TA Cloning&trade; Kit, Dual Promoter, with pCR&trade;II Vector and One Shot&trade; INV&alpha;F' Chemically Competent <i>E. coli</i>
Invitrogen™

TA Cloning™ Kit, Dual Promoter, with pCR™II Vector and One Shot™ INVαF' Chemically Competent E. coli

pCR™IIベクター付きTAクローニング™キットデュアルプロモーターは、Taq増幅PCR産物をプラスミドベクターに直接挿入するための迅速なワンステップクローニング戦略を実現します。pCR™IIベクターのT7プロモーターおよびSp6プロモーターは、インサートの in vitro 転写によりセンスまたはアンチセンス転写産物を生成することが可能です。TAクローニングキットデュアルプロモーターは、pCR™IIクローニングベクターとExpressLink T4詳細を見る
製品番号(カタログ番号)反応数
K205040
または、製品番号K2050-40
40反応
K20500120反応
製品番号(カタログ番号) K205040
または、製品番号K2050-40
価格(JPY)
204,200
Each
反応数:
40反応
pCR™IIベクター付きTAクローニング™キットデュアルプロモーターは、Taq増幅PCR産物をプラスミドベクターに直接挿入するための迅速なワンステップクローニング戦略を実現します。pCR™IIベクターのT7プロモーターおよびSp6プロモーターは、インサートの in vitro 転写によりセンスまたはアンチセンス転写産物を生成することが可能です。TAクローニングキットデュアルプロモーターは、pCR™IIクローニングベクターとExpressLink T4 DNAリガーゼをキャンペーン情報使用して、15分間の室温でのライゲーションステップでライゲーション産物を生成します。反応によって通常は、80%以上のインサートを含む組換えが生成されます。

TAクローニング™キットデュアルプロモーターの特長:
迅速&簡便 — 15分、室温のライゲーション
効率的 —青白スクリーニングと80%以上の正しいインサートを含むクローン
柔軟 — カナマイシンまたはアンピシリン耐性マーカーを選択できる、柔軟な抗生物質の選択
手間なし — PCR産物の酵素修飾が不要
簡素化 — 制限酵素認識部位を含むPCRプライマーの使用は不要

pCR™IIベクターでは、次のものが提供されます。
Taq増幅PCR産物の直接ライゲーションのための3'-Tオーバーハング
インビトロRNA転写およびシーケンシングのためのT7およびSp6プロモーター
• 隣接するEcoRI部位を持つ汎用性の高いポリリンカーにより、インサート配列の容易な切り出しが可能
• シーケンシング用のM13フォワードおよびリバースプライマー領域

TAクローニング™の仕組み
Taqポリメラーゼはテンプレート非依存活性を示し、単一のデオキシアデノシン(A)をPCR産物の3'末端に付加します。このキットで提供される線形化ベクターには、単一の3'デオキシアデノシン(T)残基があります。PCRインサートでベクターによって効率的にライゲーションできます

キット構成
TAクローニング™キットは、さまざまな構成で提供されます:One Shot™ INVFのケミカルコンピテント大腸菌あり(K2050-01およびK2050-40)、One Shot™ TOP10Fのケミカルコンピテント大腸菌あり(K2060-01およびK2060-40)、コンピテントセルなし(K2750-20およびK2750-40)、および20-と40-の反応キット。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
菌株または酵母株INVαF
細胞タイプケミカリーコンピテント大腸菌
クローニング法TAクローニング
使用対象(アプリケーション)PCRクローニング
内容線形化pCRIIベクター、ExpressLink T4 DNAリガーゼ、5X ExpressLink T4 DNAライゲーションバッファー、dNTP、10X PCRバッファー、滅菌水、コントロール、One Shot INVαF'ケミカルコンピテント大腸菌、S.O.C.培地、スーパーコイルコントロールプラスミド。
反応数40反応
製品ラインOne Shot
製品タイプCloning Kit
プロモーターT7、SP6
数量40 rxns
ベクターpCRII
フォーマットキット
Unit SizeEach
組成および保存条件
このキットには、線形化pCR™IIベクター、ExpressLink™ T4 DNAリガーゼ、5X ExpressLink™ T4 DNAライゲーションバッファー、dNTP、10X PCRバッファー、滅菌水、コントロールが含まれています。コンピテントセルキットには、One Shot™ケミカルコンピテント大腸菌、S.O.C.培地、スーパーコイルコントロールプラスミドが含まれています。

One Shot™大腸菌は-80℃で保管します。その他のすべての成分を-20°℃で保管してください。すべての試薬は、適切な保管条件であれば、6カ月間安定していることが保証されています。

よくあるご質問(FAQ)

Have you compared in vitro transcription levels between SP6 and T7 promoters in your pCRII vectors?

No, we have not done in-house comparisons of transcription levels. It is widely known though that T7 polymerase produces more RNA than SP6 (on the order of 10-fold higher).

引用および参考文献 (9)

引用および参考文献
Abstract
Semaphorin III can function as a selective chemorepellent to pattern sensory projections in the spinal cord.
Authors:Messersmith EK, Leonardo ED, Shatz CJ, Tessier-Lavigne M, Goodman CS, Kolodkin AL
Journal:Neuron
PubMed ID:7748562
'Distinct classes of primary sensory neurons in dorsal root ganglia subserve different sensory modalities, terminate in different dorsoventral locations in the spinal cord, and display different neurotrophin response profiles. Large diameter muscle afferents that terminate in the ventral spinal cord are NT-3 responsive, whereas small diameter afferents subserving pain and ... More
Kainate receptor subunits expressed in single cultured hippocampal neurons: molecular and functional variants by RNA editing.
Authors:Ruano D, Lambolez B, Rossier J, Paternain AV, Lerma J
Journal:Neuron
PubMed ID:7748549
To determine the kainate receptor subunits that are found in native kainate receptors, we have applied a multiplex PCR of cDNAs reverse transcribed from mRNA harvested from single cultured hippocampal neurons after electrophysiological recording. We found that all the cells showing rapidly desensitizing currents in response to kainate express the ... More
Map-based cloning of chloronerva, a gene involved in iron uptake of higher plants encoding nicotianamine synthase.
Authors:Ling HQ, Koch G, Baumlein H, Ganal MW
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:10359845
The uptake of iron in plants is a highly regulated process that is induced on iron starvation. In tomato, the mutant chloronerva exhibits constitutive expression of iron uptake responses and intercostal chlorosis. Biochemically, chloronerva is an auxotroph for nicotianamine, a key polyamine in plant iron uptake metabolism. The chloronerva gene ... More
ARIA, a protein that stimulates acetylcholine receptor synthesis, is a member of the neu ligand family.
Authors:Falls DL, Rosen KM, Corfas G, Lane WS, Fischbach GD
Journal:Cell
PubMed ID:8453670
Motor neurons stimulate their postsynaptic muscle targets to synthesize neurotransmitter receptors. Polypeptide signaling molecules may mediate this inductive interaction. Here we report the purification of ARIA, a protein that stimulates the synthesis of muscle acetylcholine receptors, and the isolation of ARIA cDNA. Recombinant ARIA increases acetylcholine receptor synthesis greater than ... More
The accessory subunit of Xenopus laevis mitochondrial DNA polymerase gamma increases processivity of the catalytic subunit of human DNA polymerase gamma and is related to class II aminoacyl-tRNA synthetases.
Authors:Carrodeguas JA, Kobayashi R, Lim SE, Copeland WC, Bogenhagen DF
Journal:Mol Cell Biol
PubMed ID:10330144
Peptide sequences obtained from the accessory subunit of Xenopus laevis mitochondrial DNA (mtDNA) polymerase gamma (pol gamma) were used to clone the cDNA encoding this protein. Amino-terminal sequencing of the mitochondrial protein indicated the presence of a 44-amino-acid mitochondrial targeting sequence, leaving a predicted mature protein with 419 amino acids ... More