T4 DNA Ligase (5 U/μL)

Name: T4 DNA Ligase (5 U/μL)
SKU: EL0012

Thermo Scientific T4 DNAリガーゼは触媒作用により、二本鎖DNAまたはRNAで並列5'-リン酸塩と3'-ヒドロキシル末端のホスホジエステル結合を形成します。この酵素は、二本鎖DNA、RNA、またはDNA/RNAハイブリッドの一本鎖ニックを修復します。また詳細を見る

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製品番号（カタログ番号）	数量
EL0012	5×1000 U
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製品番号（カタログ番号） EL0012

価格（JPY）

60,800

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5×1000 U

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Thermo Scientific T4 DNAリガーゼは触媒作用により、二本鎖DNAまたはRNAで並列5'-リン酸塩と3'-ヒドロキシル末端のホスホジエステル結合を形成します。この酵素は、二本鎖DNA、RNA、またはDNA/RNAハイブリッドの一本鎖ニックを修復します。また、DNA断片を粘着末端または平滑末端で結合しますが、一本鎖の核酸に対する活性はありません。

T4 DNAリガーゼは補助因子としてATPが必要です。

特長

• Themo Scientific制限酵素、PCR、およびRTバッファーで活性化します（ATPを添加した場合）
• 迅速 — 粘着末端ライゲーションが室温で10分間で完了します
• 効率的な平滑末端ライゲーションのためにPEG溶液が付属しています

アプリケーション

• 制限酵素が生成したDNA断片のクローニング
• PCR産物のクローニング
• 二本鎖オリゴヌクレオチドのリンカーまたはアダプターのDNAへの結合
• 部位特異的突然変異導入
• AFLP（Amplified Fragment Length Polymorphism）
• リガーゼを介したRNA検出（参考資料3を参照）
• 二本鎖DNA、RNA、DNA/RNAハイブリッドのニック修復
• 線状DNAの自己環状化

内容

• T4 DNAリガーゼ
• 10倍T4 DNAリガーゼバッファー
• 50% PEG溶液

注記

• T4 DNAリガーゼをDNAに結合すると、アガロースゲルでバンドシフトが発生することがあります。これを避けるには、6倍DNAローディング色素とSDS溶液を使って、サンプルを70℃で5分間、または65℃で10分間インキュベートし、電気泳動の前に氷で冷やします。
•ライゲーション反応混合液の量は、形質転換過程のコンピテント細胞量の10%を超えないでください。
• 電気形質転換の前に、スピンカラムまたはクロロホルム抽出を使用して、ライゲーション混合液からT4 DNAリガーゼを取り除きます。抽出したDNAは、エタノールでさらに沈殿させることができます。

研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。

仕様

適合バッファー10X T4 DNAリガーゼバッファー

製品タイプT4 DNAリガーゼ

数量5×1000 U

濃度5 U/μL

酵素DNAリガーゼ

Unit SizeEach

よくあるご質問（FAQ）

What are white precipitates in the Thermo Scientific 10X T4 DNA Ligase Buffer that appear upon thawing?

The white precipitates are DTT in the buffer which may appear after freezing. To redissolve DTT, warm up the buffer to 37 degrees C by holding the vial between your palms, or incubating in a water bath for a few minutes, and mix well. The formation of DTT precipitates does not influence the quality of the buffer. The 10X T4 DNA Ligase Buffer is also available separately (Cat. No. B69).

What is the difference between Rapid DNA Ligation Kit and Thermo Scientific T4 DNA ligase with a standard buffer?

The speed of ligation is the main difference between the two. The Thermo Scientific Rapid DNA Ligation Kit enables fast sticky-end or blunt-end DNA ligation in only 5 minutes at room temperature. The kit contains T4 DNA ligase and a specially-formulated 5X rapid ligation buffer optimized for fast and efficient DNA ligation. Fast ligation efficiency is equal to that obtained with T4 DNA ligase in a standard 1 hour ligation.

Why do I see differences in the units of T4 DNA ligase from Thermo Scientific and other vendors?

Thermo Scientific T4 DNA ligase activity is expressed in Weiss units. One Weiss unit is equivalent to approximately 200 cohesive end units (CEU) which may be used by other vendors. One Weiss unit of the enzyme catalyzes the conversion of 1 nmol of [32PPi] into Norit-adsorbable form in 20 min at 37 degrees C. One CEU is defined as the amount of enzyme required to give 50% ligation of HindIII fragments of lambda DNA in 30 min at 16 degrees C.