Vivid Colors™ pLenti6.3/V5-GW/EmGFP Expression Control Vector
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Invitrogen™

Vivid Colors™ pLenti6.3/V5-GW/EmGFP Expression Control Vector

Vivid Colors™ pLenti6.3⁄V5-GW⁄EmGFP発現コントロールベクターは、緑色蛍光タンパク質(EmGFP)を含むViraPower™ HiPerform™ポジティブコントロールレンチウイルスベクターです。この製品は、293FT細胞のトランスフェクション後に高レベルのEmGFP蛍光を検出できるポジティブコントロールとして、EmGFP発現レンチウイルスストックを産生するタイターコントロールとして詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
V3700620 μg
製品番号(カタログ番号) V37006
価格(JPY)
336,600
20 µg
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数量:
20 μg
Vivid Colors™ pLenti6.3⁄V5-GW⁄EmGFP発現コントロールベクターは、緑色蛍光タンパク質(EmGFP)を含むViraPower™ HiPerform™ポジティブコントロールレンチウイルスベクターです。この製品は、293FT細胞のトランスフェクション後に高レベルのEmGFP蛍光を検出できるポジティブコントロールとして、EmGFP発現レンチウイルスストックを産生するタイターコントロールとして、また分裂/非分裂哺乳類細胞での形質導入後の形質導入コントロールとしてViraPower™ HiPerform™レンチウイルス発現システムと併用するように設計されています。このベクターには、EmGFPの恒常的発現を促進するCMVプロモーターと、ブラストサイジン安定選択マーカーの発現を促進するSV40プロモーターがあります。このベクターは2つの重要な遺伝因子を持つHiperform™ベクターです。HIV-1インテグラーゼ遺伝子由来のWoodchuck Posttranscriptional Regulatory Element(WPRE)とセントラルポリプリン配列(cPPT)シーケンスで、これらの因子を持たないベクターと比べて、EmGFP発現量が4倍以上になります。このコントロールベクターは、EmGFP融合タンパク質の生成用には設計されていないため、V5エピトープは発現しません。

利点
• 分裂/非分裂哺乳類細胞におけるレンチウイルスベースのEmGFP発現
• トランスフェクションおよびレンチウイルス産生の迅速なポジティブコントロールとして機能
• レンチウイルスタイターの測定における迅速なタイターコントロールとして機能

主な特徴
• CMVプロモーターによる恒常的発現
• V5エピトープのない高レベルなEmGFP発現
• WPREおよびcPPTシーケンスで、これらの因子を持たないその他のレンチベクターと比べて4倍以上のEmGFP発現
• 安定的選択のためのブラストサイジン選択マーカー

キットの内容
• pLenti6.3⁄V5-GW⁄EmGFP発現コントロールベクター

関連SKU
• ViraPower™ HiPerform™レンチウイルスTOPO™発現キット(K531000)
• ViraPower™ HiPerform™レンチウイルスGateway™発現キット(K533000)
• ViraPower™ HiPerform™ T-Rex™ Gateway™発現システム(A11141)
• ViraPower™ HiPerform™ プロモーターレスGateway™発現システム(A11145)

研究用途にのみ使用できます。あらゆる治療もしくは診断用には使用できません。
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
構成または誘導システム構造的
供給タイプレンチウイルス
使用対象(アプリケーション)レポーターアッセイ、ウイルス発現
製品タイプレンチウイルス発現ベクター
数量20 μg
レポーター遺伝子GFP(EmGFP)
選択剤(真核生物)ブラストサイジン
ベクターpLenti
クローニング法Gateway™
製品ラインViraPower、Vivid Colors, Vivid Colors
プロモーターCMV
タンパク質タグV5エピトープタグ
Unit Size20 µg
組成および保存条件
pLenti6.3⁄V5-GW⁄EmGFPベクター:20 µg(TEバッファー中ベクター0.5 µg⁄µL含有、40 µL、pH 8.0)、—20℃で保管してください

よくあるご質問(FAQ)

I used your pLenti6.3/V5-GW/EmGFP Control Vector and got poor expression of EmGFP after stable transduction into my cell line. What should I do?

This can happen due to excess blasticidin used during selection. Determine the antibiotic sensitivity of your cell line by performing a kill curve. Use the minimum antibiotic concentration required to kill your untransduced cell line.

I used your pLenti6.3/V5-GW/EmGFP Control Vector and got no expression of EmGFP after stable transduction into my cell line. Can you please help?

This could happen due to promoter silencing or using the incorrect filter/detection parameters for flow cytometry. Screen multiple antibiotc-resistant clones and select the one with the highest expression level. Check the filter you are using as well as the FITC detection parameters.

I used your pLenti6.3/V5-GW/EmGFP Control Vector and got poor expression of EmGFP after transient transduction into my cell line. Can you please help?

Please check the following:

- Tranduction occurred in presence of Polybrene reagent
- Use a higher MOI
- Harvest cells at least 48-72 hrs after tranduction

I used your pLenti6.3/V5-GW/EmGFP Control Vector and got no EmGFP-positive cells after titering. What could have happened?

Possible causes include: incorrect filter set/incorrect detection parameters for flow cytometer, viral stocks stored incorrectly, Polybrene reagent not included during transduction, or it may be too soon to see EmGFP expression.