Fluo-4, AM, cell permeant
Fluo-4, AM, cell permeant
Citations & References (317)
Invitrogen™

Fluo-4, AM, cell permeant

標識カルシウムインジケーターは、Ca2+と結合すると蛍光が増加する分子です。Fluo-3は、ケージドキレート剤、第二メッセンジャー、神経伝達物質の光活性化を含むフローサイトメトリー実験、および細胞ベースの薬理学的スクリーニングにおいて、Ca2+シグナル伝達の空間力学をイメージングするために使用されています。Fluo-4はFluo-3のアナログで、2つの塩素置換基がフッ素に置き換えられているため詳細を見る
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製品番号（カタログ番号）数量
F14217500 μL
製品番号（カタログ番号） F14217
価格（JPY）
74,100
Each
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数量:
500 μL
標識カルシウムインジケーターは、Ca2+と結合すると蛍光が増加する分子です。Fluo-3は、ケージドキレート剤、第二メッセンジャー、神経伝達物質の光活性化を含むフローサイトメトリー実験、および細胞ベースの薬理学的スクリーニングにおいて、Ca2+シグナル伝達の空間力学をイメージングするために使用されています。Fluo-4はFluo-3のアナログで、2つの塩素置換基がフッ素に置き換えられているため、488 nmでの蛍光励起が増加し、結果的に蛍光シグナルレベルが高くなります。培養細胞を含むディッシュに溶解インジケーターを直接添加することで、これらカルシウムインジケーターのAMエステル型を細胞に添加できます。これらのインジケーターは、蛍光および共焦点顕微鏡、フローサイトメトリー、およびマイクロプレートスクリーニングの各アプリケーションで有用です。

カルシウム、カリウム、pH、膜電位インジケーターなどのイオンインジケーターの詳細をご覧ください ›

カルシウムインジケーター（AMエステル）の仕様：
• 標識（Ca2+–結合型の励起／発光）：Fluo-4（494/506 nm）
• Ca2+との結合時の蛍光強度増大：>100倍
• バッファー中のCa2+のKd：約335 nM
• Ca2+結合時に、波長のわずかな変化を伴いながら、蛍光強度が増加

TPENを使用した重金属陽イオンの制御
さらに、BAPTAベースのインジケーターはさまざまな重金属陽イオン（Mn2+、Zn2+、Pb2+など）に結合し、Ca2+よりもはるかに高い親和性を示します。これらのイオンの存在によって引き起こされるカルシウム測定値への摂動は、重金属選択性キレート剤であるTPENを使用して制御できます。

蛍光カルシウムインジケーターの幅広い選択肢
さまざまな実験シナリオで使用できる多様なMolecular Probes™カルシウムインジケーターをご用意しています。詳細については、Molecular Probesハンドブックの「可視光で励起された蛍光Ca2+インジケータ」—セクション19.3™を参照してください。

UV-exitable Ca2+指示薬、タンパク質ベースCa2+指示薬、Ca2+指示薬のコンジュゲート用、その他の金属イオン（Mg2+、Zn2+）の蛍光ベースのインジケータ については、Molecular Probesハンドブック™のCa 2+、Mg 2+、Zn 2+およびその他の金属イオンのインジケータ—第19章を参照してください。

研究用途にのみご使用ください。ヒトまたは動物の治療もしくは診断目的には使用できません。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
濃度1 mM
検出法蛍光
染色剤タイプ蛍光色素ベース
数量500 μL
出荷条件室温
使用対象（アプリケーション）細胞の生存率と増殖
使用対象 (装置)共焦点顕微鏡, 蛍光顕微鏡, ハイコンテント装置, HTSリーダー, マイクロプレートリーダー, 蛍光イメージャー
製品タイプ色素
Unit SizeEach
組成および保存条件
フリーザー（-5℃～-30℃）に保存し、遮光してください。

よくあるご質問（FAQ）

Can I fix my cells after loading with Fluo-4 AM dye for the detection of calcium?

No. Since Fluo-4 AM isn't covalently bound to any cellular components and fixation compromises the membrane, the dye would not be retained by the cell.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

I am doing calcium flux imaging with your Fura-2 calibration kit, but am seeing a large variability in ratio in different places around the slide. I am correcting for uniform illumination, using the product as directed, and sealing the coverslip with nail polish.

The nail polish may be the problem. The Kd value (calcium sensitivity) changes depending upon the dye's environment. Nail polish has solvents that can leech under the coverslip and cause variability. We recommend either going without a sealing or sealing with melted paraffin painted on the coverslip edges with a cotton-tipped applicator (paraffin is hydrophobic and has no solvents).

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I need to label cells with Fluo-4, AM, for a calcium flux assay. How long after labeling will the dye be retained?

After loading dye into the cells, intracellular esterases remove the 'AM' moiety from the dye. When the 'AM' group is removed, the dye is able to bind calcium and fluoresce. Since the dye is not covalently bound to any cellular components, it may be actively effluxed from the cell. The rate of efflux is dependent upon the inherent properties of the cell, culture conditions and other factors. The dye may be retained for hours, days or even weeks or lost in a matter of minutes. The use of Probenecid (Cat. No. P36400) limits loss by active efflux.

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引用および参考文献 (317)

引用および参考文献
Abstract
Functional implications of calcium permeability of the channel formed by pannexin 1.
Authors:Vanden Abeele F,Bidaux G,Gordienko D,Beck B,Panchin YV,Baranova AV,Ivanov DV,Skryma R,Prevarskaya N
Journal:The Journal of cell biology
PubMed ID:16908669
Although human pannexins (PanX) are homologous to gap junction molecules, their physiological function in vertebrates remains poorly understood. Our results demonstrate that overexpression of PanX1 results in the formation of Ca(2+)-permeable gap junction channels between adjacent cells, thus, allowing direct intercellular Ca(2+) diffusion and facilitating intercellular Ca(2+) wave propagation. More ... More
Impaired insulin secretion and glucose intolerance in synaptotagmin-7 null mutant mice.
Authors:Gustavsson N,Lao Y,Maximov A,Chuang JC,Kostromina E,Repa JJ,Li C,Radda GK,Südhof TC,Han W
Journal:Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America
PubMed ID:18308938
Vertebrates express at least 15 different synaptotagmins with the same domain structure but diverse localizations and tissue distributions. Synaptotagmin-1,-2, and -9 act as calcium sensors for the fast phrase of neurotransmitter release, and synaptotagmin-12 acts as a calcium-independent modulator of release. The exact functions of the remaining 11 synaptotagmins, however, ... More
High-throughput microfluidic mixing and multiparametric cell sorting for bioactive compound screening.
Authors:Young SM, Curry MS, Ransom JT, Ballesteros JA, Prossnitz ER, Sklar LA, Edwards BS
Journal:J Biomol Screen
PubMed ID:15006133
HyperCyt, an automated sample handling system for flow cytometry that uses air bubbles to separate samples sequentially introduced from multiwell plates by an autosampler. In a previously documented HyperCyt configuration, air bubble separated compounds in one sample line and a continuous stream of cells in another are mixed in-line for ... More
Drosophila Hsc70-4 is critical for neurotransmitter exocytosis in vivo.
Authors:Bronk P, Wenniger JJ, Dawson-Scully K, Guo X, Hong S, Atwood HL, Zinsmaier KE
Journal:Neuron
PubMed ID:11395008
'Previous in vitro studies of cysteine-string protein (CSP) imply a potential role for the clathrin-uncoating ATPase Hsc70 in exocytosis. We show that hypomorphic mutations in Drosophila Hsc70-4 (Hsc4) impair nerve-evoked neurotransmitter release, but not synaptic vesicle recycling in vivo. The loss of release can be restored by increasing external or ... More
Multiplex GPCR assay in reverse transfection cell microarrays.
Authors:Mishina YM, Wilson CJ, Bruett L, Smith JJ, Stoop-Myer C, Jong S, Amaral LP, Pedersen R, Lyman SK, Myer VE, Kreider BL, Thompson CM
Journal:J Biomol Screen
PubMed ID:15140381
'G protein-coupled receptors (GPCRs) are a superfamily of proteins that include some of the most important drug targets in the pharmaceutical industry. Despite the success of this group of drugs, there remains a need to identify GPCR-targeted drugs with greater selectivity, to develop screening assays for validated targets, and to ... More
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