Thermo Scientific EZ-Link NHS-PEG4 Biotinylation Kitには、EZ-Link NHS-PEG4-ビオチンと、8回のタンパク質標識反応に必要なアクセサリ試薬(1回あたり0.05~0.2 mg)が付属しています。EZ-Link NHS-PEG4-ビオチンはペグ化された水溶性試薬で、抗体、タンパク質、および他の一級アミン含有高分子のビオチン標識を簡単かつ効率的に行えます。
EZ-Link NHS-PEG4-ビオチンの特長:
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タンパク質標識—ストレプトアビジンプローブまたはレジンを使用した検出や精製用に、抗体やその他のタンパク質をビオチン化
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アミン反応性—リジン(K)側鎖やポリペプチドのアミノ末端などの1級アミン(-NH2)と反応
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ペグ化済み–スペーサーアームは親水性の4単位ポリエチレングリコール(PEG)基を含有
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溶解性を向上–ペグ化はビオチン化分子に水溶性を供与するため、溶液に保存されたビオチン化抗体の凝集を防止
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不可逆性—永久的なアミド結合を形成;スペーサーアームの開裂は不可能
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長鎖による効果–スペーサーアームは(標的に追加される全長が)29オングストロームで、アビジン分子に結合する際に立体構造の妨害を低減
NHS-PEG4-Biotinは、アミンを標識し、抗体やその他のタンパク質の溶解性を最大化するための、ペグ化された長鎖(29.0 Å)の水溶性NHS-エステルビオチン化試薬です。
N-ヒドロキシスクシンイミドエステル(NHS)基は、リジンおよびN末端アミノ基と特異的および効率的に反応し、安定したアミド結合を形成します。親水の性の
ポリエチレングリコール(PEG)スペーサーアームは、ビオチン化分子に水溶性を供与するため、溶液に保存されたビオチン化タンパク質の凝集を低減します。またPEGスペーサーアームにより、試薬は長くて柔軟な結合が可能になるため、アビジン分子への結合における立体構造の妨害を最小限に抑えます。
当社は、可能な限り最大限の製品の総合的完全性、一貫性、および性能を、意図した研究アプリケーションで確保するビオチン試薬を製造しています。
ビオチンの
N-ヒドロキシスルホスクシンイミド(NHS)エステルはビオチン化試薬のもっとも一般的なタイプです。NHS活性化ビオチンは、アルカリ性バッファー中で1級アミノ基(-NH2)と効率的に反応して、安定したアミド結合を形成します。タンパク質(抗体など)は一般的に、リジン(K)残基の側鎖や各ポリペプチドのN末端など、標識の標的として利用できる複数の1級アミンを有しています。
ビオチンNHSエステル試薬には、長さ、溶解性、細胞透過性、および開裂性が異なるさまざまな種類があります。非スルホン化NHSビオチンは細胞透過性ですが、DMSOやDMFなどの有機溶媒に溶解する必要があります。スルホ-NHSビオチン(およびペグ化ペーサーを有するもの)は直接水に溶解しますが、膜透過性ではありません。ジスルフィド結合を含む種類は還元剤を使用して開裂できるため、ビオチン基を標識タンパク質から切り離すことができます。
関連製品EZ-Link™ NHS-PEG4-BiotinEZ-Link™ NHS-PEG4 Biotinylation KitFor Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.