Flp-In™-CHO Cell Line
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Flp-In™-CHO Cell Line

Flp-In™ Cell Linesは、Flp-In™発現ベクターから目的のタンパク質を発現する安定した細胞株を迅速に生成するために設計されています。これらの細胞には、転写によって活発なゲノム遺伝子座で安定的に統合された単一のFRT部位が含まれます。Flp-In™発現ベクターのターゲット統合により、目的の遺伝子の高レベルでの発現が保証されます。同系の安定細胞株の生成には6種類のFlp-In™ Cell詳細を見る
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製品番号（カタログ番号）数量
R75807
または、製品番号R758-07
1 mL
製品番号（カタログ番号） R75807
または、製品番号R758-07
価格（JPY）
198,900
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数量:
1 mL
Flp-In™ Cell Linesは、Flp-In™発現ベクターから目的のタンパク質を発現する安定した細胞株を迅速に生成するために設計されています。これらの細胞には、転写によって活発なゲノム遺伝子座で安定的に統合された単一のFRT部位が含まれます。Flp-In™発現ベクターのターゲット統合により、目的の遺伝子の高レベルでの発現が保証されます。同系の安定細胞株の生成には6種類のFlp-In™ Cell Linesを利用でき、テトラサイクリン制御の安定した細胞株の生成にはFlp-In™ T-Rex™ Cell Lineを利用できます。Flp-In™-cV-1、Flp-In™-293、Flp-In™-BHK、Flp-In™-Jurkat、およびFlp-In™-3T3 Cell Linesは、親細胞株をpFRT/lacZeoでトランスフェクションし、安定したゼオシン™-耐性クローンを選択することにより作成されました。Flp-In-CHO™細胞株は、CHO細胞をpFRT/lacZeo2でトランスフェクションし、ゼオシン™耐性クローンを選択することで作成されます。Flp-In™ T-REx™-293 Cell Lineには、安定して統合されたpFRT/lacZeoおよびpcDNA™6/TR（T-REx™ Systemから）が含まれています。Flp-In™ Cell LinesとFlp-In™発現ベクターおよびFlp組換えベクター、pOG44の相互トランスフェクションにより、発現ベクターのすべての細胞内の同じ遺伝子座へのターゲット統合が行われ、均一レベルでの遺伝子発現が確実に行われます。

Flp-In™ベクター／細胞株の組み合わせの選択
Flp-In™-CV-1、Flp-In™-293、Flp-In™-CHO、およびFlp-In™-Jurkat Cell Lines（図1）は、CMVプロモーター（pcDNA™5/FRT、pcDNA5/FRT/V5-His-TOPO™、およびpSecTag/FRT/V5-His-TOPO™）から遺伝子を発現するFlp-In™ベクターで良好に機能します。Flp-In™-BHK細胞およびFlp-In™-3T3細胞には、CMVプロモーターをダウン制御する傾向があります。そのため、これらの細胞株にはEF-1αプロモーター（pEF5/FRT/V5-DEST™およびpEF5/FRT/V5-D-TOPO™）が含まれるFlp-In™ベクターを使用することをお勧めします。
研究用にのみ使用できます。診断用には使用いただけません。
仕様
細胞株Flp-In™-CHO細胞株
数量1 mL
種ハムスター
製品ラインFlp-In
タンパク質タグpSec
Unit SizeEach
組成および保存条件
3 x 106細胞は、1 mlの90 %の完全培地および10 %のDMSOで凍結して供給されます。細胞は液体窒素に保存する必要があります。細胞は、適切に保存されている場合、6ケ月間安定していることが保証されます。

よくあるご質問（FAQ）

Is multiple integration of the Flp-In expression construct possible? How do you screen for multiple integrants, and how stable is the Flp-In expression cell line?

In theory, one can get multiple integrations of the Flp-In expression construct—an FRT-specific integration event and a random, second-site integration. However, random integration is a relatively uncommon event. Limiting the amount of DNA in the transfection will reduce the chance of second-site integration. We have transfected 293 cells (lacking the FRT site) with the pcDNA5/FRT vector and have identified one potential second-site integrant after screening over 200 clones. DNA integrations can be detected by Southern blot. A single integrant will display a single band; double: two; triple: three, etc. We have maintained a number of Flp-In expression cell lines for over four months and have not observed any loss of the Flp-In expression construct, whether hygromycin selection was maintained or not.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Expression Support Center.

What kind of Flp-In T-REx cell lines do you offer?

We offer the Flp-In T-REx system that contains pFRT/lacZeo and pcDNA6/TR stably integrated into HEK 293 cells. This cell line has been functionally tested for its ability to regulate expression.

引用および参考文献 (8)

引用および参考文献
Abstract
Detection of anti-type 3 muscarinic acetylcholine receptor autoantibodies in the sera of Sjögren's syndrome patients by use of a transfected cell line assay.
Authors:Gao J, Cha S, Jonsson R, Opalko J, Peck AB,
Journal:Arthritis Rheum
PubMed ID:15334476
'OBJECTIVE: Sjögren''s syndrome (SS) is an autoimmune disease affecting primarily the salivary and lacrimal glands, leading to dry mouth and dry eyes. Recent studies have suggested that autoantibodies reactive with the type 3 muscarinic acetylcholine receptors (M3Rs) expressed on salivary and lacrimal gland cells may be highly specific for SS. ... More
The macrophage scavenger receptor CD163: endocytic properties of cytoplasmic tail variants.
Authors:Nielsen MJ, Madsen M, Møller HJ, Moestrup SK,
Journal:J Leukoc Biol
PubMed ID:16434690
'CD163 is the monocyte/macrophage-specific receptor for haptoglobin-hemoglobin (Hp-Hb) complexes. The cytoplasmic tail of human CD163 exists as a short tail variant and two long tail variants. Reverse transcriptase-polymerase chain reaction analysis indicated that all three CD163 variants are substantially expressed in blood, liver, and spleen, and the short tail variant ... More
Effect of genetic variation on human cytochrome p450 reductase-mediated paraquat cytotoxicity.
Authors:Han JF, Wang SL, He XY, Liu CY, Hong JY,
Journal:Toxicol Sci
PubMed ID:16495354
Paraquat (1,1'-dimethyl-4,4'-bipyridylium dichloride) is a widely used herbicide and is highly toxic to human and animals. The mechanisms of paraquat toxicity involve the generation of superoxide anion through the process of redox cycling. NADPH-cytochrome P450 oxidoreductase (POR) has been reported to be a major enzyme for one-electron reduction of paraquat ... More
The missense genetic polymorphisms of human CYP2A13: functional significance in carcinogen activation and identification of a null allelic variant.
Authors:Wang SL, He XY, Shen J, Wang JS, Hong JY,
Journal:Toxicol Sci
PubMed ID:16917071
Cytochrome P450 2A13 (CYP2A13), an enzyme predominantly expressed in human respiratory tissues, is highly efficient for the metabolic activation of two suspected human lung carcinogens 4-(methylnitrosamino)-1-(3-pyridyl)-1-butanone (NNK) and aflatoxin B1 (AFB1). Functional genetic polymorphisms of CYP2A13 may therefore be an important factor in human susceptibility to related lung cancers. Among ... More
Targeting of the dual oxidase 2 N-terminal region to the plasma membrane.
Authors:Morand S, Agnandji D, Noel-Hudson MS, Nicolas V, Buisson S, Macon-Lemaitre L, Gnidehou S, Kaniewski J, Ohayon R, Virion A, Dupuy C,
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:15150274
Dual oxidase 2 (Duox2) is a cell surface glycoprotein that probably provides thyroperoxidase with the H2O2 required to catalyze thyroid hormone synthesis. No functional H2O2-generating system has yet been obtained after transfecting Duox2 into non-thyroid cell lines, because it is retained in the endoplasmic reticulum (ER). We investigated the level ... More
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