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Citations & References (19)
Invitrogen™
T-REx™ Complete Kit, with pcDNA™4/TO© Vector
ウイルス転写活性化因子なしのテトラサイクリンで制御された哺乳類発現システムT-REx™Systemは、他のどの制御された哺乳類発現システムよりも高レベルの誘導発現をもたらします。完全なCMVプロモーターを利用し、細菌のテトラサイクリン耐性オペロンの制御要素を追加して、既知の最も強力な哺乳類プロモーター配列(1,2)のいずれかから転写を効果的に抑制したり抑制を解除したりします。特異的な活性化T-REX™ Systemは、テトラサイクリンが存在しない場合に、強力なCMVプロモーターからの転写をブロックするリプレッサーメカニズムを使用します。T-REx™詳細を見る
| 製品番号（カタログ番号） | 数量 |
|---|---|
| K102001 | 1 kit |
製品番号（カタログ番号） K102001
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335,300
Each
数量:
1 kit
ウイルス転写活性化因子なしのテトラサイクリンで制御された哺乳類発現システム
T-REx™Systemは、他のどの制御された哺乳類発現システムよりも高レベルの誘導発現をもたらします。完全なCMVプロモーターを利用し、細菌のテトラサイクリン耐性オペロンの制御要素を追加して、既知の最も強力な哺乳類プロモーター配列(1,2)のいずれかから転写を効果的に抑制したり抑制を解除したりします。
特異的な活性化
T-REX™ Systemは、テトラサイクリンが存在しない場合に、強力なCMVプロモーターからの転写をブロックするリプレッサーメカニズムを使用します。T-REx™ Systemの要素はウイルス転写活性化因子を使用しないため、宿主遺伝子の二次的で非特異的な活性化を行うことなく、完全なCMVプロモーターからの高レベルの発現を実現できます
T-REx™のメカニズム
T-REx™転写コントロール要素は、CMVプロモーターのTATAボックスと転写開始部位の間に挿入された2つのテトラサイクリンオペレーター配列（TetO2）によって提供されます。TetO2配列自体は発現に影響しません。テトラサイクリンリプレッサータンパク質（TR）が存在する場合、TetO2部位を効果的に結合し、転写開始をブロックします。培養培地に添加されたテトラサイクリンは、TRタンパク質と結合し、その立体構造を変化させます。TRタンパク質はTetO2部位を解放し、CMVプロモーターからの転写を抑制します。その結果、目的遺伝子の高レベル発現が実現します。発現レベルはテトラサイクリン濃度に基づいて調節でき、構成的なCMV発現ベクターで実現されるレベルに誘導できます。T-Rex™は強力な誘導性哺乳類発現システムで、完全なヒトサイトメガロウイルス（CMV）エンハンサープロモーターからの発現を調節できます。
T-REX™ 誘導発現ベクターには、以下の特長があります。
•高レベルでの調節される発現用のテトラサイクリンオペレーターTetO2配列の2つコピーを含む完全なCMVエンハンサー-プロモーター配列
•安定した哺乳類細胞株を効果的に選択するための、ゼオシン™またはハイグロマイシン耐性遺伝子
•クローニングを簡素化する大規模な複数のクローニング部位
さらに、pcDNA™4/TO/myc-Hisは、抗myc抗体を用いた組換えタンパク質の迅速な検出のためのc-mycエピトープと、ニッケルキレート樹を用いた組換えタンパク質のシンプルな浄化のためのポリヒスチジン（6xHis）配列および脂および抗His（C-term）抗体を用いた検出を提供します。
テトラサイクリンリプレッサー（TR）タンパク質の高レベルでの発現用に、調節ベクター、pcDNA™6/TRが提供されています。このベクターは、TRタンパク質を安定的に発現する哺乳類細胞株を迅速に選択するために、ブラストサイジン耐性遺伝子を発現します。
T-REx™Systemは、他のどの制御された哺乳類発現システムよりも高レベルの誘導発現をもたらします。完全なCMVプロモーターを利用し、細菌のテトラサイクリン耐性オペロンの制御要素を追加して、既知の最も強力な哺乳類プロモーター配列(1,2)のいずれかから転写を効果的に抑制したり抑制を解除したりします。
特異的な活性化
T-REX™ Systemは、テトラサイクリンが存在しない場合に、強力なCMVプロモーターからの転写をブロックするリプレッサーメカニズムを使用します。T-REx™ Systemの要素はウイルス転写活性化因子を使用しないため、宿主遺伝子の二次的で非特異的な活性化を行うことなく、完全なCMVプロモーターからの高レベルの発現を実現できます
T-REx™のメカニズム
T-REx™転写コントロール要素は、CMVプロモーターのTATAボックスと転写開始部位の間に挿入された2つのテトラサイクリンオペレーター配列（TetO2）によって提供されます。TetO2配列自体は発現に影響しません。テトラサイクリンリプレッサータンパク質（TR）が存在する場合、TetO2部位を効果的に結合し、転写開始をブロックします。培養培地に添加されたテトラサイクリンは、TRタンパク質と結合し、その立体構造を変化させます。TRタンパク質はTetO2部位を解放し、CMVプロモーターからの転写を抑制します。その結果、目的遺伝子の高レベル発現が実現します。発現レベルはテトラサイクリン濃度に基づいて調節でき、構成的なCMV発現ベクターで実現されるレベルに誘導できます。T-Rex™は強力な誘導性哺乳類発現システムで、完全なヒトサイトメガロウイルス（CMV）エンハンサープロモーターからの発現を調節できます。
T-REX™ 誘導発現ベクターには、以下の特長があります。
•高レベルでの調節される発現用のテトラサイクリンオペレーターTetO2配列の2つコピーを含む完全なCMVエンハンサー-プロモーター配列
•安定した哺乳類細胞株を効果的に選択するための、ゼオシン™またはハイグロマイシン耐性遺伝子
•クローニングを簡素化する大規模な複数のクローニング部位
さらに、pcDNA™4/TO/myc-Hisは、抗myc抗体を用いた組換えタンパク質の迅速な検出のためのc-mycエピトープと、ニッケルキレート樹を用いた組換えタンパク質のシンプルな浄化のためのポリヒスチジン（6xHis）配列および脂および抗His（C-term）抗体を用いた検出を提供します。
テトラサイクリンリプレッサー（TR）タンパク質の高レベルでの発現用に、調節ベクター、pcDNA™6/TRが提供されています。このベクターは、TRタンパク質を安定的に発現する哺乳類細胞株を迅速に選択するために、ブラストサイジン耐性遺伝子を発現します。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
構成または誘導システム誘導型
供給タイプTransfection
使用対象（アプリケーション）調節される発現
誘導試薬テトラサイクリン
製品タイプT-Rex Complete Cloning Kit（Vector付き）
数量1 kit
選択剤（真核生物）ゼオシン™、ブラストチジン
ベクターpcDNA
クローニング法制限酵素／MCS
製品ラインT-REx、pcDNA, pcDNA
プロモーターCMV/TO
タンパク質タグタグなし
Unit SizeEach
組成および保存条件
T-REx™ Core Kitには、20 µgのpcDNA™4/TO、ポジティブコントロールベクター、pcDNA™6/TR、フォワードシーケンシングプライマーおよび逆シーケンシングプライマーが含まれています。
T-REx™ Complete Kit™には、Core Kitに加えて、1 gのゼオシン（100 mg/mL）、50 mgのブラストサイジン、および5 gのテトラサイクリンが含まれます。
すべてのベクターは超らせん型で凍結乾燥された状態でご提供します。
すべての成分を-20℃で保存してください。ゼオシン™およびテトラサイクリンは、光への暴露から保護する必要があります。すべてのコンポーネントは、適切に保存した場合、6カ月間安定しています。
T-REx™ Complete Kit™には、Core Kitに加えて、1 gのゼオシン（100 mg/mL）、50 mgのブラストサイジン、および5 gのテトラサイクリンが含まれます。
すべてのベクターは超らせん型で凍結乾燥された状態でご提供します。
すべての成分を-20℃で保存してください。ゼオシン™およびテトラサイクリンは、光への暴露から保護する必要があります。すべてのコンポーネントは、適切に保存した場合、6カ月間安定しています。
よくあるご質問（FAQ）
Why is sequential transfection recommended over co-transfection in the T-REx and GeneSwitch systems?
What is the main advantage of the GeneSwitch system over the T-REx system? And what is its main disadvantage?
What is the advantage of the Flp-In T-REx system over the T-REx system?
Can I use doxycycline instead of tetracycline as an inducer in the T-REx system?
I am planning to generate a T-REx cell line using pcDNA6/TR. Can I perform a western blot using antibodies to TetR to assess whether the cell line is expressing enough of TetR? Do you offer an antibody to TetR?
引用および参考文献 (19)
引用および参考文献
Abstract
Pharmacological chaperone-mediated in vivo folding and stabilization of the P23H-opsin mutant associated with autosomal dominant retinitis pigmentosa.
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:12566452
Protein conformational disorders, which include certain types of retinitis pigmentosa, are a set of inherited human diseases in which mutant proteins are misfolded and often aggregated. Many opsin mutants associated with retinitis pigmentosa, the most common being P23H, are misfolded and retained within the cell. Here, we describe a pharmacological
Identification of two Sp1 phosphorylation sites for p42/p44 mitogen-activated protein kinases: their implication in vascular endothelial growth factor gene transcription.
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:11904305
'Sp1 regulates activation of many genes implicated in tumor growth and cell cycle progression. We have previously demonstrated its implication in the up-regulation of vascular endothelial growth factor (VEGF) gene transcription following growth factor stimulation of quiescent cells, a situation where p42/p44 mitogen-activate protein kinase (MAPK) activity is dramatically increased.
Phosphoinositide-specific Inositol Polyphosphate 5-Phosphatase IV Inhibits Akt/Protein Kinase B Phosphorylation and Leads to Apoptotic Cell Death.
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:11706019
'Phosphoinositide-specific inositol polyphosphate 5- phosphatase IV has the affinity for PI(3,4,5)P(3) (K(m) = 0.65 μM) that is approximately 10-fold greater than the other inositol polyphosphate 5-phosphatases, which use this substrate including SHIP, OCRL, and 5ptase II, suggesting that it may be important in controlling intracellular levels of this metabolite. We
Comparison of seven different heterologous protein expression systems for the production of the serotonin transporter.
Journal:Biochim Biophys Acta
PubMed ID:12586388
'The rat serotonin transporter (rSERT) is an N-glycosylated integral membrane protein with 12 transmembrane regions; the N-glycans improve the ability of the SERT polypeptide chain to fold into a functional transporter, but they are not required for the transmembrane transport of serotonin per se. In order to define the best
Inducible expression of a dominant negative DNA polymerase-gamma depletes mitochondrial DNA and produces a rho0 phenotype.
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:12645575
'We report the inducible, stable expression of a dominant negative form of mitochondria-specific DNA polymerase-gamma to eliminate mitochondrial DNA (mtDNA) from human cells in culture. HEK293 cells were transfected with a plasmid encoding inactive DNA polymerase-gamma harboring a D1135A substitution (POLGdn). The cells rapidly lost mtDNA (t1/2 = 2-3 days)