RT-PCR用SuperScript™ IV第一鎖合成システムは、精製されたポリ(A)+またはトータルRNAからの第一鎖cDNAの合成に最適化されています。このキットには、RT反応で堅牢かつ信頼性の高いcDNA合成を行う独自のMMLV変異体である
SuperScript™ IV逆転写酵素(RT)が含まれています。SuperScript™ IV合成システムは、阻害剤耐性、処理能力、反応速度においてSuperScript™ IIIベースのシステムよりも大幅に改善されていますが、熱安定性の向上、高効率の完全長cDNA合成、RNase活性の低減など、以前のシステムのすべての利点を保持しています。SuperScript™ IVは、現在市販されている他のRTが非効率的に機能する原因となる、多種多様なサンプルに含まれる阻害物質の存在下で、信頼性が高く、一貫性のある、高速なcDNA合成を実現するように設計されています。
SuperScript™ IV第一鎖合成システムは、RT反応に必要なすべてのコンポーネントに加えて、コントロール遺伝子とプライマーを追加しており、アプリケーションのニーズに合わせてRTセットアップを柔軟にカスタマイズすることができます。SuperScript™ IV合成システムは、RT-PCRアプリケーションの性能と柔軟性の点で最高の選択肢です。特に、再現性と信頼性が最重要課題となり、RNAサンプル中の阻害物質がcDNA合成に干渉し、遺伝子発現研究にバイアスを生じさせる可能性があるすべてのRT-PCRアプリケーション向けとして推奨します。
SuperScript™ IV第一鎖合成システムの特長は以下のとおりです。
•cDNA合成を妨げる可能性のあるさまざまな阻害剤に対する耐性を大幅に向上
•幅広いサンプルタイプにおける堅牢で特異的なcDNA合成
•インキュベーション時間を50分超から10分へ短縮する、より高速な逆転写酵素反応
•SuperScript™ III RTと比較して大幅に優れた処理能力
酵素ソースM-MLVのpol遺伝子を発現している大腸菌から精製し、熱安定性と半減期、処理能力、阻害剤耐性を向上させ、RNase H活性を低減するように改良されています。
性能および品質検査エンドデドキシリボヌクレアーゼ、エキソデオキシリボヌクレアーゼ、リボヌクレアーゼアッセイ、およびcDNA生成物の収量と長さ。
単位の定義SuperScript™ IV RTの1単位は、ポリ(A)オリゴ(dT)
12-18をテンプレート/プライマーとして使用して、37℃で10分間に1 nmoleのデオキシリボヌクレオチドを酸沈殿性物質に組み込むために必要な酵素量です。
ユニットの反応条件50 mM Tris-HCl(pH 8.3)、4 mM MgCl
2、10 mM DTT、50 mM KCl、0.5 mM dTTP、0.4 MBq/mL [
3H]-dTTP、0.4 mMポリ(A)オリゴ(dT)
12~18および37℃で10分間おいた20 μL中の酵素。