TA Cloning™ Kit, Dual Promoter, with pCR™II Vector and One Shot™ TOP10F' Chemically Competent E. coli
TA Cloning&trade; Kit, Dual Promoter, with pCR&trade;II Vector and One Shot&trade; TOP10F' Chemically Competent <i>E. coli</i>
Invitrogen™

TA Cloning™ Kit, Dual Promoter, with pCR™II Vector and One Shot™ TOP10F' Chemically Competent E. coli

pCR™IIベクター付きTAクローニング™キットデュアルプロモーターは、Taq増幅PCR産物をプラスミドベクターに直接挿入するための迅速なワンステップクローニング戦略を実現します。pCR™IIベクターのT7プロモーターおよびSp6プロモーターは、インサートの in vitro 転写によりセンスまたはアンチセンス転写産物を生成することが可能です。TAクローニングキットデュアルプロモーターは、pCR™IIクローニングベクターとExpressLink T4詳細を見る
製品番号(カタログ番号)反応数
K20604040反応
K20600120反応
製品番号(カタログ番号) K206040
価格(JPY)
121,400
Offre exceptionnelle en ligne
Ends: 26-Dec-2025
202,400
割引額 81,000 (40%)
Each
お問い合わせください ›
反応数:
40反応
pCR™IIベクター付きTAクローニング™キットデュアルプロモーターは、Taq増幅PCR産物をプラスミドベクターに直接挿入するための迅速なワンステップクローニング戦略を実現します。pCR™IIベクターのT7プロモーターおよびSp6プロモーターは、インサートの in vitro 転写によりセンスまたはアンチセンス転写産物を生成することが可能です。TAクローニングキットデュアルプロモーターは、pCR™IIクローニングベクターとExpressLink T4 DNAリガーゼをキャンペーン情報使用して、15分間の室温でのライゲーションステップでライゲーション産物を生成します。反応によって通常は、80%以上のインサートを含む組換えが生成されます。

TAクローニング™キットデュアルプロモーターの特長:
高速で便利— 室温での15分間のライゲーション
効率的—青/白スクリーニングおよび正しいインサートを使用した80%を超えるクローン
柔軟性—カナマイシン耐性またはアンピシリン耐性を選択できるため、抗生物質の選択が柔軟です
手間のかからない— PCR産物の酵素的修飾を排除します
合理化— 制限部位を含むPCRプライマーを使用する必要はありません

pCR™IIベクターの特長:
Taq増幅PCR産物の直接ライゲーションのための3'-Tオーバーハング
in vitro RNA転写およびシーケンシング用のT7プロモーターおよびSp6プロモーター
• インサート配列を簡単に切り出すためのEcoR I部位に隣接する多用途ポリリンカーシーケンス用の Taq 増幅PCR産物 T7 プロモーターの直接ライゲーションに使用
• シーケンシング用のM13フォワード/リバースプライマー部位

TAクローニング™の仕組み
Taqポリメラーゼにはテンプレートに依存しない活性があり、単一のデオキシアデノシン(A)をPCR産物の3'末端に付加します。このキットで提供される線形化ベクターには、単一の3'デオキシアデノシン(T)残基があります。PCRインサートでベクターによって効率的にライゲーションできます

キット構成
TAクローニング™キットは、さまざまな構成で提供されます:One Shot™ INVFのケミカルコンピテント大腸菌あり(K2050-01およびK2050-40)、One Shot™ TOP10Fのケミカルコンピテント大腸菌あり(K2060-01およびK2060-40)、コンピテントセルなし(K2750-20およびK2750-40)、および20-と40-の反応キット。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
細菌含有量TOP10
菌株または酵母株TOP10F
細胞タイプケミカリーコンピテント大腸菌
クローニング法TAクローニング
使用対象(アプリケーション)PCRクローニング
内容線形化pCRIIベクター、ExpressLink T4 DNAリガーゼ、5X ExpressLink T4 DNAライゲーションバッファー、dNTP、10X PCRバッファー、滅菌水、コントロール、One Shot TOP10F’ケミカルコンピテント大腸菌、S.O.C.培地、スーパーコイルコントロールプラスミド。
反応数40反応
製品ラインOne Shot
製品タイプCloning Kit
プロモーターT7、SP6
数量40 rxns
ベクターpCRII
フォーマットキット
Unit SizeEach
組成および保存条件
このキットには、線形化pCR™IIベクター、ExpressLink™ T4 DNAリガーゼ、5X ExpressLink™ T4 DNAライゲーションバッファー、dNTP、10X PCRバッファー、滅菌水、コントロールが含まれています。コンピテントセルキットには、One Shot™ケミカルコンピテント大腸菌、S.O.C.培地、スーパーコイルコントロールプラスミドが含まれています。

One Shot™大腸菌は-80℃で保管します。その他のすべての成分を-20°℃で保管してください。すべての試薬は、適切な保管条件であれば、6カ月間安定していることが保証されています。

よくあるご質問(FAQ)

Can I use TOP10F' competent cells for transformation of my TOPO vector that contains the ccdB gene?

Strains that contain an F plasmid, such as TOP10F', are not recommended for transformation and selection of recombinant clones in any TOPO vector containing the ccdB gene. While the F plasmid does encode the CcdA protein, which acts as an inhibitor of the CcdB gyrase-toxin protein, the half-life of the CcdA protein is shorter than that of the CcdB protein. Overexpression of the CcdB protein causes cell death when its action is not prevented by sufficient CcdA.

Have you compared in vitro transcription levels between SP6 and T7 promoters in your pCRII vectors?

No, we have not done in-house comparisons of transcription levels. It is widely known though that T7 polymerase produces more RNA than SP6 (on the order of 10-fold higher).

引用および参考文献 (10)

引用および参考文献
Abstract
Semaphorin III can function as a selective chemorepellent to pattern sensory projections in the spinal cord.
Authors:Messersmith EK, Leonardo ED, Shatz CJ, Tessier-Lavigne M, Goodman CS, Kolodkin AL
Journal:Neuron
PubMed ID:7748562
'Distinct classes of primary sensory neurons in dorsal root ganglia subserve different sensory modalities, terminate in different dorsoventral locations in the spinal cord, and display different neurotrophin response profiles. Large diameter muscle afferents that terminate in the ventral spinal cord are NT-3 responsive, whereas small diameter afferents subserving pain and ... More
A nod factor binding lectin with apyrase activity from legume roots.
Authors:Etzler ME, Kalsi G, Ewing NN, Roberts NJ, Day RB, Murphy JB
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:10318974
'A lectin isolated from the roots of the legume, Dolichos biflorus, binds to Nod factors produced by rhizobial strains that nodulate this plant and has a deduced amino acid sequence with no significant homology to any lectin reported to date. This lectin also is an enzyme that catalyzes the hydrolysis ... More
timrit Lengthens circadian period in a temperature-dependent manner through suppression of PERIOD protein cycling and nuclear localization.
Authors:Matsumoto A, Tomioka K, Chiba Y, Tanimura T
Journal:Mol Cell Biol
PubMed ID:10330175
A fundamental feature of circadian clocks is temperature compensation of period. The free-running period of ritsu (timrit) (a novel allele of timeless [tim]) mutants is drastically lengthened in a temperature- dependent manner. PER and TIM protein levels become lower in timrit mutants as temperature becomes higher. This mutation reduces per ... More
Kainate receptor subunits expressed in single cultured hippocampal neurons: molecular and functional variants by RNA editing.
Authors:Ruano D, Lambolez B, Rossier J, Paternain AV, Lerma J
Journal:Neuron
PubMed ID:7748549
To determine the kainate receptor subunits that are found in native kainate receptors, we have applied a multiplex PCR of cDNAs reverse transcribed from mRNA harvested from single cultured hippocampal neurons after electrophysiological recording. We found that all the cells showing rapidly desensitizing currents in response to kainate express the ... More
Genetic heterogeneity of hypervariable region 1 of the hepatitis C virus (HCV) genome and sensitivity of HCV to alpha interferon therapy
Authors:Sandres K, Dubois M, Pasquier C, Payen JL, Alric L, Duffaut M, Vinel JP, Pascal JP, Puel J, Izopet J
Journal:J Virol
PubMed ID:10623727
Hepatitis C virus (HCV) populations persist in vivo as a mixture of heterogeneous viruses called quasispecies. The relationship between the genetic heterogeneity of these variants and their responses to antiviral treatment remains to be elucidated. We have studied 26 virus strains to determine the influence of hypervariable region 1 (HVR-1) ... More