CyQUANT™ LDH and G6PD Cytotoxicity Assays

CyQUANT LDH細胞毒性アッセイ（蛍光）は、細胞毒性を測定するためのシンプルで信頼性の高い方法を提供する蛍光アッセイです。乳酸脱水素酵素（LDH）は、さまざまな種類の細胞に存在する細胞質酵素であり、細胞膜が損傷すると細胞培養培地に放出されます。CyQUANT LDH細胞毒性アッセイ（蛍光）は、この細胞外LDHを正確かつ定量的に測定するための試薬を提供します。

CyQUANT LDH細胞毒性アッセイ（蛍光）の特長は以下のとおりです。
•便利 — 3D細胞モデルを含む接着細胞および懸濁細胞用の添加-混合-読み取りアッセイプロトコル
• 正確 — LDH放出の定量測定を提供
• 柔軟 — 同じサンプルから経時的に細胞毒性をモニタリングし、ハイスループットスクリーニングに最適
• 堅実 — 高純度レサズリンを含む組成により、広範囲のアッセイダイナミックレンジを実現

LDHは、さまざまな種類の細胞に存在する細胞質酵素であり、確立された信頼性の高い細胞毒性インジケーターです。細胞膜が損傷すると、LDHが周囲の細胞培養培地に放出されます。この細胞外LDHは、結合酵素反応（LDHが媒体となり、NAD+からNADHへの還元を伴う乳酸からピルビン酸への変換が生じる）によって定量できます。その後、ジアホラーゼはNADHを使用して、レサズリンからレゾルフィンへの還元を行います。レゾルフィンは、560 nmの励起と590 nmの発光を使用して検出できます。レゾルフィン形成のレベルは、培地に放出されるLDHの量に直接比例します。

合成および製造プロセスの結果として、すべてのレサズリンベースの試薬には検出可能な量のレゾルフィンが混入しています。混入量は材料の発生源と製造条件によって大きく異なり、検出可能なバックグラウンド蛍光の差に寄与します。さらに重要なのは、混入したレゾルフィンにより、アッセイのシグナル／バックグラウンド比とダイナミックレンジが低下する点です。混入したレゾルフィンを除去する革新的なプロセスが開発され、その結果、CyQUANT™ LDH細胞毒性アッセイ（蛍光）で使用される高純度のレサズリンが得られました。

CyQUANT LDH細胞毒性アッセイ（蛍光）は、シンプルで信頼性の高い方法で蛍光ベースの細胞毒性定量を行うために必要な試薬を提供します。このキットは、3D細胞モデルを含むさまざまな種類の細胞で使用でき、化学化合物に媒介される細胞毒性や細胞媒介性の細胞毒性を測定できます。培地中のLDHは細胞毒性のインジケーターであるため、このアッセイを使用して、同じサンプル中の細胞毒性を経時的にモニタリングできます。アッセイを実施するために、細胞培養培地のアリコートを新しいプレートに移し、反応混合液を添加します。10分間のインキュベーション後、停止液を添加して反応を停止し、マイクロプレートリーダーを使用して蛍光を測定します。