TA Cloning™ Kit, with pCR™2.1 Vector and One Shot™ TOP10F' Chemically Competent E. coli
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Invitrogen™

TA Cloning™ Kit, with pCR™2.1 Vector and One Shot™ TOP10F' Chemically Competent E. coli

PCR™2.1ベクター付きTAクローニング™キットは、Taq増幅PCR産物をプラスミドベクターに直接挿入するための迅速なワンステップクローニング戦略を実現します。TAクローニングキットは、PCR™2.1クローニングベクターとExpressLink T4 DNAリガーゼを使用して、15分間の室温でのライゲーションステップでライゲーション産物を生成します。反応では通常、インサートを含む>80%の組み換え体を生成します。pCR™2.1ベクター付きTA詳細を見る
製品番号(カタログ番号)反応数
K20300120反応
K20304040反応
製品番号(カタログ番号) K203001
価格(JPY)
105,400
Each
お問い合わせください ›
反応数:
20反応
PCR™2.1ベクター付きTAクローニング™キットは、Taq増幅PCR産物をプラスミドベクターに直接挿入するための迅速なワンステップクローニング戦略を実現します。TAクローニングキットは、PCR™2.1クローニングベクターとExpressLink T4 DNAリガーゼを使用して、15分間の室温でのライゲーションステップでライゲーション産物を生成します。反応では通常、インサートを含む>80%の組み換え体を生成します。

pCR™2.1ベクター付きTA Cloning™キットの特長:
高速で便利—室温での15分間のライゲーション
効率的—青/白スクリーニングおよび正しいインサートを使用した80%を超えるクローン
柔軟性—カナマイシン耐性またはアンピシリン耐性を選択できるため、抗生物質の選択が柔軟です
手間なし—PCR産物の酵素的修飾を排除します
合理化—制限部位を含むPCRプライマーを使用する必要はありません

pCR™2.1ベクターの特長:
Taq増幅PCR産物の直接ライゲーションのための3'-Tオーバーハング
in vitro RNA転写およびシーケンシング用のT7プロモーター
• インサート配列を簡単に切り出すためのEcoR I部位に隣接する多用途ポリリンカーシーケンス用の Taq 増幅PCR産物 T7 プロモーターの直接ライゲーションに使用
• シーケンシング用のM13フォワード/リバースプライマー部位

TAクローニング™の仕組み
Taqポリメラーゼにはテンプレートに依存しない活性があり、単一のデオキシアデノシン(A)をPCR産物の3'末端に付加します。このキットで提供される線形化ベクターには、単一の3'デオキシアデノシン(T)残基があります。PCRインサートでベクターによって効率的にライゲーションできます

キット構成
TAクローニング™キットは、さまざまな構成で提供されます:コンピテントセルなし(K2020-20および K2020-40)、One Shot™ INVFのケミカルコンピテント大腸菌あり(K2000-01およびK2000-40)、One Shot™ TOP10Fのケミカルコンピテント大腸菌あり(K2030-01およびK2030-40)、One Shot™ TOP10ケミカルコンピテント大腸菌あり(K2040-01およびK2040-40)、20-と40-の反応キット。
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
菌株または酵母株TOP10F
細胞タイプケミカリーコンピテント大腸菌
クローニング法TAクローニング
使用対象(アプリケーション)PCRクローニング
反応数20反応
製品ラインOne Shot
製品タイプCloning Kit
プロモーターT7
数量20 reactions
ベクターpCR2.1
フォーマットキット
Unit SizeEach
組成および保存条件
TA Cloning™キットには、線形化PCR™ 2.1ベクター、ExpressLink™ T4 DNAリガーゼ、5X ExpressLink™ T4 DNAライゲーションバッファー、dNTP、10X PCRバッファー、滅菌水、およびコントロールが含まれています。コンピテントセルキットには、One Shot™ケミカルコンピテント大腸菌、S.O.C.培地、スーパーコイルコントロールプラスミドが含まれています。

One Shot™大腸菌は-80℃で保管します。その他のすべての成分を-20°℃で保管してください。すべての試薬は、適切な保管条件であれば、6カ月間安定していることが保証されています。

よくあるご質問(FAQ)

Can I use TOP10F' competent cells for transformation of my TOPO vector that contains the ccdB gene?

Strains that contain an F plasmid, such as TOP10F', are not recommended for transformation and selection of recombinant clones in any TOPO vector containing the ccdB gene. While the F plasmid does encode the CcdA protein, which acts as an inhibitor of the CcdB gyrase-toxin protein, the half-life of the CcdA protein is shorter than that of the CcdB protein. Overexpression of the CcdB protein causes cell death when its action is not prevented by sufficient CcdA.

引用および参考文献 (4)

引用および参考文献
Abstract
Xath5 participates in a network of bHLH genes in the developing Xenopus retina [published erratum appears in Neuron 1998 Nov;21(5):following 1221]
Authors:Kanekar S, Perron M, Dorsky R, Harris WA, Jan LY, Jan YN, Vetter ML
Journal:Neuron
PubMed ID:9390513
'We examined the function of basic-helix-loop-helix (bHLH) transcription factors during retinal neurogenesis. We identified Xath5, a Xenopus bHLH gene related to Drosophila atonal, which is expressed in the developing Xenopus retina. Targeted expression of Xath5 in retinal progenitor cells biased the differentiation of these cells toward a ganglion cell fate, ... More
T cell receptor recognition of MHC class II-bound peptide flanking residues enhances immunogenicity and results in altered TCR V region usage.
Authors:Carson RT, Vignali KM, Woodland DL, Vignali DA
Journal:Immunity
PubMed ID:9324359
'Naturally processed MHC class II-bound peptides possess ragged NH2 and COOH termini. It is not known whether these peptide flanking residues (PFRs), which lie outside the MHC anchor residues, are recognized by the TCR or influence immunogenicity. Here we analyzed T cell responses to the COOH-terminal PFR of the H-2A(k) ... More
High-performance subtractive hybridization of cDNAs by covalent bonding between specific complementary nucleotides [In Process Citation]
Authors:Ying SY, Lin S
Journal:Biotechniques
PubMed ID:10337490
We have developed an improved subtractive hybridization method that provides a fast, simple and reliable isolation of desired different sequences from two compared DNA libraries, one of which contains all unwanted homologues (subtracter) and another contains certain desired heterologues (tester). The DNA library can be made from either mRNA or ... More
Immunogene therapy of tumors with vaccine based on Xenopus homologous vascular endothelial growth factor as a model antigen.
Authors: Wei Y Q; Huang M J; Yang L; Zhao X; Tian L; Lu Y; Shu J M; Lu C J; Niu T; Kang B; Mao Y Q; Liu F; Wen Y J; Lei S; Luo F; Zhou L Q; Peng F; Jiang Y; Liu J Y; Zhou H; Wang Q R; He Q M; Xiao F; Lou Y Y; Xie X J; Li Q; Wu Y; Ding Z Y; Hu B; Hu M; Zhang W;
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:11553767
Overcoming immune tolerance of the growth factors associated with tumor growth should be a useful approach to cancer therapy by active immunity. We used vascular endothelial growth factor (VEGF) as a model antigen to explore the feasibility of the immunogene tumor therapy with a vaccine based on a single xenogeneic ... More