pBR322 Plasmid DNA

Thermo Scientific pBR322は、もっとも一般的に使用されている大腸菌クローニングベクターの1つです。

特長

•大腸菌（dam+, dcm+）から単離
•超らせん型のものが90%超え
•独自の特許技術を用いてクロマトグラフィーで精製

アプリケーション

• クローニング
• DNA分子量標準の調製

pBR322の長さは4,361 bpで、以下を含みます：
• プラスミドを複製するレプリコンrep（ソース – プラスミドpMB1）
• Ropタンパク質のコード化を行うrop遺伝子。不安定なRNA I – RNA II複合体を安定した複合体に変換する作用を促進し、コピー数を低減します（ソース – プラスミドpMB1）
• β‐ラクタマーゼのコード化を行うbla遺伝子。アンピシリンに対する耐性を与えます（ソース – トランスポゾンTn3）
• テトラサイクリン耐性タンパク質をコード化するtet遺伝子（ソース – プラスミドpSC101）
• 環状配列は、一意のEcoRI部位、GAATTCの最初のTが1となるように番号が付けられており、tet遺伝子とpMB1物質を通して番号が増加し、最後がTn3領域になります。

このマップは、pBR322 DNAを1回切断する酵素を示しています。Thermo Scientificが製造した酵素はオレンジ色で示されています。座標は、各認識配列における最初のヌクレオチドの位置を示します。
遺伝因子の正確な位置をマップに示します（終止コドンを含む）。シグナルペプチドのbla遺伝子ヌクレオチド4153-4085（相補鎖）コード。示されているrep領域は、複製を促進するのに十分です。DNA複製は2533（± 1）の位置で開始し、指示された方向に進みます。pMB1およびColE1レプリコンを持つプラスミドは適合しませんが、p15Aレプリコン（pACYC177、pACYC184）を持つプラスミドは完全に適合します。pMB1由来のプラスミドは、クロラムフェニコールを使用して増幅できます。