TOPO™ TA Cloning™ Kit, Dual Promoter, with One Shot™ TOP10 chemically competent E. coli cells

TOPO™ TA Cloning™ Kit, Dual Promoter, with One Shot™ TOP10 chemically competent <i>E. coli</i> cells

Citations & References (8)

Invitrogen™

TOPO™ TA Cloning™ Kit, Dual Promoter, with One Shot™ TOP10 chemically competent E. coli cells

Name: TOPO™ TA Cloning™ Kit, Dual Promoter, with One Shot™ TOP10 chemically competent E. coli cells
SKU: K460040

TOPO™ TA Cloning™ Dual Promoterキットは、迅速かつ効率的なクローニングと後続のin vitro転写を目的としています。こらのキットには、デュアルT7とSP6プロモーターを備えたpCR™II-TOPO™ TAベクターが含まれています詳細を見る

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製品番号（カタログ番号）	数量
K460040	50反応
K4600J10	10反応
K460001	25反応

3 オプション

製品番号（カタログ番号） K460040

価格（JPY）

205,000

Each

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数量:

50反応

TOPO™ TA Cloning™ Dual Promoterキットは、迅速かつ効率的なクローニングと後続のin vitro転写を目的としています。こらのキットには、デュアルT7とSP6プロモーターを備えたpCR™II-TOPO™ TAベクターが含まれています。時間と手間のかかる制限部位クローニングを排除したTOPO™クローニングは、3ステップのプロトコルと5分間のクローニング反応を特徴とし、最大95%の組換え体を得ることができる最も信頼性の高いクローニング方法です。

TOPO™ TAクローニング™ デュアルプロモーターキットの特長：
•Taq増幅PCR産物の直接ライゲーション用3´-Tオーバーハング
• 効率的なin vitro転写のためのT7およびSP6プロモーター
• シーケンシングのためのM13フォワードおよびリバースプライマーサイト
• 16の便利な制限部位（EcoRIを含む）は、後続の切除やサブクローニングのためにインサートの側面に配置されています
• 大腸菌
での選択に適したカナマイシンおよびアンピシリン耐性• 組換え体の選択のための容易な青/白コロニースクリーニング
• 利便性を高め、最高のクローニング効率を実現するOneShot™ TOP10コンピテント細胞を含みます

きっとのオプション：TOPO™ TA Cloning™デュアルプロモーターキット
TOPO™ TA Cloningデュアルプロモーターキットは、お客様のニーズに応じて、さまざまな利点を持つ各種コンピテントセルとともにご購入いただけます。
• 一般的なクローニング：TOP10細胞（カタログ番号K4600-J10、K4600-01、K4600-40）
• 高効率のクローニング：TOP10 Electrocomp™細胞（カタログ番号K4660-01、K4660-40）•一般クローニング、バクテリオファージT1耐性：DH5α-T1R細胞（カタログ番号：K4620-01、K4620-40）
•迅速な増殖：Mach1™-T1R化学的コンピテント大腸菌（カタログ番号K4610-20）
• リプレッサー/誘導が必要な場合：TOP10F’細胞（カタログ番号K4650-01）
•が、お客様に必要な細胞を提供します（カタログ番号451641、450641）

研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。

仕様

菌株または酵母株TOP10

細胞タイプケミカルコンピテント

クローニング法TOPO™-TA

製品ラインOne Shot

製品タイプCloning Kit

プロモーターT7、SP6

数量50反応

ベクターTOPO TA クローニングベクター

フォーマットキット

Unit SizeEach

組成および保存条件

ボックス1：
• Topoisomerase i-activated PCR™II-TOPO™ ベクター
• PCR buffer
• 塩溶液
• dNTPs
• コントロールテンプレート
• M13 フォワードおよびリバースプライマー
• コントロール PCR プライマー
• 滅菌水

-5～-30℃で保存します。
すべての試薬は、適切に保存すると6ヶ月間安定しています。

ボックス 2：
• One Shot™ Chemically コンピテントまたは Electrocomp™ 大腸菌
• S.O.C. 培地
•スーパーコイル pUC19 コントロールプラスミド。

-68～-85℃で保管します。

よくあるご質問（FAQ）

Can I store my competent E. coli in liquid nitrogen?

We do not recommend storing competent E. coli strains in liquid nitrogen as the extreme temperature can be harmful to the cells. Also, the plastic storage vials are not intended to withstand the extreme temperature and may crack or break.

How should I store my competent E. coli?

We recommend storing our competent E. coli strains at -80°C. Storage at warmer temperatures, even for a brief period of time, will significantly decrease transformation efficiency.

What is the difference between the pCR2.1-TOPO and pCR4-TOPO vectors?

The vector backbones for both of these vectors are very similar. The main difference is that the pCR4-TOPO vector has sequencing primer sites located as close as 33 base pairs from the PCR product insertion site. This minimizes the amount of vector DNA sequence that needs to be read before reaching the sequence of the insert, making the pCR4-TOPO vector very useful for sequencing applications.

What is the difference between the pCR2.1-TOPO and pCRII-TOPO vectors?

The vector backbones for both of these vectors are very similar. The main difference is that the pCRII-TOPO vector is a dual promoter vector, containing the SP6 and T7 promoters for in vitro transcription/sequencing, whereas the pCR2.1-TOPO vector contains only the T7 promoter for in vitro transcription/sequencing. Both vectors contain the M13 Forward and Reverse primer sites for sequencing or PCR screening.

Your TOPO cloning kits contain a control template and control primers. Can I obtain the sequence of the control template?

The sequence of the control template is proprietary.

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引用および参考文献 (8)

引用および参考文献

Abstract

Cloning and functional expression of a thyrotropin receptor cDNA from rat fat cells.

Authors:Endo T; Ohta K; Haraguchi K; Onaya T;

Journal:J Biol Chem

PubMed ID:7738021

Thyrotropin receptor (TSH-R) has been thought to be thyroid-specific, but, by Northern blot analysis, we found that rat adipose tissue expressed TSH-R mRNAs in amounts approaching those in the thyroid. To investigate the function of TSH-R from adipose tissue, we screened a rat fat cell lambda gt11 cDNA library for ... More

Dual DNA binding specificity of ADD1/SREBP1 controlled by a single amino acid in the basic helix-loop-helix domain.

Authors:Kim JB, Spotts GD, Halvorsen YD, Shih HM, Ellenberger T, Towle HC, Spiegelman BM

Journal:Mol Cell Biol

PubMed ID:7739539

'Adipocyte determination- and differentiation-dependent factor 1 (ADD1), a member of the basic helix-loop-helix (bHLH) family of transcription factors, has been associated with both adipocyte differentiation and cholesterol homeostasis (in which case it has been termed SREBP1). Using PCR-amplified binding analysis, we demonstrate that ADD1/SREBP1 has dual DNA sequence specificity, binding ... More

Sequential mutations in the interleukin-3 (IL3)/granulocyte-macrophage colony-stimulating factor/IL5 receptor beta-subunit genes are necessary for the complete conversion to growth autonomy mediated by a truncated beta C subunit.

Authors:Hannemann J, Hara T, Kawai M, Miyajima A, Ostertag W, Stocking C

Journal:Mol Cell Biol

PubMed ID:7739524

'An amino-terminally truncated beta C receptor (beta C-R) subunit of the interleukin-3 (IL3)/granulocyte-macrophage colony-stimulating factor/IL5 receptor complex mediates factor-independent and tumorigenic growth in two spontaneous mutants of a promyelocytic cell line. The constitutive activation of the JAK2 protein kinase in these mutants confirms that signaling occurs through the truncated receptor ... More

A powerful transgenic tool for fate mapping and functional analysis of newly generated neurons.

Authors:Zhang J, Giesert F, Kloos K, Vogt Weisenhorn DM, Aigner L, Wurst W, Couillard-Despres S

Journal:BMC Neurosci

PubMed ID:21194452

Lack of appropriate tools and techniques to study fate and functional integration of newly generated neurons has so far hindered understanding of neurogenesis' relevance under physiological and pathological conditions. Current analyses are either dependent on mitotic labeling, for example BrdU-incorporation or retroviral infection, or on the detection of transient immature ... More

Classical and non-classical Major Histocompatibility Complex class I gene expression in in vitro derived bovine embryos.

Authors:Doyle J, Ellis SA, O'Gorman GM, Aparicio Donoso IM, Lonergan P, Fair T

Journal:J Reprod Immunol

PubMed ID:19682752

The role of the Major Histocompatibility Complex class I (MHC-I) genes in human and mouse preimplantation embryo development has received considerable attention. In contrast, information concerning the role of these genes in bovine embryo development is limited. The objective of the current study was to characterize the expression pattern of ... More

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