Dead Cell Apoptosis Kits with Annexin V for Flow Cytometry
Dead Cell Apoptosis Kits with Annexin V for Flow Cytometry
Invitrogen™

Dead Cell Apoptosis Kits with Annexin V for Flow Cytometry

Annexin VおよびAlexa Fluor 488、FITC、PI、PE、APC、SYTOX Greenなどのコンジュゲート蛍光色素を使用したDead Cell Apoptosisキットで細胞生存率を評価します。
製品番号(カタログ番号)数量標識または色素
V13245250 AssaysAlexa Fluor 488, Propidium Iodide
V1324150 AssaysAlexa Fluor 488, Propidium Iodide
V132421 KitFITC, Propidium Iodide
V351121 KitSYTOX Green, R-PE
V351131 KitSYTOX Green, APC
製品番号(カタログ番号) V13245
価格(JPY)
181,900
250 assays
お問い合わせください ›
数量:
250 Assays
標識または色素:
Alexa Fluor 488, Propidium Iodide
Alexa Fluor 488、FITC、ヨウ化プロピジウム、PE、APC、SYTOX GreenなどのAnnexin Vコンジュゲートを備えたDead Cell Apoptosisキットを使用すると、フローサイトメトリーにて生細胞、死細胞、アポトーシス細胞を簡単に識別できます。こうしたコンジュゲートは、生細胞、死細胞、またはアポトーシス細胞を異なる色素で識別するため、マルチパラメトリック解析を用いた細胞生存率およびアポトーシスの評価に不可欠です。
細胞生存率をアッセイするために、アネキシンVを用いたDead Cell Apoptosisキットをフローサイトメトリーで使用することには、いくつかの利点があります:

優れた輝度
タンパク質濃度や精製レベルが低い他のアネキシンVキットとは異なり、Annexin V Alexa Fluor 488コンジュゲートはフローサイトメトリー用に最適化されており、アポトーシスを起こしている細胞と生細胞の間を最大限に分離します。Alexa Fluor 488色素は、フルオレセイン(FITC)に類似したスペクトルを持つ優れたグリーン蛍光色素です。

高結合効率
アネキシンVコンジュゲートは、高純度のcys-アネキシンから作製されており、高い結合効率を実現し、アポトーシスプロセスの非常に高精度な特性評価を実現します。

マルチパラメーター
多くの出版物では、細胞がアポトーシスであることを特定するために、少なくとも2つの方法が必要です。このマルチパラメーターキットは、細胞膜の細胞質表面にあるホスファチジルセリン(PS)を検出するほか、ヨウ化プロピジウムを介して膜の完全性を評価します。

Dead Cell Apoptosis Kit with Annexin V Alexa Fluor 488 & PI
Dead Cell Apoptosis Kit with Annexin V Alexa Fluor 488 & Propidium Iodide(PI)(V13241, V13245)は、フローサイトメトリーでリンファチジルセリン(PS)の発現および膜透過性を検出することにより初期アポトーシスを測定するために使用されます。細胞をアネキシンVおよびヨウ化プロピジウムで染色する場合、PSを発現するアポトーシスを起こしている細胞は、FITCチャンネル、低レベルの赤色蛍光で検出可能な緑色蛍光を示します。死細胞または壊死細胞は明るい赤色蛍光を示し、緑色蛍光は示しませんが、生細胞は緑色蛍光も赤色蛍光も示しません。

Dead Cell Apoptosis Kit with Annexin V PE and SYTOX Green
Dead Cell Apoptosis Kit with Annexin V PE and SYTOX Greenは、オレンジ色の蛍光フィコビリプロテインR-PEに結合した組み換えアネキシンVを使用したフローサイトメトリーでアポトーシス細胞のPS外在化を検出し、死細胞はSYTOX Green核酸染色剤で検出します。両方のプローブで処理した後、アポトーシスを起こしている細胞はオレンジ色蛍光を示し、死細胞は緑色の蛍光を示し、生細胞は蛍光をほとんど示さないか、まったく示しません。これらの集団は、488 nmのレーザーフローサイトメーターを使用して、530/30 nmおよび585/42 nmのバンドパスフィルターで簡単に識別できます。

Dead Cell Apoptosis Kit with Annexin V APC and SYTOX Green
Dead Cell Apoptosis Kit with Annexin V APC and SYTOX Greenは、赤色レーザー励起アロフィコシアニンに結合した組み換えアネキシンVを用いて、フローサイトメトリー中のアポトーシス細胞におけるPSの外部化を検出し、SYTOX Green核酸染色剤を用いて死細胞を検出します。アポトーシス細胞は、外部化PSに結合するアネキシンVによって検出されます。生細胞は蛍光をほとんどまたはまったく示さず、アポトーシス細胞は赤色蛍光とごくわずかな緑色蛍光を示し、後期アポトーシス細胞は赤色とオレンジ色の蛍光をより高いレベルで示します。これらの集団は、633 nmと488 nmの励起源(アルゴンイオンレーザーとHeNeレーザー)の両方を備えたフローサイトメーターを使用して簡単に識別できます。

Dead Cell Apoptosis Kit with Annexin V FITC and PI
Dead Cell Apoptosis Kit with Annexin V FITC and PIは、緑色蛍光FITC色素に結合した組み換えアネキシンVを使用してアポトーシス細胞のPS外在化を検出し、PIを使用して死細胞を検出します。PIで染色する壊死性細胞は赤色蛍光を示します。両方のプローブで処理した後、アポトーシスを起こしている細胞は緑色蛍光を示し、死細胞は赤色と緑色の蛍光を示し、生細胞は蛍光をほとんど示さないか、まったく示しません。

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
仕様
概要Dead Cell Apoptosis Kit with Annexin V Alexa Fluor 488&ヨウ化プロピジウム(PI)
励起/発光499、535/521、617
フローサイトメーターレーザーライン488
使用対象 (装置)蛍光顕微鏡、フローサイトメーター
キット内容5バイアルのアネキシンV、Alexa Fluor 488コンジュゲート(1バイアルあたり250 μL)、1バイアルのヨウ化プロピジウム(PI、100 μL)、および1ボトルのアネキシン結合バッファー(5倍の溶液、50 mL)を含みます。
標識または色素Alexa Fluor 488, Propidium Iodide
製品タイプアポトーシス検出キット
数量250 Assays
出荷条件湿氷
Unit Size250 assays
組成および保存条件
冷蔵庫(2℃~8℃)に保存し、遮光してください。

よくあるご質問(FAQ)

I want to study apoptosis using an Annexin V conjugate, but with adherent cells via microscopy instead of flow cytometry. Can this be done?

It has been done, but we don‘t recommend it. Both healthy cells and apoptotic cells possess phosphatidylserine on the cell surface, which can be detected with Annexin V, but apoptotic cells have significantly more of it. You can easily tell the difference between these two populations with flow cytometry, because flow cytometers are more sensitive and have a higher throughput. But with a microscope, you cannot always tell the difference, especially for adherent cells. Instead, for microscopy, we recommend a different technique, such as detecting caspases with CellEvent Caspase Detection Reagents.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

When using Dead Cell Apoptosis Kits with Annexin V for Flow Cytometry, what does a PI+ only population (hence Annexin V negative) correspond to?

These products are cells that died without undergoing apoptosis. A PI+ only population could be either a result of experimental condition or sample preparation.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

I trypsinized my adherent cells and labeled with annexin V, and now my flow data is showing a high percentage of apoptotic cells even for control, untreated cells. What is the problem?

Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. Allow the cells to recover for about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium after trypsinizing/scraping so that they can recover their membrane integrity before staining. For lightly adherent cell lines, such as HeLa and NIH 3T3, another option is to use non-enzyme treatments like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Can I detect annexin V staining in an imaging assay?

Annexin V staining is not typically used in imaging experiments; it is a better reagent for flow cytometry analysis. All cells will stain to some extent, so it can be difficult to distinguish a relatively bright annexin V-stained cell from a dimmer non-apoptotic cell. Caspase activation, detected using our CellEvent Caspase 3/7 or Image-iT LIVE Caspase detection kits, is a better method for detecting apoptosis in an imaging assay.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

When should I stain adherent cells with annexin V for flow cytometric analysis? Before or after I trypsinize them?

Trypsinize first and then allow the cells to recover about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium before staining with annexin V conjugates. Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing for annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. For lightly adherent cell lines such as HeLa and NIH 3T3, you could use a less harsh (non-enzymatic) dissociation product like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

引用および参考文献 (52)

引用および参考文献
Abstract
A novel sulindac derivative inhibits lung adenocarcinoma cell growth through suppression of Akt/mTOR signaling and induction of autophagy.
Authors:Gurpinar E, Grizzle WE, Shacka JJ, Mader BJ, Li N, Piazza NA, Russo S, Keeton AB, Piazza GA
Journal:Mol Cancer Ther
PubMed ID:23443799
'Nonsteroidal anti-inflammatory drugs such as sulindac sulfide have shown promising antineoplastic activity in multiple tumor types, but toxicities resulting from COX inhibition limit their use in cancer therapy. We recently described a N,N-dimethylethyl amine derivative of sulindac sulfide, sulindac sulfide amide (SSA), that does not inhibit COX-1 or -2, yet ... More
Translation of Pur-a is targeted by cellular miRNAs to modulate the differentiation-dependent susceptibility of monocytes to HIV-1 infection.
Authors:Shen CJ, Jia YH, Tian RR, Ding M, Zhang C, Wang JH,
Journal:FASEB J
PubMed ID:22835829
'The postentry restriction of HIV-1 replication in monocytes can be relieved when they differentiate to dendritic cells (DCs) or macrophages. Multiple mechanisms have been proposed to interpret the differentiation-dependent susceptibility of monocytes to HIV-1 infection, and the absence of host-cell-encoded essential factors for HIV-1 completing the life cycle may provide ... More
DNA methyltransferase-3-dependent nonrandom template segregation in differentiating embryonic stem cells.
Authors:Elabd C, Cousin W, Chen RY, Chooljian MS, Pham JT, Conboy IM, Conboy MJ,
Journal:
PubMed ID:24127215
'Asymmetry of cell fate is one fundamental property of stem cells, in which one daughter cell self-renews, whereas the other differentiates. Evidence of nonrandom template segregation (NRTS) of chromosomes during asymmetric cell divisions in phylogenetically divergent organisms, such as plants, fungi, and mammals, has already been shown. However, before this ... More
Id4 Promotes Senescence and Sensitivity to Doxorubicin-induced Apoptosis in DU145 Prostate Cancer Cells.
Authors:Carey JP, Knowell AE, Chinaranagari S, Chaudhary J,
Journal:
PubMed ID:24122992
Inhibitor of differentiation proteins (Id1, 2, 3 and 4) are dominant negative regulators of basic helix loop helix transcription factors and play dominant roles in cancer cells, spanning several molecular pathways including senescence, invasion, metastasis, proliferation and apoptosis. In contrast to high Id1, Id2 and Id3 expression, the expression of ... More
The HSP90 Inhibitor Ganetespib Radiosensitizes Human Lung Adenocarcinoma Cells.
Authors:Gomez-Casal R, Bhattacharya C, Epperly MW, Basse PH, Wang H, Wang X, Proia DA, Greenberger JS, Socinski MA, Levina V,
Journal:
PubMed ID:26010604
The molecular chaperone HSP90 is involved in stabilization and function of multiple client proteins, many of which represent important oncogenic drivers in NSCLC. Utilization of HSP90 inhibitors as radiosensitizing agents is a promising approach. The antitumor activity of ganetespib, HSP90 inhibitor, was evaluated in human lung adenocarcinoma (AC) cells for ... More