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Invitrogen™

pLenti7.3/V5-DEST™ Gateway™ Vector Kit

The pLenti7.3/V5-DEST™ Gateway™ Vector Kit contains the Gateway™-adapted ViraPower™ HiPerform™ lentiviral expression vector, pLenti7.3/V5-DEST™ for easy recombination-based cloning and high-level expression of a target gene in dividing and non-dividing mammalian cells.
製品番号(カタログ番号)数量
V53406
または、製品番号V534-06
1 Kit
製品番号(カタログ番号) V53406
または、製品番号V534-06
価格(JPY)
452,700
1 kit
数量:
1 Kit
pLenti7.3⁄V5-DEST™ Gateway™ベクターキットには、Gateway™対応ViraPower™ HiPerform™レンチウイルス発現ベクター、pLenti7.3⁄V5-DEST™が含まれており、簡単な組換えベースのクローニングと、分裂/非分裂哺乳類細胞内での目的遺伝子の高レベルの発現を実現します。pLenti7.3⁄V5-DEST™ベクターは2つの重要な遺伝因子を持つHiPerform™ベクターです。HIV-1インテグラーゼ遺伝子由来のWoodchuck Posttranscriptional Regulatory Element(WPRE)とセントラルポリプリン配列(cPPT)シーケンスで、これらの因子を持たないベクターと比べて、タンパク質発現量が4倍以上になります。さらに、緑色蛍光タンパク質(EmGFP)を用いて、わずか2日間で機能性レンチウイルスの力価を正確に測定できます。

利点
• 一過性発現
• 実験期間の短縮
• ハイスループットのスクリーニング
• EmGFPを用いて2日で十分な量の機能ウイルスを取得
• 柔軟で汎用性の高いGateway™組換えクローニング技術

主な特徴
• ウッドチャック肝炎ウイルスから作られるWPRE(Woodchuck Posttranscriptional Regulatory Element)によりトランス遺伝子発現が増加し、HIV-1インテグラーゼ遺伝子由来のcPPT(ポリプリン配列)により宿主ゲノムに統合されるレンチウイルスのコピー数が増加
• ヒトサイトメガロウイルス(CMV)最初期プロモーターは、目的遺伝子の高レベルな発現をコントロール
• SV40プロモーターがEmGFPの発現を促進
• 緑色蛍光タンパク質(EmGFP)により、フローサイトメトリーによるレンチウイルス力価の測定と形質導入細胞のモニタリングが容易

キットの内容物
• pLenti7.3⁄V5-DEST™ Gateway™ベクターボックス
• One Shot™ Stbl3™ ケミカルコンピテント大腸菌(C7373-03)

関連SKU
• 293FT細胞株(R70007、R70007)
• ViraPower™レンチウイルスサポートキット(K4970-00)
• ViraPower™レンチウイルスパッケージングミックス(K4975-00)
• Lipofectamine™ 2000(11668-019、11668-027)

研究用途にのみ使用できます。あらゆる治療もしくは診断用には使用できません。
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
構成または誘導システム構造的
供給タイプレンチウイルス
使用対象(アプリケーション)レポーターアッセイ、ウイルス発現
製品タイプレンチウイルス発現ベクター
数量1 Kit
レポーター遺伝子GFP(EmGFP)
選択剤(真核生物)なし
ベクターpLenti
クローニング法Gateway™
製品ラインFastTiter、Gateway、HiPerform、ViraPower, Gateway, HIPERFORM
プロモーターCMV
タンパク質タグV5エピトープタグ
Unit Size1 kit
組成および保存条件
pLenti7.3⁄V5-DEST™ Gateway™ベクターキットには、pLenti7.3⁄V5-DEST™ Gateway™ベクター(150 ng⁄µL、40 µL)とpLenti7.3⁄V5-GW⁄lacZコントロールベクター(0.5 µg⁄µL、20 µL)が含まれています。-20℃にて保存してください。

One Shot™ Stbl3™ケミカルコンピテント大腸菌ボックスは、シングルユース、50 µLのOne Shot™コンピテントセル20回分、S.O.C.培地、pUC19超らせん型プラスミドコントロールなどの形質転換試薬が含まれています。-80℃で保存してください。

よくあるご質問(FAQ)

Can I perform the single-step protocol for the BP/LR Clonase reaction using BP Clonase enzyme and LR Clonase enzyme instead of BP Clonase II enzyme and LR Clonase II enzyme?

In the single-step protocol for the BP/LR Clonase reaction, we would not recommend substituting the BP Clonase II/LR Clonase II enzymes with BP Clonase /LR Clonase enzymes as this would result in very low recombination efficiency.

Do you have a recommended single-step protocol for BP/LR recombination?

Yes, we have come up with a single-step protocol for BP/LR Clonase reaction (http://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cloning/gateway-cloning.html#1), where DNA fragments can be cloned into Destination vectors in a single step reaction, allowing you to save time and money.

How can I move my gene of interest from a Gateway-adapted expression clone to a new Destination vector as I have lost the entry clone?

We would recommend performing a BP reaction with a Donor vector in order to obtain an entry clone. This entry clone can then be used in an LR reaction with the Destination vector to obtain the new expression clone.

Can I purchase the 5X LR Clonase buffer or 5X BP Clonase buffer separately?

We do not offer the 5X LR Clonase buffer and 5X BP Clonase buffer as standalone products. They are available as part of the enzyme kits.

Do you offer Gateway vectors for expression in plants?

We do not offer any Gateway vectors for expression in plants.