Rhod-3 Calcium Imaging Kit
Rhod-3 Calcium Imaging Kit
Invitrogen™

Rhod-3 Calcium Imaging Kit

新しいRhod-3カルシウムイメージングキットは、緑色蛍光色素またはタンパク質との組み合わせで細胞質カルシウムシグナル伝達の生細胞イメージング用に設計されています。Rhod-3カルシウムイメージングキットに含まれている赤色蛍光Rhod-3 AM色素により、既存のCa2+検知色素よりも大幅に改善されています。細胞小器官への取り込みが低減され、細胞質の局在化が改善されました。また、Rhod-3 AMはカルシウムと結合すると蛍光発光が大幅に増加し詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
R101451 Kit
製品番号(カタログ番号) R10145
価格(JPY)
95,600
Each
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数量:
1 Kit
新しいRhod-3カルシウムイメージングキットは、緑色蛍光色素またはタンパク質との組み合わせで細胞質カルシウムシグナル伝達の生細胞イメージング用に設計されています。Rhod-3カルシウムイメージングキットに含まれている赤色蛍光Rhod-3 AM色素により、既存のCa2+検知色素よりも大幅に改善されています。細胞小器官への取り込みが低減され、細胞質の局在化が改善されました。また、Rhod-3 AMはカルシウムと結合すると蛍光発光が大幅に増加し、他の赤色蛍光カルシウム色素よりも感度が高くなります。

カルシウム、カリウム、pH、膜電位インジケーターなど、イオンインジケーターの詳細を見る›

• 既存の赤色カルシウム色素と比較して、Rhod-3 AMはCa2+と結合すると蛍光が大幅に増加し(2.5倍超)、静止時(Ca2+結合なし)の蛍光は非常に低くなります。

•狭域放射により、GFPまたは他の色素との同時検出が可能です。

•細胞質の局在化が強化されたため、細胞質の過渡状態をより適切に検出できます

細胞を簡単に充填できるように、Rhod-3カルシウムイメージングキットにはPowerLoad™濃縮液が含まれています。PowerLoad™溶液は独自の特性を持ち、完全な培養メディアが存在する場合でも使用できるため、メディアの交換や無血清メディアでの充填による悪影響が低減されます。

特許取得済みの水溶性プロベネシド(一般的に、これは細胞輸送を抑止するために使用され、ベースラインシグナルを下げる)もRhod-3カルシウムイメージングキットに含まれています。

カルシウムインジケータは、シグナル伝達および細胞ベース薬理学的スクリーニングにおいて重要なツールです。青色または緑色の自動蛍光を持つ細胞や組織では、長波長(つまり、赤方偏移)のカルシウムインジケータにより、この重複する自己蛍光を回避できます。さらに、赤方偏移カルシウム色素は緑色蛍光タンパク質(GFP)やその他の緑色蛍光色素で多重化されたカルシウムイメージング実験に非常に適しています。

Rhod-3 AM色素(Rhod-3カルシウムイメージングキットに含まれている)は、AMエステル基が付加された改良型の赤方偏移ローダミンベースカルシウム色素です。細胞内に入ると、細胞内エステラーゼがAM基を開裂し、細胞内に色素を閉じ込めて色素の蛍光を発光します。カルシウムが結合すると、色素の蛍光強度が高まります。Rhod-3 AMは当社のもっとも輝度が高い赤色カルシウム色素であり、スペクトル特性(励起/発光 = 約560/600 nm)と、カルシウム結合時の強力な蛍光により、優れたシグナルウィンドウを得られます。さらに、Rhod-3 AMでは、Rhod-2などの既存の赤色カルシウム色素に比べて、より均一な細胞質分布が可能になり、改善されたシグナルが示されます。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
検出法蛍光
染色剤タイプ蛍光色素ベース
形状凍結乾燥
修飾未修飾、未修飾
数量1 Kit
出荷条件室温
細胞内局在細胞質
Red
Emission可視
使用対象(アプリケーション)カルシウムアッセイ
使用対象 (装置)蛍光顕微鏡
製品ラインMolecular Probes
製品タイプ色素
Unit SizeEach
組成および保存条件
このキットには、提供されたプロトコルに基づいて50個のカバースリップを染色するために十分な試薬が含まれています。キットは-20℃で、乾燥した状態で、遮光して保管してください。指示どおり保管した場合、このキットは1年間安定しています。

よくあるご質問(FAQ)

When using Calcium Crimson, AM, as an indicator of intracellular calcium flux, I am not getting a good degree of change. The cells also have GFP. What can I do?

This is a known drawback of Calcium Crimson, AM (as well as Calcium Orange, AM and Fura Red, AM, which are also in the same emission range). You can try increasing the concentration and washing out of any unlabeled dye from the media, to try to get better signal-to-background. If that fails, we recommend using Rhod-3 AM instead, which has a much better change in signal in that wavelength.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Why don't I see a significant change in signal for my live-cell fluorescent indicator dye?

Regardless of the type of live-cell indicator dye (e.g., calcium indicators, pH indicator, metal ion indicators), make sure there is no serum during the loading step, which can prematurely cleave dyes with AM esters and bind dyes non-specifically. Always optimize the dye concentration and staining time with a positive control before you run your test samples, to give the best signal-to-background. Always run a positive control with a buffer containing free ions of known concentration and an ionophore to open pores to those ions (for instance, for calcium indicators like Fluo-4 AM, this would include a buffer with added calcium combined with calcimycin, or for pH indicators, buffers of different pHs combined with nigericin). Reactive oxygen indicators, such as CellROX Green or H2DCFDA would require a cellular reactive oxygen species (ROS) stimulant as a positive control, such as menadione. Finally, make sure your imaging system has a sensitive detector. Plate readers, for instance, have much lower detector efficiency over background, compared to microscopy or flow cytometry.

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引用および参考文献 (19)

引用および参考文献
Abstract
Modulation by Syk of Bcl-2, calcium and the calpain-calpastatin proteolytic system in human breast cancer cells.
Authors:Fei B, Yu S, Geahlen RL,
Journal:
PubMed ID:23684705
'Syk is a 72kDa non-receptor tyrosine kinase that is best characterized in hematopoietic cells. While Syk is pro-tumorigenic in some cancer cell types, it also has been reported as a negative regulator of metastatic cell growth in others. An examination of the RelA (p65) subunit of NF-?B expressed in MCF7 ... More
Direct reprogramming of fibroblasts into functional cardiomyocytes by defined factors.
Authors:Ieda M, Fu JD, Delgado-Olguin P, Vedantham V, Hayashi Y, Bruneau BG, Srivastava D,
Journal:Cell
PubMed ID:20691899
'The reprogramming of fibroblasts to induced pluripotent stem cells (iPSCs) raises the possibility that a somatic cell could be reprogrammed to an alternative differentiated fate without first becoming a stem/progenitor cell. A large pool of fibroblasts exists in the postnatal heart, yet no single ' ... More
Induction of human cardiomyocyte-like cells from fibroblasts by defined factors.
Authors:Wada R, Muraoka N, Inagawa K, Yamakawa H, Miyamoto K, Sadahiro T, Umei T, Kaneda R, Suzuki T, Kamiya K, Tohyama S, Yuasa S, Kokaji K, Aeba R, Yozu R, Yamagishi H, Kitamura T, Fukuda K, Ieda M,
Journal:
PubMed ID:23861494
'Heart disease remains a leading cause of death worldwide. Owing to the limited regenerative capacity of heart tissue, cardiac regenerative therapy has emerged as an attractive approach. Direct reprogramming of human cardiac fibroblasts (HCFs) into cardiomyocytes may hold great potential for this purpose. We reported previously that induced cardiomyocyte-like cells ... More
MKP3 eliminates depolarization-dependent neurotransmitter release through downregulation of L-type calcium channel Cav1.2 expression.
Authors:Mortensen OV,
Journal:Cell Calcium
PubMed ID:23337371
'Release of neurotransmitters is a fundamental and regulated process that is essential for normal brain functioning. Regulation of this process is potentially important for any neuronal process, and disruption of the release process may contribute to the pathophysiology associated with psychiatric diseases. In this work it is shown that expression ... More
Neprilysin deficiency protects against fat-induced insulin secretory dysfunction by maintaining calcium influx.
Authors:Zraika S, Koh DS, Barrow BM, Lu B, Kahn SE, Andrikopoulos S,
Journal:Diabetes
PubMed ID:23328128
'Neprilysin contributes to free fatty acid (FFA)-induced cellular dysfunction in nonislet tissues in type 2 diabetes. Here, we show for the first time that with prolonged FFA exposure, islet neprilysin is upregulated and this is associated with reduced insulin pre-mRNA and ATP levels, oxidative/nitrative stress, impaired potassium and calcium channel ... More