Maxima™ H Minus cDNA Synthesis Master Mix
Maxima™ H Minus cDNA Synthesis Master Mix
Thermo Scientific™

Maxima™ H Minus cDNA Synthesis Master Mix

Thermo Scientific Maxima HマイナスcDNA合成マスターミックスは、cDNA合成反応に必要な全ての成分を1チューブにまとめた便利なマスターミックスです。2ステップの定量的RT-PCR(RT-qPCR)アプリケーションのための高効率cDNA合成に最適化されています。特長:•ワンチューブマスターミックスは、ピペッティングステップの削減とRT-qPCR結果の一貫性の向上に役立ちます•幅広いインプットRNA量と遺伝子ターゲットにわたるRT効率の向上•50~65℃の温度範囲でRT反応を可能にする高い熱安定性マスターミックスには詳細を見る
製品番号(カタログ番号)内容反応数
M1681Kit with dsDNase50反応
M1661Kit only50反応
M1662Kit only200反応
M1682Kit with dsDNase200反応
製品番号(カタログ番号) M1681
価格(JPY)
43,900
Each
お問い合わせください ›
内容:
Kit with dsDNase
反応数:
50反応
一括またはカスタム形式をリクエストする
Thermo Scientific Maxima HマイナスcDNA合成マスターミックスは、cDNA合成反応に必要な全ての成分を1チューブにまとめた便利なマスターミックスです。2ステップの定量的RT-PCR(RT-qPCR)アプリケーションのための高効率cDNA合成に最適化されています。

特長:
•ワンチューブマスターミックスは、ピペッティングステップの削減とRT-qPCR結果の一貫性の向上に役立ちます
•幅広いインプットRNA量と遺伝子ターゲットにわたるRT効率の向上
•50~65℃の温度範囲でRT反応を可能にする高い熱安定性

マスターミックスには、Maxima Hマイナス逆転写酵素(RT)とRiboLock RNase阻害剤が含まれています。Maxima HマイナスRTは、M-MuLV RTをin vitroで進化させた高度な酵素です。この酵素は、高い熱安定性、堅牢性、処理能力、cDNA合成速度の向上、 RNase H 活性の欠如を特徴としています。組換えRiboLock RNase阻害剤は、RNAテンプレートを55℃の温度までRNase A、B、およびCによる劣化から効果的に保護します。マスターミックスには、反応バッファー、dNTP、オリゴ(dT)18、およびランダムヘキサマープライマーも含まれています。また、No-RTコントロールミックスのチューブも別途用意されています。

Maxima HマイナスcDNA合成マスターミックスは、高温(50–65°℃)で再現性のあるcDNA合成が可能です合成反応は通常15–30分で完了します。

反応成分に関する追加情報
• No RTコントロールミックスには、Maxima HマイナスcDNA合成マスターミックスのRT以外のすべての成分が含まれています。RTコントロールの無い反応にPCR産物が存在する場合は、反応がDNAで汚染されていることを示します。ゲノムDNA除去効率をさらに高めるための、dsDNase(Cat)付きテンプレートRNAインキュベーション。No.EN0771)を強く推奨します。
•ヌクレアーゼフリー水は、反応設定およびサンプルDNAの希釈用です。適切な品質試験によってエキソデオキシリボヌクレアーゼ、リボヌクレアーゼ、およびホスファターゼが存在しないことが確認されています。

関連製品
dsDNase付きMaxima H Minus第一鎖cDNA合成キット
Maxima H Minus第一鎖cDNA合成キット
Maxima H Minus逆転写酵素
dsDNase

研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
最終産物タイプ第一鎖cDNA
フォーマットチューブ
内容Kit with dsDNase
反応数50反応
最適反応温度50°C
数量Each
反応形態マスターミックス
試薬タイプ逆転写
逆転写酵素Maxima H Minus
リボヌクレアーゼH活性低減
出荷条件ドライアイス
サイズ(最終製品)最長20 kb
原料RNA
技術Reverse Transcription
使用対象(アプリケーション)Real Time PCR (qPCR), RT-PCR
GC-Rich PCR Performance
反応速度30 min.
Unit SizeEach
組成および保存条件
• 1×200 µL Maxima H Minus cDNA合成マスターミックス
• 1×200 µL Maxima H Minus cDNA合成マスターミックス、RTコントロールなし
• 1×50 µL dsDNase
• 1×100 µL 10X dsDNaseバッファー0
• 1×1.25 mL ヌクレアーゼフリー水

-5~-30℃で保存してください。

よくあるご質問(FAQ)

Why is there no heat inactivation step for the dsDNase in the protocol for Maxima H Minus cDNA Synthesis Master Mix (Cat. No. M1681)?

The novel dsDNase enzyme degrades double-stranded genomic DNA. However, it has no effect on the single-stranded cDNA or the RNA-DNA hybrid. Therefore, the enzyme mix for reverse transcription can be added directly to the dsDNase treated RNA.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our PCR and cDNA Synthesis Support Center.

What steps should I take while performing first strand cDNA synthesis using low purity template (e.g., inhibitors in RNA sample)?

Trace amounts of reagents used in RNA purification protocols may remain in solution and inhibit first-strand synthesis, e.g., SDS, EDTA, guanidine salts, phosphate, pyrophosphate, polyamines, spermidine. To remove trace contaminants, we recommend re-precipitating the RNA with ethanol and washing the pellet with 75% ethanol, or re-purifying the RNA.

For reverse transcription, how important is the quality of RNA template?

RNA purity and integrity are essential for synthesis and quantification of cDNA. Always assess the integrity of RNA prior to cDNA synthesis. Use freshly prepared RNA. Multiple freeze/thaw cycles of the RNA sample and synthesized cDNA is not recommended. Avoid RNase contamination and discard low quality RNA.

When should I choose regular RevertAid RT or Maxima RT vs. RevertAid H Minus RT or Maxima H Minus RT?

It is generally beneficial to minimize RNase H activity when aiming to produce long transcripts for cDNA cloning. RNase H degrades RNA from RNA-DNA duplexes, which can result in truncated cDNA during reverse transcription of long mRNA. It is also recommended to use RNase H Minus RTs for template-independent addition of C nucleotides. In contrast, reverse transcriptases with intrinsic RNase H activity are often favored in qPCR applications.

What is the fidelity of RevertAid and Maxima reverse transcriptases?

The fidelity of RevertAid and Maxima reverse transcriptases is the same as that of wild-type M-MuLV RT, which is in the range of 1 error per 15,000-27,000 nucleotides synthesized.