JAK/Statシグナル伝達経路は、異なるサイトカインに対する細胞応答において重要な役割を果たします。JAK/Stat経路のひとつであるJak2/Stat5は、インターロイキン - 3（IL- 3）、プロラクチン、エリスロポエチン（EPO）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（GM - CSF）に反応して細胞増殖を媒介します。JAK2遺伝子ノックアウトは、赤血球形成の異常による胚性致死を引き起こし、Jak2/Stat5経路が赤血球形成において重要な役割を果たすことが示唆されています。骨髄増殖性疾患（MPD）患者の高い割合に存在するJAK2（V617F）における活性化変異が最近発見されたことにより、Jak2/Stat5経路が特定の形態のMPDに対する潜在的な治療ターゲットである可能性が示唆されています。活性化されたStat5転写因子は、カゼイン、インターフェロン調節因子 - 1（IRF- 1）、およびその他の多くの遺伝子のプロモーター領域βに見られる特異的なパリンドロームDNA配列を認識し、結合します。CellSensor® irf1-bla BA/F3細胞株には、BA/F3細胞に安定的に統合された、IRF - 1応答エレメントのコントロール下のβラクタマーゼレポーター遺伝子が含まれています。この細胞株は、マウス IL - 3（MIL - 3）を使用して、最適化された条件下でEC50およびZ’値について検証されています。この細胞株は、DMSO濃度、細胞数、刺激時間、基質のローディング時間など、さまざまな実験条件下でも試験されています。また、低分子阻害剤であるJak阻害剤1に対する反応性も試験しました。CellSensor® irf1-bla BA/F3細胞は、384ウェルフォーマットで、表示濃度範囲内でMILを用いて3回処理しています。細胞を、0.5% DMSOのMIL - 3アゴニストで5時間インキュベートした後、LiveBLAzer™ - FRET B/G Substrate（CCF4-AM）と2.5時間結合しました。標準蛍光プレートリーダーを使用して、460 nmおよび530 nmでの蛍光発光値を取得しました。各複製の反応比を、MIL - 3の表示濃度に対してプロットしました。CellSensor ®irf1 - bla BA/F3細胞を、Jak阻害剤1を用いて、384ウェルフォーマットで表示濃度範囲で30分間処理しました。その後、細胞を0.5％ DMSOのMIL - 3アゴニストで5時間インキュベートし、続いて2.5時間LiveBLAzer™ - FRET B/G Substrate（CCF4- AM）と結合しました。標準蛍光プレートリーダーを使用して、460 nmおよび530 nmでの蛍光発光値を取得しました。発光比は、Jak阻害剤1の表示濃度に対してプロットしました。学術・非営利のお客様は、特別価格でのご提供となりますので、お問い合わせください。