EnzChek™ Phospholipase A2 Assay Kit

Citations & References (3)

Invitrogen™

EnzChek™ Phospholipase A2 Assay Kit

このキットでは、ホスホリパーゼA2（PLA2）（A10072）の独立アッセイを実施できます。精製酵素製剤および細胞ライセート内の活性をモニタリングするための、96ウェルマイクロプレートによる完全なアッセイ2回分に必要な酵素と脂質の組み合わせが提供されます。EnzChekホスホリパーゼA2（PLA2詳細を見る

製品番号（カタログ番号）	数量
E10217	1 Kit

製品番号（カタログ番号） E10217

価格（JPY）

74,100

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1 Kit

このキットでは、ホスホリパーゼA2（PLA2）（A10072）の独立アッセイを実施できます。精製酵素製剤および細胞ライセート内の活性をモニタリングするための、96ウェルマイクロプレートによる完全なアッセイ2回分に必要な酵素と脂質の組み合わせが提供されます。EnzChekホスホリパーゼA2（PLA2）キットには、200 µLの容量を使用し、96ウェル仕様のマイクロプレート2回分のPLA2蛍光モニタリングを連続的に実施するための十分な試薬が含まれます。本製品はBis-BODIPY™ FL C11-PC試薬（B7701）の代替として使用できます。PLA2に対して選択的であり、比率測定可能な基質を提供することで、機器およびアッセイ条件によって生じる変動を低減します。ホスホリパーゼA2（PLA2）は、リン脂質のsn-2エステル結合を加水分解する酵素の総称です。これらの酵素の活性は、心血管疾患、炎症性および神経系疾患、がんにおいて重要な役割を果たします。EnzChek™ホスホリパーゼA2基質は、PLA2酵素活性の高感度かつ継続的な迅速リアルタイムモニタリングを可能にします。PLA2に対して選択的な独自の基質であり、蛍光強度または比率測定ベースの検出モードで使用できます。蛍光強度ベースの検出モードでは、PLA2活性は約515 nmでの単一波長の強度増加に基づいてモニタリングされます。比率測定解析は、結合開裂の前後に生じる、この基質に特徴的な蛍光共鳴エネルギー移動（FRET）による発光に基づいて行われます。この解析では、励起波長を≈ 460 nmとした場合の515/575 nmの蛍光強度比の変化に基づいてPLA2が検出されます。どちらの検出モードでも、PLA2に対して低バックグラウンド、高感度、および高特異性のシンプルなメソッドを提供します。

研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。

検出法蛍光強度

染色剤タイプBODIPY™ FL

フィルタータイプFITC（フルオレセイン）フィルター

数量1 Kit

出荷条件室温

基質特性脂質ベースの基質、化学基質

基質タイプホスホリパーゼ基質

標的酵素ホスホリパーゼ

色混合物、緑色

Emission比率測定：460～490⁄515、575、蛍光強度ベース：460-490⁄515

使用対象（アプリケーション）ホスホリパーゼA2アッセイ

使用対象 (装置)マイクロプレートリーダー

製品ラインEnzChek、Molecular Probes

製品タイプホスホリパーゼアッセイ

Unit SizeEach

組成および保存条件

1キット乾燥させ、-<20℃で保管。要遮光

よくあるご質問（FAQ）

What is the LoD for the EnzChek Phospholipase A2 Assay Kit (Cat. No. E10217)?

The EnzChek Phospholipase A2 Assay Kit (Cat. No. E10217) can detect PLA2 at 0.05 U/mL or lower.

The FRET-based substrate Red/Green BODIPY PC-A2 shows no change in fluorescence upon enzymatic cleavage. I'm not seeing an increasing green signal with higher concentrations of phospholipase A2 and no change in red fluorescence. Why is this?

There are numerous factors that can interfere with FRET-based detection. Here are a few items to consider:

a) Is there any component in the reaction solution that can quench green fluorescence?
b) Is there any component in the reaction solution that autofluoresces in the green or red emission range?
c) Too high of a substrate concentration may result in diffusional FRET: Lower the final working concentration of the substrate.
d) Ensure adequate dispersal of the substrate during the reaction. BODIPY dyes are very hydrophobic, and aggregates of the green product, BODIPY FL, can form an excimer and emit in the red range.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

You provide Phospholipase A2 from honey bee venom in the EnzChek Phospholipase A2 Assay Kit. Can the kit be used with phospholipase A2 from other species?

Yes, phospholipase A2 from other species may be used as long as the phospholipase A2 can hydrolyze the sn-2 ester linkage of phospholipids and the enzymatic reaction can be done within a pH of >3 and <9.

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引用および参考文献 (3)

引用および参考文献

Abstract

Crystal structure of the predicted phospholipase LYPLAL1 reveals unexpected functional plasticity despite close relationship to acyl protein thioesterases.

Authors:Bürger M, Zimmermann TJ, Kondoh Y, Stege P, Watanabe N, Osada H, Waldmann H, Vetter IR,

Journal:J Lipid Res

PubMed ID:22052940

'Sequence homology indicates the existence of three human cytosolic acyl protein thioesterases, including APT1 that is known to depalmitoylate H- and N-Ras. One of them is the lysophospholipase-like 1 (LYPLAL1) protein that on the one hand is predicted to be closely related to APT1 but on the other hand might ... More

Alterations in cerebrospinal fluid glycerophospholipids and phospholipase A2 activity in Alzheimer's disease.

Authors:Fonteh AN, Chiang J, Cipolla M, Hale J, Diallo F, Chirino A, Arakaki X, Harrington MG,

Journal:

PubMed ID:23868911

'Our aim is to study selected cerebrospinal fluid (CSF) glycerophospholipids (GP) that are important in brain pathophysiology. We recruited cognitively healthy (CH), minimally cognitively impaired (MCI), and late onset Alzheimer''s disease (LOAD) study participants and collected their CSF. After fractionation into nanometer particles (NP) and supernatant fluids (SF), we studied ... More

Group V secretory phospholipase A2 plays a pathogenic role in myocardial ischaemia-reperfusion injury.

Authors:Yano T, Fujioka D, Saito Y, Kobayashi T, Nakamura T, Obata JE, Kawabata K, Watanabe K, Watanabe Y, Mishina H, Tamaru S, Kugiyama K,

Journal:Cardiovasc Res

PubMed ID:21169294

Group V secretory phospholipase A(2) (sPLA(2)-V) is highly expressed in the heart. This study examined (i) the role of sPLA(2)-V in myocardial ischaemia-reperfusion (I/R) injury and (ii) the cooperative action of sPLA(2)-V and cytosolic PLA(2) (cPLA(2)) in myocardial I/R injury, using sPLA(2)-V knockout (sPLA(2)V(-/-)) mice. Myocardial I/R injury was created ... More