pUC19 DNA

Thermo Scientific pUC19ベクターは、コピー数が多い小さな大腸菌プラスミドであり、長さは2686 bpです。pUC18ベクターと同一のマルチクローニングサイト（MCS）を持ちますが、配列の方向は逆です。

特長

• 独自の特許技術を用いてクロマトグラフィーで精製
• 超らせん型のものが90%を上回る
• 大腸菌（dam+、dcm+）から単離
• pUC18 DNA配列、pUC19 DNA配列、配列解析、およびマップ作成については、無料のREviewerオンラインツールをご覧ください。

アプリケーション

• クローニング
• インサートDNA、pUC18 DNAのシーケンシング：DNA分子量標準の調製

pUC18/19プラスミドの内容と使用上の注意 - pUC18/19プラスミドの内容：
• プラスミドを複製するpMB1レプリコンrep（ソース – プラスミドpBR322）。pUCプラスミドのコピー数が多いのは、rop遺伝子が存在しないことと、pMB1のレプリコンrepの単一点突然変異が原因です。
•β‐ラクタマーゼのコード化を行うbla遺伝子は、アンピシリンに対する耐性を与えます（ソース – プラスミドpBR322）。二点突然変異である点がpBR322とは異なります
• 大腸菌のlacオペロン領域は、CAPタンパク質結合部位、プロモーターP_lac、lacリプレッサー結合部位、およびlacZ遺伝子の5’-末端部を含み、β-ガラクトシダーゼのN末端フラグメントをコード化します（ソース – M13mp18/19）。このフラグメントの合成はIPTGによる誘発が可能で、宿主によってコード化されたβ-ガラクトシダーゼの不完全な形態（変異デルタ（lacZ）M15）により、遺伝子座内（α）で補完できます。IPTGが存在する場合、細菌は酵素の両方のフラグメントを合成し、X-Galを持つ培地上に青色のコロニーを形成します。lacZ遺伝子内にあるMCSにDNAを挿入すると（lacZのコドン6-7はMCSによって置き換えられます）、β-ガラクトシダーゼのN末端フラグメントが不活性化し、α補完が行われなくなります。そのため、組換えプラスミドを持つ細菌は白色のコロニーを生じます。

このマップは、pUC18 DNAを1回切断する酵素を示しています。Thermo Scientificが製造した酵素はオレンジ色で示されています。座標は、各認識配列における最初のヌクレオチドの位置を示します。

遺伝因子の正確な位置をマップに示します（終止コドンを含む）。シグナルペプチドのbla遺伝子ヌクレオチド2486-2418（相補鎖）コード。wt β-ガラクトシダーゼに対応し、青／白コロニースクリーニングに不可欠なLacZポリペプチドは、nt位置236（相補鎖）で終了します。同じ読み取りフレーム内のその他30個のコドンは、pBR322に由来します。示されているrep領域は、複製を促進するのに十分です。DNA複製は866（± 1）の位置で開始し、指示された方向に進みます。pMB1およびColE1レプリコンを持つプラスミドは適合しませんが、p15Aレプリコン（pACYC177、pACYC184）を持つプラスミドは完全に適合します。pMB1由来のプラスミドは、クロラムフェニコールを使用して増幅できます。

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