Thermo ScientificエキソヌクレアーゼIII（ExoIII）は、4つの触媒作用を示します。ExoIIIの3'→5'エキソデオキシリボヌクレアーゼ活性は、二本鎖DNAに特異的です。ExoIIIは、平滑末端、5'-オーバーハング、またはニックからdsDNAを分解し、DNA鎖の3'-末端から5'-モノヌクレオチドを放出して、一本鎖DNAのストレッチを生成します。長さが4塩基以上のDNAの3'-オーバーハング末端に対しては活性がなく、一本鎖DNAまたはホスホロチオエート結合ヌクレオチドの3'-末端C残基を保持しません。

ExoIIIの3'-ホスファターゼ活性は、3'-末端リン酸を除去して3'-OH基を生成します。ExoIIIのRnase H活性は、RNA-DNAハイブリッドのRNA鎖をエキソヌクレアーゼによって分解します。ExoIIIのアプリン／アピリミジンエンドヌクレアーゼ活性は、アプリン部位またはアピリミジン部位でホスホジエステル結合を切断して、塩基を含まないデオキシリボース5'-リン酸残基の5'-末端を生成します。

特長

• 制限酵素バッファー中で活性化

アプリケーション

• S1ヌクレアーゼとの併用によるDNA断片の一方向性欠失の生成
• DNAのジデオキシシーケンシング用の一本鎖テンプレートの生成
• 特定部位突然変異導入
• PCR産物のクローニング
• 鎖特異的プローブの調製

注

ExoIIIによるDNA消化率は、温度、塩濃度、反応混合液中のDNAと酵素のモル比によって異なります。最適反応条件は、実験的に判断する必要があります。