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Citations & References (20)
Invitrogen™
Vybrant™ FLICA Caspase Apoptosis Assay Kits for flow cytometry
ポリおよびカスパーゼ-3/7/8活性を検出するVybrant FLICAカスパーゼアッセイにより、フローサイトメトリーを介してアポトーシスを検出できます。
製品番号（カタログ番号） V35118
価格（JPY）お問い合わせください ›
67,900
25 assays
標識または色素:
FAM、Hoechst 33342、ヨウ化プロピジウム
概要:
Vybrant FAMカスパーゼ-3および-7アッセイキット
ポリカスパーゼ、カスパーゼ3および7用のVybrant FAMカスパーゼアッセイキットにより、フローサイトメトリーによるカスパーゼ媒介アポトーシスを迅速に検出できます。Vybrant FAMカスパーゼアッセイキットでは、カスパーゼ活性を検出しデータ報告するために、蛍光性カスパーゼ阻害剤（FLICA）手法を用います。特にこれらのカスパーゼアッセイキットには、遺伝子組み換えFLICA基質FAM-VAD-FMK（ポリカスパーゼ用）、FAM-DEVD-FMK（カスパーゼ-3/7用）、FAM-LETD-FMK（カスパーゼ-8用）が含まれています。また、Hoechst 33342およびヨウ化プロピジウム染色も含まれており、膜透過性とフローサイトメトリーによる細胞周期の同時評価も可能です。
フローサイトメトリー用のVybrant FAMカスパーゼアッセイキットは、活性カスパーゼを検出するための新しいアプローチを採用しています：この場合、アフィニティラベルであるFLICA手法を利用しています。このアフィニティラベルは、カスパーゼ特異的なアミン酸配列に、システインと共有結合反応するフルオロメチルケトン（FMK）部位を関連付けます。さまざまなアミノ酸認識配列を使用して、以下の各種カスパーゼを検出します：ポリカスパーゼ（カスパーゼ-1、-3、-4、-5、-6、-7、-8、-9を含む）用のバリン-アラニン-アスパラギン酸（VAD）、カスパーゼ-3/7用アスパラギン酸-グルタミン酸-バリン-アスパラギン酸（DEVD）、カスパーゼ-8用ロイシン-グルタミン酸-スレオニン-アスパラギン酸（LETD）。カルボキシフルオレセイン（FAM）基がレポーターとして結合されます。
FLICA試薬は、認識配列を介して活性カスパーゼの酵素反応中心と相互作用し、FMK部分を介して共有結合すると考えられています。FLICA阻害剤は細胞透過性であり、細胞無毒性です。非結合FLICA分子は細胞外に拡散し、洗い流されます。残りの緑色蛍光シグナルは、阻害剤が添加された時点で存在していた活性カスパーゼの量を直接表す指標となります。FLICA、ヨウ化プロピジウム、Hoechst 33342試薬の励起ピークおよび発光ピークの概算値は、それぞれ488 nm/530 nm、535 nm/6,617 nm、350 nm/461 nmです。Vybrant FAM Polyカスパーゼアッセイ、カスパーゼ-3および-7アッセイ、カスパーゼ-8アッセイアポトーシスキットに含まれる検出試薬は、それぞれ488⁄530 FAM-VAD-FMK試薬、488/530 FAM-DEVD-FMKおよび488/530 FAM-LETD-FMKです。
FLICA試薬は、認識配列を介して活性カスパーゼの酵素反応中心と相互作用し、FMK部分を介して共有結合すると考えられています。FLICA阻害剤は細胞透過性であり、細胞無毒性です。非結合FLICA分子は細胞外に拡散し、洗い流されます。残りの緑色蛍光シグナルは、阻害剤が添加された時点で存在していた活性カスパーゼの量を直接表す指標となります。FLICA、ヨウ化プロピジウム、Hoechst 33342試薬の励起ピークおよび発光ピークの概算値は、それぞれ488 nm/530 nm、535 nm/6,617 nm、350 nm/461 nmです。Vybrant FAM Polyカスパーゼアッセイ、カスパーゼ-3および-7アッセイ、カスパーゼ-8アッセイアポトーシスキットに含まれる検出試薬は、それぞれ488⁄530 FAM-VAD-FMK試薬、488/530 FAM-DEVD-FMKおよび488/530 FAM-LETD-FMKです。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
仕様
概要Vybrant FAMカスパーゼ-3および-7アッセイキット
励起／発光FAM-DEVD-FMD：388/530
PI：535/617
Hoechst 33342：350/461
PI：535/617
Hoechst 33342：350/461
フローサイトメーターレーザーラインUV、488
使用対象 (装置)フローサイトメーター
キット内容1バイアルのFAM-DEVD-FMKカスパーゼ-3および-7試薬（FLICA試薬、凍結乾燥固体）、1バイアルのHoechst 33342（400 μL、水中1 mM）、1バイアルのPI（1 mL、水中250 μg/mL）、1バイアルのDMSO（0.5 mL）、1ボトルのアポトーシス固定溶液（PBSに10%ホルムアルデヒドとメタノールを含む、6 mL）、1ボトルの10倍アポトーシス洗浄バッファー。
標識タイプその他の標識または色素
標識または色素FAM、Hoechst 33342、ヨウ化プロピジウム
製品ラインVybrant
製品タイプCaspase Assay Kit
数量25 assays
出荷条件室温
保存要件冷蔵庫（2～8℃）に保存し、遮光。
検出法蛍光
フォーマットチューブ
Unit Size25 assays
よくあるご質問（FAQ）
What are the fluorescence excitation/emission maxima for the FAM-DEVD-FMK FLICA reagent, Hoechst 33342, and propidium iodide supplied in the Vybrant FAM Caspase-3 and -7 Assay Kit, for flow cytometry?
引用および参考文献 (20)
引用および参考文献
Abstract
Monocyte Chemoattractant Protein-Induced Protein 1 (MCPIP1) Enhances Angiogenic and Cardiomyogenic Potential of Murine Bone Marrow-Derived Mesenchymal Stem Cells.
Journal:
PubMed ID:26214508
'The current evidence suggests that beneficial effects of mesenchymal stem cells (MSCs) toward myocardial repair are largely due to paracrine actions of several factors. Although Monocyte chemoattractant protein-induced protein 1 (MCPIP1) is involved in the regulation of inflammatory response, apoptosis and angiogenesis, whether MCPIP1 plays any role in stem cell-induced
Multiparametric evaluation of apoptosis: effects of standard cytotoxic agents and the cyanoguanidine CHS 828.
Journal:Mol Cancer Ther
PubMed ID:15141009
'A multiparametric high-content screening assay for measurement of apoptosis was developed. HeLa cells and lymphoma U-937 cells were exposed to cytotoxic drugs in flat-bottomed optical microtiter plates. After incubation, the DNA-binding dye Hoechst 33342, fluorescein-tagged probes that covalently bind active caspases and chloromethyl-X-rosamine to detect mitochondrial membrane potential (MMP) were
Flow cytometry-based apoptosis detection.
Journal:Methods Mol Biol
PubMed ID:19609746
'An apoptosing cell demonstrates multitude of characteristic morphological and biochemical features, which vary depending on the stimuli and the cell type. The gross majority of classical apoptotic hallmarks can be rapidly examined by flow and image cytometry. Cytometry thus became a technology of choice in diverse studies of cellular demise.
BH3-only protein Noxa regulates apoptosis in activated B cells and controls high-affinity antibody formation.
Journal:Blood
PubMed ID:22144184
The efficiency of humoral immune responses depends on the selective outgrowth of B cells and plasma cells that produce high affinity antibodies. The factors responsible for affinity maturation of B cell clones in the germinal center (GC) have been well established but selection mechanisms that allow clones to enter the
In vitro primary human lymphocyte flow cytometry based micronucleus assay: simultaneous assessment of cell proliferation, apoptosis and MN frequency.
Journal:Mutagenesis
PubMed ID:21791709
In order to minimise the number of positive in vitro cytogenetic results which are not confirmed in rodent carcinogenicity tests, biological systems that are p53 and DNA repair proficient should be recommended. Moreover, an appropriate cytotoxicity parameter for top dose selection should be considered. Recent International Conference on Harmonisation draft