EnzChek™ Caspase-3 Activity Assay Kits

EnzChek Caspase-3 Activity Assay Kitは、カスパーゼ-3酵素による切断時に蛍光を発するよう専用設計された基質を利用しており、Caspase-3活性介在性アポトーシスに対してシンプルで信頼性の高い検出を可能にします。EnzChek Caspase-3 Activity Assay Kitは、Z-DEVD-AMCまたはZ-DEVD-R110基質のいずれかで使用可能であり、カスパーゼ3/7によるタンパク質分解切断時に明るい蛍光を生成します。

EnzChek Caspase-3 Activity Assay Kitは、カスパーゼ-3/7活性をアッセイするためのシンプルで信頼性の高い方法を提供することにより、アポトーシスの検出を可能にします。このキットでは、蛍光光度計または蛍光マイクロプレートリーダーを使用して、細胞抽出物および精製酵素調製物中のカスパーゼ-3/7の活性を継続的に測定することが可能です。

EnzChek Caspase-3活性アッセイキットの主な特長は以下のとおりです：
• 標準的なフルオレセイン（FITC）励起／発光設定を使用した蛍光アッセイ
• フォーマットにより、細胞抽出物中のカスパーゼ-3/7活性の連続測定が可能
• 蛍光および酵素コントロールを付属

EnzChek Caspase-3 Activity Assay Kitに含まれるアミノメチルクマリン（AMC）由来の基質（Z-アスパラギン酸グルタミン酸-バリン-アスパラギン酸（DEVD）-AMC）は、UVレンジで弱い蛍光（最大励起／最大発光、約330/390 nm）ですが、タンパク質分解切断時に明るい青色蛍光産物（最大励起／最大発光、約342/441 nm）を生成します。このキットは、蛍光光度計または蛍光マイクロプレートリーダーを使用して、細胞抽出物および精製酵素調製物中のカスパーゼ-3とそれに密接に関連するプロテアーゼの活性を継続的に測定するために使用できます。

EnzChek Caspase-3 Activity Assay Kitで使用されるローダミン110由来基質（Z-DEVD-R110）は非蛍光性のビスアミド化合物であり、酵素切断時に2段階のプロセスで蛍光モノアミドに変換され、さらに蛍光強度の高いR110産物に変換されます。これらの加水分解産物はいずれもフルオレセインと同様のスペクトル特性を示し、そのピーク励起波長および発光波長はそれぞれ496 nmおよび520 nmとなります。

EnzChek Caspase Activity Assay Kitには、基質に加えて、可逆的なアルデヒド阻害剤であるAc-DEVD-CHO、AMCまたはR110標準液が含まれています。Ac-DEVD-CHO阻害剤により、誘導細胞集団とコントロール細胞集団の両方について、蛍光シグナルがカスパーゼ-3/7の活性に起因するものであることを確認できます。また、参照標準により、反応で放出されるAMCまたはR110の量を定量できます。