pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning Kit with One Shot™ TOP10 E. coli

製品番号（カタログ番号）	数量
K250020	20反応

製品番号（カタログ番号） K250020

価格（JPY）

135,400

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pCR™8/GW/TOPO™ TAクローニングキットでは、シンプルな5分間のクローニングとGateway™組換えクローニングベクタープラットフォームへのアクセスを提供します。当社のpCR™8 TOPO™ TAベクターには最小限のMCSが含まれているため、インサートの配列が多く、ベクターの数が少なくなります

エントリークローンを作成する特許取得済みのatt部位、pCR™8ベクターは、Gateway™組換えクローニングを介して、面倒なサブクローニングを行うことなく、さまざまな発現ベクターに簡単にアクセスできるため、貴重な研究時間を節約できます。

PCR™8/GW/TOPO™ TAクローニングキットの特長：

•さまざまなGateway™デスティネーションベクターへの迅速な組換えのためのatt部位
• Taq増幅PCR産物の直接ライゲーションのための3´-Tオーバーハング
• 挿入部位の55 bp以内のシーケンシングプライマー部位により、インサートの配列が多く、ベクターの数が少なくなります
• 大腸菌での堅牢な選択のためのスペクチノマイシン耐性遺伝子
• EcoRI部位はPCR産物の挿入部位に隣接するため、インサート配列を簡単に切り出せます

このキットには、One Shot™ TOP10ケミカルコンピテント大腸菌が含まれています。

研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。

クローニング法TOPO™とGateway™

反応数20 reactions

製品ラインOne Shot

製品タイプTA Cloning Kit

数量20反応

ベクターpCR

Unit SizeEach

組成および保存条件

pCR™8/GW/TOPO™ TAトレーニングキットには、TOPO™に適合し、すぐに使用可能なpCR™8/GW/TOPO™ベクター、dNTP、塩溶液、滅菌水、Gatewayフォワードシーケンシングプライマーおよび逆シーケンシングプライマー、コントロールテンプレートおよびPCRプライマー、One Shot™ TOP10ケミカルコンピテント大腸菌、ケミカルコンピテント大腸菌、S.O.C.培地、およびpUC19コントロールプラスミド。One Shot™大腸菌を-80℃で保管してください。その他のすべての成分を-20°℃で保管してください。すべての試薬は、適切な保管条件であれば、6カ月間安定していることが保証されています。

よくあるご質問（FAQ）

Can I store my competent E. coli in liquid nitrogen?

We do not recommend storing competent E. coli strains in liquid nitrogen as the extreme temperature can be harmful to the cells. Also, the plastic storage vials are not intended to withstand the extreme temperature and may crack or break.

How should I store my competent E. coli?

We recommend storing our competent E. coli strains at -80°C. Storage at warmer temperatures, even for a brief period of time, will significantly decrease transformation efficiency.

Your Gateway-adapted TOPO vectors are supplied with a control template and control primers. Can I obtain the sequence of the control template?

The sequence of the control template is proprietary.

What is the best ratio of insert:vector to use for cloning? Is there an equation to calculate this?

The optimal ratio is 1:1 insert to vector. Optimization can be done using a ratio of 0.5-2 molecules of insert for every molecule of the vector.

Equation:

length of insert (bp)/length of vector (bp) x ng of vector = ng of insert needed for 1:1 insert:vector ratio

Does Platinum Taq DNA Polymerase High Fidelity enzyme mix leave 3' A-overhangs on the PCR product for subsequent cloning into a TOPO TA or original TA vector?

Yes, the enzyme mix leaves 3' A-overhangs on a portion of the PCR products. However, the cloning efficiency is greatly decreased compared to that obtained with Taq polymerase alone. It is recommended to add 3' A-overhangs to the product for TA cloning.

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