EnzChek™ Direct Phospholipase C Assay Kit

このキットを使用すると、マイクロプレートベースの生化学アッセイで、ホスファチジルコリン特異性ホスホリパーゼC（PLC）活性の連続モニタリングを実施できます。このアッセイでは、開裂時に明るい緑色で発光する、PCL選択性蛍光基質を使用します。

EnzChek™ DirectホスホリパーゼCアッセイキットは、PC-PLC活性をモニタリングするシンプルで堅牢な方法を提供します。各キットには、96ウェルフォーマットで200 µlの容量を使用した場合、マイクロプレート2枚分の試薬が入っています。PC-PLCは、アポトーシスや細胞生存のほか、がんやHIV1-7などの疾患に関わる多くの細胞シグナル伝達経路において重要な役割を果たします。このアッセイでは、PC-PLCの基質として、色素で標識されたsn-2アシル鎖を持つグリセロホスホエタノールアミンを使用します。リン酸塩が色素標識ジアシルグリセロールを放出する前にPC-PLCによる基質の開裂が発生し、これによって連続的に測定できる正の蛍光シグナルが生成されます。反応生成物の最大吸収波長は509 nmで、最大蛍光波長は516 nmです。このアッセイは、セレウス菌から精製された酵素を使用して、室温で1時間後に10 mU⁄mLのPC-PLCを検出することができます。このキットは、PC-PLC阻害物質の特性評価に有用であることが実証されており、直接測定が可能なため、化合物のスクリーニングにおける偽陽性の可能性が低減されます。