TA Cloning™ Kit, Dual Promoter, with pCR™II Vector and One Shot™ TOP10F' Chemically Competent E. coli
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Invitrogen™

TA Cloning™ Kit, Dual Promoter, with pCR™II Vector and One Shot™ TOP10F' Chemically Competent E. coli

pCR™IIベクター付きTAクローニング™キットデュアルプロモーターは、Taq増幅PCR産物をプラスミドベクターに直接挿入するための迅速なワンステップクローニング戦略を実現します。pCR™IIベクターのT7プロモーターおよびSp6プロモーターは、インサートの in vitro 転写によりセンスまたはアンチセンス転写産物を生成することが可能です。TAクローニングキットデュアルプロモーターは、pCR™IIクローニングベクターとExpressLink T4詳細を見る
製品番号(カタログ番号)反応数
K20600120反応
K20604040反応
製品番号(カタログ番号) K206001
価格(JPY)
64,000
Online offer
Ends: 26-Dec-2025
106,700
割引額 42,700 (40%)
Each
お問い合わせください ›
反応数:
20反応
pCR™IIベクター付きTAクローニング™キットデュアルプロモーターは、Taq増幅PCR産物をプラスミドベクターに直接挿入するための迅速なワンステップクローニング戦略を実現します。pCR™IIベクターのT7プロモーターおよびSp6プロモーターは、インサートの in vitro 転写によりセンスまたはアンチセンス転写産物を生成することが可能です。TAクローニングキットデュアルプロモーターは、pCR™IIクローニングベクターとExpressLink T4 DNAリガーゼをキャンペーン情報使用して、15分間の室温でのライゲーションステップでライゲーション産物を生成します。反応によって通常は、80%以上のインサートを含む組換えが生成されます。

TAクローニング™キットデュアルプロモーターの特長:
高速で便利— 室温での15分間のライゲーション
効率的—青/白スクリーニングおよび正しいインサートを使用した80%を超えるクローン
柔軟性—カナマイシン耐性またはアンピシリン耐性を選択できるため、抗生物質の選択が柔軟です
手間のかからない— PCR産物の酵素的修飾を排除します
合理化— 制限部位を含むPCRプライマーを使用する必要はありません

pCR™IIベクターの特長:
Taq増幅PCR産物の直接ライゲーションのための3'-Tオーバーハング
in vitro RNA転写およびシーケンシング用のT7プロモーターおよびSp6プロモーター
• インサート配列を簡単に切り出すためのEcoR I部位に隣接する多用途ポリリンカーシーケンス用の Taq 増幅PCR産物 T7 プロモーターの直接ライゲーションに使用
• シーケンシング用のM13フォワード/リバースプライマー部位

TAクローニング™の仕組み
Taqポリメラーゼにはテンプレートに依存しない活性があり、単一のデオキシアデノシン(A)をPCR産物の3'末端に付加します。このキットで提供される線形化ベクターには、単一の3'デオキシアデノシン(T)残基があります。PCRインサートでベクターによって効率的にライゲーションできます

キット構成
TAクローニング™キットは、さまざまな構成で提供されます:One Shot™ INVFのケミカルコンピテント大腸菌あり(K2050-01およびK2050-40)、One Shot™ TOP10Fのケミカルコンピテント大腸菌あり(K2060-01およびK2060-40)、コンピテントセルなし(K2750-20およびK2750-40)、および20-と40-の反応キット。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
菌株または酵母株TOP10F
細胞タイプケミカリーコンピテント大腸菌
クローニング法TAクローニング
使用対象(アプリケーション)PCRクローニング
内容線形化pCRIIベクター、ExpressLink T4 DNAリガーゼ、5X ExpressLink T4 DNAライゲーションバッファー、dNTP、10X PCRバッファー、滅菌水、コントロール、One Shot TOP10F’ケミカルコンピテント大腸菌、S.O.C.培地、スーパーコイルコントロールプラスミド。
反応数20反応
製品ラインOne Shot
製品タイプCloning Kit
プロモーターT7、SP6
数量20 reactions
ベクターpCRII
フォーマットキット
Unit SizeEach
組成および保存条件
このキットには、線形化pCR™IIベクター、ExpressLink™ T4 DNAリガーゼ、5X ExpressLink™ T4 DNAライゲーションバッファー、dNTP、10X PCRバッファー、滅菌水、コントロールが含まれています。コンピテントセルキットには、One Shot™ケミカルコンピテント大腸菌、S.O.C.培地、スーパーコイルコントロールプラスミドが含まれています。

One Shot™大腸菌は-80℃で保管します。その他のすべての成分を-20°℃で保管してください。すべての試薬は、適切な保管条件であれば、6カ月間安定していることが保証されています。

よくあるご質問(FAQ)

Can I use TOP10F' competent cells for transformation of my TOPO vector that contains the ccdB gene?

Strains that contain an F plasmid, such as TOP10F', are not recommended for transformation and selection of recombinant clones in any TOPO vector containing the ccdB gene. While the F plasmid does encode the CcdA protein, which acts as an inhibitor of the CcdB gyrase-toxin protein, the half-life of the CcdA protein is shorter than that of the CcdB protein. Overexpression of the CcdB protein causes cell death when its action is not prevented by sufficient CcdA.

Have you compared in vitro transcription levels between SP6 and T7 promoters in your pCRII vectors?

No, we have not done in-house comparisons of transcription levels. It is widely known though that T7 polymerase produces more RNA than SP6 (on the order of 10-fold higher).

引用および参考文献 (141)

引用および参考文献
Abstract
LMP-1, a LIM-domain protein, mediates BMP-6 effects on bone formation.
Authors:Boden SD, Liu Y, Hair GA, Helms JA, Hu D, Racine M, Nanes MS, Titus L
Journal:Endocrinology
PubMed ID:9832452
Glucocorticoids can promote osteoblast differentiation from fetal calvarial cells and bone marrow stromal cells. We recently reported that glucocorticoid specifically induced bone morphogenetic protein-6 (BMP-6), a glycoprotein signaling molecule that is a multifunctional regulator of vertebrate development. In the present study, we used fetal rat secondary calvarial cultures to determine ... More
Glycoprotein IIb Leu214Pro mutation produces glanzmann thrombasthenia with both quantitative and qualitative abnormalities in GPIIb/IIIa.
Authors:Grimaldi CM, Chen F, Wu C, Weiss HJ, Coller BS, French DL
Journal:Blood
PubMed ID:9473221
Glanzmann thrombasthenia is an inherited bleeding disorder due to a functional reduction or absence of platelet GPIIb/IIIa (alphaIIbbeta3) integrin receptors. Based on a prolonged bleeding time and absence of platelet aggregation in response to physiologic agonists, a 55-year-old white man was diagnosed as having Glanzmann thrombasthenia. The patient's platelet fibrinogen ... More
Type IV collagen is detectable in most, but not all, basement membranes of Caenorhabditis elegans and assembles on tissues that do not express it.
Authors:Graham PL, Johnson JJ, Wang S, Sibley MH, Gupta MC, Kramer JM
Journal:J Cell Biol
PubMed ID:9166416
Type IV collagen in Caenorhabditis elegans is produced by two essential genes, emb-9 and let-2, which encode alpha1- and alpha2-like chains, respectively. The distribution of EMB-9 and LET-2 chains has been characterized using chain-specific antisera. The chains colocalize, suggesting that they may function in a single heterotrimeric collagen molecule. Type ... More
Cloning and characterization of a naturally occurring antisense RNA to human thymidylate synthase mRNA.
Authors:Dolnick BJ
Journal:Nucleic Acids Res
PubMed ID:8493092
Based upon reverse transcription and polymerase chain reaction results with human KB cell RNA, a cDNA (i.e., 3'rTS1, 1557 nt) with complementarity to thymidylate synthase mRNA was cloned and sequenced. Northern blot analysis showed that 3'rTS1 corresponded to a cytoplasmic 1.8 kb RNA found in several tumor cell lines. The ... More
Distribution and cloning of eukaryotic mRNAs by means of differential display: refinements and optimization.
Authors:Liang P, Averboukh L, Pardee AB
Journal:Nucleic Acids Res
PubMed ID:8341601
Differential display has been developed as a tool to detect and characterize altered gene expression in eukaryotic cells. The basic principle is to systematically amplify messenger RNAs and then distribute their 3' termini on a denaturing polyacrylamide gel. Here we provide methodological details and examine in depth the specificity, sensitivity ... More