates selective uptake of high density lipoprotein (HDL) cholesteryl ester. SR-BI recognizes HDL, low density lipoprotein (LDL), exchangeable apolipoproteins, and protein-free lipid vesicles containing negatively charged phospholipids. Lipopolysaccharides (LPS) are highly glycosylated anionic phospholipids contributing to septic shock. Despite significant structural similarities between ... More