Expressway™ Mini Cell-Free Expression System
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Invitrogen™

Expressway™ Mini Cell-Free Expression System

Expressway™ Mini Cell-Free Expression Systemでは、効率的な結合転写反応とトランスレーション反応を利用して、活発な組換えタンパク質を生成します。このシステムでは、形質転換、細胞培養詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
K9901001 Kit
製品番号(カタログ番号) K990100
価格(JPY)
49,000
온라인 행사
Ends: 27-Mar-2026
81,700
割引額 32,700 (40%)
Each
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数量:
1 Kit
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Expressway™ Mini Cell-Free Expression Systemでは、効率的な結合転写反応とトランスレーション反応を利用して、活発な組換えタンパク質を生成します。このシステムでは、形質転換、細胞培養、発現最適化など、細胞ベースのタンパク質生成の時間のかかるステップを排除します。わずか2時間で、ダウンストリームアプリケーションや機能研究に適したタンパク質を生成できます。Expressway™ Mini Cell-Free Expression Systemでは、次のことを可能にするために実験設計の柔軟性を提供します
• 環状プラスミドテンプレートおよび線形テンプレートの両方からタンパク質を合成します(例:PCR産物)
• タンパク質のハイスループット合成を実行します
in vivoシステムに毒性のある遺伝子を発現します

ワークフロー:
Expressway™ Mini Cell-Free Expression Systemは、最適な無細胞タンパク質の生成に必要なすべての成分を提供します。このキットには、転写およびトランスレーションを促進するために必要な細胞機械を含む大腸菌抽出物が含まれています。必要なアミノ酸とATP再生成システムを提供するために、このキットにはIVPS(in vitroタンパク質合成)反応バッファーとアミノ酸モジュールも含まれています。反応バッファー、アミノ酸ミックス、メチオニン(標識または非標識)、T7酵素ミックス、およびDNAテンプレート(T7プロモーターを含む)を大腸菌抽出物と混合します。DNAテンプレートが転写されると、mRNAの5’末端がリボソームに結合され、テンプレートの3’末端としてのトランスレーションがまだ転写されています(図1)。


機能性タンパク質により、次のことが容易になります:

Expressway™ Mini Cell-Free Expression Systemは、大腸菌タンパク質溶解物から完全長の機能性タンパク質を高収率で生成するように最適化されています(図2)。タンパク質の収量を増やすために、独自のフィードバッファー組成がシステムに付属しています。


含有量および保存:
Expressway™ Mini Cell-Free Expression Systemは、50-μlの反応20回または1 mlの反応1回を実行するように設計されています。このシステムには、IVPS E.coli抽出物、IVPS反応バッファー、フィードバッファー、19アミノ酸ミックス、メチオニン、DNase/RNaseフリーの水、RNase A、T7酵素ミックス、2-mlの反応チューブおよびポジティブ発現コントロールベクターが含まれます。Expressway™ Mini Cell-Free Expression Systemで使用する推奨ベクターを以下に示します。ベクターを-20℃で保管してください。他のキット成分は-80℃で保管してください。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
発現タンパク質タイプ水可溶性タンパク質
発現メカニズム無細胞発現
発現システムセルフリー
製品タイプCell-Free Expression System
数量1 Kit
製品ラインExpressway
プロモーターT7
Unit SizeEach

よくあるご質問(FAQ)

I accidentally stored my E. coli slyD-Extract, E. coli Reaction Buffer (-A.A.), and 2X feed buffer at room temperature. Can I still use them?

Unfortunately, this may result in a loss of activity.

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I've run out of the T7 RNA polymerase for my cell-free expression. What do you suggest I use?

We would recommend using T7 RNA polymerase (Cat. No. 18033019, 50 U/µL). Use 1-1.5 µL in a 50 µL reaction system.

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I'm getting smearing after running my cell-free expression reaction on a gel.. What could be the cause of this?

Smearing may occur if samples for the following reasons:

- Samples were not precipitated with acetone: precipitate proteins with acetone to remove background smearing.
- Too much protein was loaded: reduce the amount used.
- The gel itself was not clean: rinse the gel briefly before exposing to film.
- Ethanol was present in the protein synthesis reaction: make sure that any residual ethanol is removed during DNA purification.
- Check the date of your pre-cast gels: do not use gels after the expiration date.

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I'm seeing a ladder of small-sized products after running my reaction on a gel when using the Expressway system. Why is this?

There may be several reasons for why this is occurring. The most common are: proteolysis, degradation of DNA and/or RNA templates (truncated templates will generate truncated protein products), internal initiation (if there are many methionines and internal RBS-like sequences in the gene, the ribosome may initiate translation from the wrong methionine), premature termination, translational pausing, frequent rare codon usage, complicated secondary structure of RNA, and others. This can also happen if proteins are denatured for too long, or not enough SDS was added to the 1X SDS-PAGE sample buffer.

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With a cell-free expression system, I'm getting good protein yield, but it has low biological activity. What can I do?

- Your protein may not be folding properly: try to reduce the incubation temperature to as low as 25 degrees C during synthesis.
- You may require post-translational modification of your protein: the Expressway system will not introduce post-translational modifications to the recombinant protein.
- Your synthetic protein may require co-factors for complete activity: try adding required co-factors to the protein synthesis reaction.

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引用および参考文献 (2)

引用および参考文献
Abstract
Fox-2 splicing factor binds to a conserved intron motif to promote inclusion of protein 4.1R alternative exon 16.
Authors:Ponthier JL, Schluepen C, Chen W, Lersch RA, Gee SL, Hou VC, Lo AJ, Short SA, Chasis JA, Winkelmann JC, Conboy JG,
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:16537540
'Activation of protein 4.1R exon 16 (E16) inclusion during erythropoiesis represents a physiologically important splicing switch that increases 4.1R affinity for spectrin and actin. Previous studies showed that negative regulation of E16 splicing is mediated by the binding of heterogeneous nuclear ribonucleoprotein (hnRNP) A/B proteins to silencer elements in the ... More
P-Rex1 links mammalian target of rapamycin signaling to Rac activation and cell migration.
Authors:Hernández-Negrete I, Carretero-Ortega J, Rosenfeldt H, Hernández-García R, Calderón-Salinas JV, Reyes-Cruz G, Gutkind JS, Vázquez-Prado J,
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:17565979
'Polarized cell migration results from the transduction of extra-cellular cues promoting the activation of Rho GTPases with the intervention of multidomain proteins, including guanine exchange factors. P-Rex1 and P-Rex2 are Rac GEFs connecting Gbetagamma and phosphatidylinositol 3-kinase signaling to Rac activation. Their complex architecture suggests their regulation by protein-protein interactions. ... More