硫酸停止液を加えると色が黄色に変わり、分光光度計またはプレートリーダーを使用して450 nmでの強度を正確に測定できます。この特定の組成は、サンドイッチELISA法で一貫した性能を提供するThermo Scientific Pierce ELISAキットのほとんどで使用されています。
TMB基質溶液の特長:
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製品コード:N301
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サイズ:100 mL(約10個の96ウェルマイクロプレートに十分対応)
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保管:コールドパックで出荷します。納入後はすぐに2~8°Cで保管してください。記載されている有効期限を過ぎた製品は使用しないでください。
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用途:ELISA:ペルオキシダーゼベースの酵素免疫測定法に推奨します。TMBは酸化時に、605 nmで分光光度測定が可能な水溶性の青色反応産物を形成します。酸性化時には、反応産物は黄色になり、吸光度ピークは450 nmになります。
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注意事項:この製品は、さまざまな酸化剤による汚染の影響を受けやすいです。汚染や期間前終了を回避するために、TMB溶液が汚染の可能性のあるソースに接触しないようにしてください。ボトルから直接ピペットで分注しないでください。必要な量をチューブに注ぎ、チューブからピペットで分注します。余分なTMBを一次保管容器に戻さないでください。
手順:• ペルオキシダーゼ反応を含む各ウェルに100µLのTMB基質を加えます。
•室温で15~30分間インキュベートします。
•各ウェルに100 µLの停止液(0.16M硫酸、
N600)を加えます。
• 450 nmで吸光度を測定します。