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Citations & References (13)
Invitrogen™
Vybrant™ FLICA Caspase Apoptosis Assay Kits for flow cytometry
ポリおよびカスパーゼ-3/7/8活性を検出するVybrant FLICAカスパーゼアッセイにより、フローサイトメトリーを介してアポトーシスを検出できます。
製品番号（カタログ番号） V35119
価格（JPY）お問い合わせください ›
67,900
25 assays
標識または色素:
FAM、ヨウ化プロピジウム、Hoechst 33342
概要:
Vybrant FAM Caspase-8 Assay Kit
ポリカスパーゼ、カスパーゼ3および7用のVybrant FAMカスパーゼアッセイキットにより、フローサイトメトリーによるカスパーゼ媒介アポトーシスを迅速に検出できます。Vybrant FAMカスパーゼアッセイキットでは、カスパーゼ活性を検出しデータ報告するために、蛍光性カスパーゼ阻害剤（FLICA）手法を用います。特にこれらのカスパーゼアッセイキットには、遺伝子組み換えFLICA基質FAM-VAD-FMK（ポリカスパーゼ用）、FAM-DEVD-FMK（カスパーゼ-3/7用）、FAM-LETD-FMK（カスパーゼ-8用）が含まれています。また、Hoechst 33342およびヨウ化プロピジウム染色も含まれており、膜透過性とフローサイトメトリーによる細胞周期の同時評価も可能です。
フローサイトメトリー用のVybrant FAMカスパーゼアッセイキットは、活性カスパーゼを検出するための新しいアプローチを採用しています：この場合、アフィニティラベルであるFLICA手法を利用しています。このアフィニティラベルは、カスパーゼ特異的なアミン酸配列に、システインと共有結合反応するフルオロメチルケトン（FMK）部位を関連付けます。さまざまなアミノ酸認識配列を使用して、以下の各種カスパーゼを検出します：ポリカスパーゼ（カスパーゼ-1、-3、-4、-5、-6、-7、-8、-9を含む）用のバリン-アラニン-アスパラギン酸（VAD）、カスパーゼ-3/7用アスパラギン酸-グルタミン酸-バリン-アスパラギン酸（DEVD）、カスパーゼ-8用ロイシン-グルタミン酸-スレオニン-アスパラギン酸（LETD）。カルボキシフルオレセイン（FAM）基がレポーターとして結合されます。
FLICA試薬は、認識配列を介して活性カスパーゼの酵素反応中心と相互作用し、FMK部分を介して共有結合すると考えられています。FLICA阻害剤は細胞透過性であり、細胞無毒性です。非結合FLICA分子は細胞外に拡散し、洗い流されます。残りの緑色蛍光シグナルは、阻害剤が添加された時点で存在していた活性カスパーゼの量を直接表す指標となります。FLICA、ヨウ化プロピジウム、Hoechst 33342試薬の励起ピークおよび発光ピークの概算値は、それぞれ488 nm/530 nm、535 nm/6,617 nm、350 nm/461 nmです。Vybrant FAM Polyカスパーゼアッセイ、カスパーゼ-3および-7アッセイ、カスパーゼ-8アッセイアポトーシスキットに含まれる検出試薬は、それぞれ488⁄530 FAM-VAD-FMK試薬、488/530 FAM-DEVD-FMKおよび488/530 FAM-LETD-FMKです。
FLICA試薬は、認識配列を介して活性カスパーゼの酵素反応中心と相互作用し、FMK部分を介して共有結合すると考えられています。FLICA阻害剤は細胞透過性であり、細胞無毒性です。非結合FLICA分子は細胞外に拡散し、洗い流されます。残りの緑色蛍光シグナルは、阻害剤が添加された時点で存在していた活性カスパーゼの量を直接表す指標となります。FLICA、ヨウ化プロピジウム、Hoechst 33342試薬の励起ピークおよび発光ピークの概算値は、それぞれ488 nm/530 nm、535 nm/6,617 nm、350 nm/461 nmです。Vybrant FAM Polyカスパーゼアッセイ、カスパーゼ-3および-7アッセイ、カスパーゼ-8アッセイアポトーシスキットに含まれる検出試薬は、それぞれ488⁄530 FAM-VAD-FMK試薬、488/530 FAM-DEVD-FMKおよび488/530 FAM-LETD-FMKです。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
仕様
概要Vybrant FAM Caspase-8 Assay Kit
励起／発光FAM-LETD-FMDK：488/530
PI：535/617
Hoechst 33342：350/461
PI：535/617
Hoechst 33342：350/461
フローサイトメーターレーザーラインUV、488
使用対象 (装置)フローサイトメーター
キット内容1バイアルのFAM-LETD-FMKカスパーゼ-8試薬（FLICA試薬）、1バイアルのHoechst 33342、1バイアルのヨウ化プロピジウム、1バイアルのDMSO、1ボトルのアポトーシス固定溶液、および1ボトルのアポトーシス洗浄バッファー（10倍溶液）。
標識タイプその他の標識または色素
標識または色素FAM、ヨウ化プロピジウム、Hoechst 33342
製品ラインVybrant
製品タイプCaspase Assay Kit
数量25 assays
出荷条件室温
保存要件冷蔵庫（2～8℃）に保存し、遮光。
検出法蛍光
フォーマットチューブ
Unit Size25 assays
引用および参考文献 (13)
引用および参考文献
Abstract
Galectin-3 binds to CD45 on diffuse large B-cell lymphoma cells to regulate susceptibility to cell death.
Journal:Blood
PubMed ID:23065155
Diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) is the most common non-Hodgkin lymphoma and an aggressive malignancy. Galectin-3 (gal-3), the only antiapoptotic member of the galectin family, is overexpressed in DLBCL. While gal-3 can localize to intracellular sites, gal-3 is secreted by DLBCL cells and binds back to the cell surface in
Reovirus infection or ectopic expression of outer capsid protein micro1 induces apoptosis independently of the cellular proapoptotic proteins Bax and Bak.
Journal:J Virol
PubMed ID:20980509
Mammalian orthoreoviruses induce apoptosis in vivo and in vitro; however, the specific mechanism by which apoptosis is induced is not fully understood. Recent studies have indicated that the reovirus outer capsid protein µ1 is the primary determinant of reovirus-induced apoptosis. Ectopically expressed µ1 induces apoptosis and localizes to intracellular membranes.
Interrelated roles for Mcl-1 and BIM in regulation of TRAIL-mediated mitochondrial apoptosis.
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:16478725
The current study demonstrates a novel cross-talk mechanism between the TRAIL receptor death signaling pathway and the mitochondria. This newly identified pathway is regulated at the mitochondrial outer membrane by a complex between the prosurvival Bcl-2 member, Mcl-1 and the BH3-only protein, Bim. Under non-apoptotic conditions, Bim is sequestered by
Assay of caspase activation in situ combined with probing plasma membrane integrity to detect three distinct stages of apoptosis.
Journal:J Immunol Methods
PubMed ID:12072182
Activation of cysteine-aspartic acid specific proteases (caspases) in situ, in live cells, can be detected using fluorochrome-labeled inhibitors of caspases (FLICA), the reagents that covalently bind to the active center of these enzymes. In the present study, this assay was combined with a probe of plasma membrane capacity to exclude
Interactions of fluorochrome-labeled caspase inhibitors with apoptotic cells: a caution in data interpretation.
Journal:Cytometry A
PubMed ID:12938188
BACKGROUND: Fluorochrome-labeled inhibitors of caspases (FLICA, e.g., FAM-VAD-FMK, FITC-VAD-FMK) have been designed as affinity labels of the enzyme active center of caspases Their binding by apoptotic cells was interpreted as reflecting activation of caspases. We have recently observed, however, that their binding is more complex and may involve additional mechanisms.