pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning Kit with One Shot™ Mach1™-T1R E. coli and PureLink™ Kit
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Invitrogen™

pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning Kit with One Shot™ Mach1™-T1R E. coli and PureLink™ Kit

pCR™8/GW/TOPO™ TAクローニングキットでは、シンプルな5分間のクローニングとGateway™組換えクローニングベクタープラットフォームへのアクセスを提供します。当社のpCR™8 TOPO™ TAベクターには最小限のMCSが含まれるため、インサートの配列が多く、ベクターの数が少なくなります。エントリークローンを作成する特許取得済みのatt部位、pCR™8ベクターは詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
K25200220プレップ
製品番号(カタログ番号) K252002
価格(JPY)
149,800
Each
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数量:
20プレップ
pCR™8/GW/TOPO™ TAクローニングキットでは、シンプルな5分間のクローニングとGateway™組換えクローニングベクタープラットフォームへのアクセスを提供します。当社のpCR™8 TOPO™ TAベクターには最小限のMCSが含まれるため、インサートの配列が多く、ベクターの数が少なくなります。エントリークローンを作成する特許取得済みのatt部位、pCR™8ベクターは、Gateway™組換えクローニングを介して、面倒なサブクローニングを行うことなく、さまざまな発現ベクターに簡単にアクセスできるため、貴重な研究時間を節約できます。

PCR™8/GW/TOPO™ TAクローニングキットの特長:
•急速に成長してクローニング時間を短縮する大腸菌
• 最大の利便性:Plasmid Miniprep Kitが含まれています
•さまざまなGatewayデスティネーションベクターへの迅速な組換えのためのatt部位
• Taq増幅PCR産物の直接ライゲーションのための3'-Tオーバーハング
• 挿入部位の55 bp以内のシーケンシングプライマー部位により、インサートの配列が多く、ベクターの数が少なくなります
大腸菌での堅牢な選択のためのスペクチノマイシン耐性遺伝子
• EcoR I部位はPCR産物の挿入部位に隣接するため、インサート配列を簡単に切り出せます

このキットには、One Shot™ Mach1™-T1Rケミカルコンピテント大腸菌およびPureLink™ Quick Plasmid Miniprep Kitが含まれます。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
クローニング法TOPO™とGateway™
反応数20 preps
製品ラインOne Shot
製品タイプTA Cloning Kit
数量20プレップ
ベクターpCR
Unit SizeEach
組成および保存条件
pCR™8/GW/TOPO™ベクター、dNTP、塩溶液、滅菌水、Gatewayフォワードシーケンシングプライマーおよび逆シーケンシングプライマー、コントロールテンプレートおよびPCRプライマー、One Shot™ TOP10ケミカルコンピテント大腸菌、ケミカルコンピテント大腸菌、S.O.C.培地、およびpUC19コントロールプラスミド。PureLink Quick Plasmid Miniprep Kitには、Resuspunation Buffer、RNase A、溶解バッファー、沈殿バッファー、洗浄バッファー、TEバッファー、スピンカラム、洗浄チューブおよび回収チューブが含まれます。PureLink™ キットのすべての成分を室温で保管してください。One Shot™大腸菌を-80℃で保管してください。その他のすべての成分を-20°℃で保管してください。すべての試薬は、適切な保管条件であれば、6カ月間安定していることが保証されています。

よくあるご質問(FAQ)

Can I store my competent E. coli in liquid nitrogen?

We do not recommend storing competent E. coli strains in liquid nitrogen as the extreme temperature can be harmful to the cells. Also, the plastic storage vials are not intended to withstand the extreme temperature and may crack or break.

How should I store my competent E. coli?

We recommend storing our competent E. coli strains at -80°C. Storage at warmer temperatures, even for a brief period of time, will significantly decrease transformation efficiency.

Your Gateway-adapted TOPO vectors are supplied with a control template and control primers. Can I obtain the sequence of the control template?

The sequence of the control template is proprietary.

What is the best ratio of insert:vector to use for cloning? Is there an equation to calculate this?

The optimal ratio is 1:1 insert to vector. Optimization can be done using a ratio of 0.5-2 molecules of insert for every molecule of the vector.

Equation:

length of insert (bp)/length of vector (bp) x ng of vector = ng of insert needed for 1:1 insert:vector ratio

Does Platinum Taq DNA Polymerase High Fidelity enzyme mix leave 3' A-overhangs on the PCR product for subsequent cloning into a TOPO TA or original TA vector?

Yes, the enzyme mix leaves 3' A-overhangs on a portion of the PCR products. However, the cloning efficiency is greatly decreased compared to that obtained with Taq polymerase alone. It is recommended to add 3' A-overhangs to the product for TA cloning.