マスターミックスは、フュージョン技術を用いて開発された高性能酵素であるPhusion UホットスタートDNAポリメラーゼをベースにしています。Phusionファミリーの他の酵素と同様に、Phusion U DNAポリメラーゼにも、他のどのDNAポリメラーゼよりも結合イベントあたり多くのヌクレオチが含まれます。これにより、短い伸長時間でPCR産物の高収量が得られ、総プロトコル時間が短縮されます。処理能力が大幅に強化されているため、GCの多いテンプレートや純度が最適化されていないテンプレートといった困難なターゲットに対しても、マルチプレックスPCRを成功させることができます。Phusion UマルチプレックスPCRマスターミックスは、多くのPCR阻害薬に対する高い耐性を備えており、血液や血清などの未精製サンプルにも使用できます。
Phusion UマルチプレックスPCRマスターミックスの内容: • Phusion U Hot Start DNA Polymerase • 2X reaction buffer • 3 mM MgCl2 • 400 µM of each dATP, dTTP, dCTP and dGTP The master mix is supplied with nuclease-free water. Store at -20°C.
よくあるご質問(FAQ)
How much blood can be added directly to multiplex PCR reaction using Phusion U Multiplex PCR Master Mix?
For direct multiplex PCR without prior DNA purification, add up to 4 µL of whole blood to 50 µL final reaction volume.
Can Phusion U Multiplex PCR Master Mix be stored at +4 degrees C?
Yes, Phusion U Multiplex PCR Master Mix can be stored at +4 degrees C for up to 3 months with no effect on performance.
What is the limit of amplicon size using Phusion U Multiplex PCR Master Mix?
Phusion U Multiplex PCR Master Mix is designed for simultaneous amplification of targets up to 2.5 kb.
How many fragments can be amplified in a single reaction using Phusion U Multiplex PCR Master Mix?
We have demonstrated successful simultaneous amplification of 24 DNA fragments.
What are the Phusion U Multiplex PCR Master Mixes and what is the purpose of the Green format?
Thermo Scientific Phusion U Multiplex PCR Master Mixes (Cat. No. F562S, F564S, F562L, F564L) are ready-to-use, 2X end-point PCR master mixes designed for simultaneous amplification of multiple targets in a single tube. Over 20 primer pairs may be combined into a single reaction for highly specific and efficient multiplexing over a broad range of primer and template concentrations. Phusion U Multiplex PCR Master Mixes contains a proprietary buffer with balanced concentrations of all PCR components eliminating the need for tedious optimization.
The Green format of the Phusion U Multiplex PCR Master Mixes (Cat. No. F564S, F564L) further simplifies the workflow: it includes a density reagent and two electrophoresis tracking dyes for direct loading of PCR products on gels.