Flp-In™ Cell Linesは、Flp-In™発現ベクターから目的のタンパク質を発現する安定した細胞株を迅速に生成するために設計されています。これらの細胞には、転写によって活発なゲノム遺伝子座で安定的に統合された単一のFRT部位が含まれます。Flp-In™発現ベクターのターゲット統合により、目的の遺伝子の高レベルでの発現が保証されます。同系の安定細胞株の生成には6種類のFlp-In™ Cell Linesを利用でき、テトラサイクリン制御の安定した細胞株の生成にはFlp-In™ T-Rex™ Cell Lineを利用できます。Flp-In™-cV-1、Flp-In™-293、Flp-In™-BHK、Flp-In™-Jurkat、およびFlp-In™-3T3 Cell Linesは、親細胞株をpFRT/lacZeoでトランスフェクションし、安定したゼオシン™-耐性クローンを選択することにより作成されました。Flp-In-CHO™細胞株は、CHO細胞をpFRT/lacZeo2でトランスフェクションし、ゼオシン™耐性クローンを選択することで作成されます。Flp-In™ T-REx™-293 Cell Lineには、安定して統合されたpFRT/lacZeoおよびpcDNA™6/TR（T-REx™ Systemから）が含まれています。Flp-In™ Cell LinesとFlp-In™発現ベクターおよびFlp組換えベクター、pOG44の相互トランスフェクションにより、発現ベクターのすべての細胞内の同じ遺伝子座へのターゲット統合が行われ、均一レベルでの遺伝子発現が確実に行われます。

Flp-In™ベクター／細胞株の組み合わせの選択
Flp-In™-CV-1、Flp-In™-293、Flp-In™-CHO、およびFlp-In™-Jurkat Cell Lines（図1）は、CMVプロモーター（pcDNA™5/FRT、pcDNA5/FRT/V5-His-TOPO™、およびpSecTag/FRT/V5-His-TOPO™）から遺伝子を発現するFlp-In™ベクターで良好に機能します。Flp-In™-BHK細胞およびFlp-In™-3T3細胞には、CMVプロモーターをダウン制御する傾向があります。そのため、これらの細胞株にはEF-1αプロモーター（pEF5/FRT/V5-DEST™およびpEF5/FRT/V5-D-TOPO™）が含まれるFlp-In™ベクターを使用することをお勧めします。