Zero Blunt™ PCR Cloning Kit, without competent cells

Zero Blunt™ PCR Cloning Kitは、プルーフリーディング、耐熱性DNAポリメラーゼで増幅された平滑末端PCR産物の高効率（>80%）クローニングの簡単な方法を提供します。Zero Blunt™ PCRクローニングキットは、多目的クローニングベクターpCR™-BluntおよびExpressLink™ T4 DNA Ligaseを使用して、5分間の室温ライゲーションステップでライゲーション産物を生成します。

pCR™-Bluntベクターを使用したZero Blunt™クローニング™キットの特長：
•迅速＆便利—5分間の、室温でのライゲーション
• 効率的ポジティブセレクション用のccdB遺伝子は、正しいインサートのクローンを >80％生成します
• 柔軟性カナマイシンまたはZeocin™耐性を選択できるため、抗生物質を柔軟に選択できます

The pCR™-Bluntベクターは次のものを提供します：
•インサートを切り出すための、PCR産物の挿入部位に隣接するEcoR I部位
• in vitro RNA転写およびシーケンシング用のT7プロモーター／プライマー領域
• シーケンシングまたはPCRスクリーニング用のM13フォワードおよびリバースプライマー領域

Zero Blunt™ PCRクローニングの仕組み
Zero Blunt™PCRクローニングキットは、非組み換え体のバックグラウンドが低い平滑PCRフラグメント（または平滑DNAフラグメント）をクローニングするように設計されています。pCR™-Bluntベクターには、LacZαのC末端に融合した致死的な大腸菌ccdB遺伝子が含まれています（Bernard他、1994）。平滑なPCR断片のライゲーションは、形質転換時に陽性組み換え体のみを増殖させるlacZα-ccdB遺伝子融合の発現を阻害します。非組換えベクターを含む細胞は、形質転換混合物をプレーティングする際に死滅します。

キットの構成
Zero Blunt™ PCRクローニングキットにはさまざま構成があります：One Shotあり™ TOPO10化学的コンピテント大腸菌（K2700-20およびK2700-40）、コンピテント細胞なし（K2750-20およびK2750-40）、20反応と40反応のキットサイズがあります。