pHrodo™ Dyes for Amine Labeling

pHrodo Red、Green、Deep RedなどのpHrodo pHセンサー色素を用いて、低S/B比、高特異性で細胞内在性研究を行うことが可能となります。これらの色素は、抗体などの生体分子に結合させることができ、細胞のリソソームやエンドソームなどの酸性環境においてのみ高い蛍光を発するようになります。これにより、実験ワークフローにおいて洗浄工程やクエンチャー色素を必要とせず、生細胞アッセイでコンジュゲートされた生体分子を検出することができます。

pHrodo Red、Green、およびDeep Red色素
アミン反応性pH感受性pHrodo Red、Green、およびDeep Red色素は、生細胞アッセイでの抗体の内在化、エンドサイトーシスやファゴサイトーシスに関する研究に用いるバイオコンジュゲートの作成に最適化されています。アミン反応性のpHrodo色素を使用すると、抗体、タンパク質、細胞、ウイルス、またはその他のアミン含有生体分子上で第一級アミンを標識し、酸性環境内で蛍光を発し、中性pHではほとんどまたはまったくシグナルを示しない結合体を作成できます。一般的な細胞外環境ではpHrodo色素が蛍光しないため、実験ワークフローでの洗浄ステップやクエンチャー色素の必要がありません。

pHrodo iFL RedおよびGreen STP Ester色素
pHrodo iFL RedおよびGreen STP Ester色素は、オリジナルのpHrodo RedおよびGreen色素の改良版であり、元の色素よりも高い可溶性コンジュゲートが作成できるよう最適化されています。この強化された特性により、結合中に溶液から沈殿する可能性のある抗体の標識に有用となります。

pHrodo Deep Red TFP Ester
pHrodo Deep Red TFP Esterは、pHrodo iFL RedおよびGreen Ester色素とは異なり、pKaが低いため、エンドサイト経路におけるシグナル／バックグラウンド比の向上と蛍光の両方を示します。当社の低バックグラウンドpHrodo Deep Red色素は、後期エンドソームとリソソームでのみ蛍光を発するため、これまで以上に得られる結果の確実性が高く、最適化の少ない内在化研究を行うことができます。

アミン標識用のpHrodo色素の特長と利点

• カスタマイズ—pH感受性のpHrodo色素の使用により、pH感受性のバイオコンジュゲートを選択
• 迅速かつ正確—他のエンドサイトーシスアッセイやファゴサイトーシスアッセイよりも迅速かつ正確な結果を得ることができ、洗浄ステップやクエンチャーは不要です
• マルチプレックス—GFPやRFPなどの緑色または赤色の蛍光マーカーで3種類の色を選択してマルチプレックス化
• 優れたシグナルウィンドウ—pHrodo Deep Red色素は中性pHでバックグラウンドが最小限であるため、得られる結果の確実性を高めるための最大のシグナル／ノイズ比が可能です
• 低pKa—pHrodo Deep Red色素は、非内在化貨物から非特異的なシグナルを除去し、後期エンドソームおよびリソソームのみで蛍光を生じます。

この色素は、後期エンドソームおよびリソソームのみで蛍光を生じます。pHrodo色素は、pHの酸性化に伴って蛍光が増加することから、細胞内小胞の酸性化に相関し、エンドサイトーシスやファゴサイトーシス、環境因子や薬剤、病原体によるそれらの制御に関する研究用に貴重なツールとなります。pHrodo色素のスペクトル特性は、マルチカラー実験にも有用です。pHrodo iFl Red、iFL Green、Deep Red色素は、ほとんどの標準的な赤、緑、深型赤色蛍光フィルターセットを使用して検出できます。pHrodo色素コンジュゲートは、フローサイトメトリー、蛍光顕微鏡、ハイコンテントスクリーニング（HCS）などのさまざまなアプリケーションで使用できることが検証されています。

pHrodo Deep Red色素は、設計上pKaが低く、中性ではシグナルを示さず、酸性環境でのみ蛍光を発します。このユニークな特性により、抗体の内在化およびエンドサイトーシス／ファゴサイトーシス経路の研究において、迅速なアッセイ開発を促進し、確実な結果を得ることができます。pHrodo Deep Red色素は細胞外から内包されたカーゴをより識別しやすくし、pHrodo iFl RedおよびGreen色素は初期エンドソームで蛍光を発します。