Pierce™ DSP, No-Weigh™ Format

Themo Scientific Pierce DSP (Lomant's Reagent)は不水溶性のホモ二官能性N-ヒドロキシスクシンイミドエステル（NHSエステル）クロスリンカーです。チオール切断が可能な1級アミン反応性で、さまざまなアプリケーションに使用できます。DSPは、8炭素スペーサーアームの各末端にアミン反応性NHSエステルを有しています。NHSエステルは、pH 7～9で1級アミンと反応して安定したアミド結合を形成し、N-ヒドロキシスクシンイミドを放出します。抗体を含むタンパク質は、通常リジン（K）残基の側鎖と各ポリペプチドのN末端に複数の1級アミンを有しており、これはNHSエステルクロスリンク試薬の標的として利用できます。DSPはスルホン化されておらず、また不水溶性であるため、まず有機溶媒に溶解してから水性反応混合物に添加する必要があります。DSPは荷電基を有していないため親油性かつ膜透過性で、細胞内および膜内の結合に有用です。DSPのスルホン化類似体（DTTSP）は水溶性です。DSPクロスリンカーの切断不可能な類似体であるDSSは、還元剤の存在下で切断できない安定したスペーサーアームを必要とするアプリケーションに使用できます。

Thermo Scientific No-Weigh製品は、分注済みのフォーマットで提供される特殊試薬です。計量済みのパッケージではバイアルを繰り返し開閉することがないため、経時的な試薬反応性の喪失や汚染を防ぎます。このフォーマットでは、毎回新しい試薬バイアルを使用できるため、少量の試薬を計量する手間がなくなり、試薬の安定性に対する懸念が軽減します。

DSPは、8炭素スペーサーアームの各末端にアミン反応性N-ヒドロキシスクシンイミド（NHS）エステルを有しています。NHSエステルは、pH 7～9で1級アミンと反応して安定したアミド結合を形成し、N-ヒドロキシスクシンイミド脱離基を放出します。抗体を含むタンパク質は、通常リジン（K）残基の側鎖と各ポリペプチドのN末端に複数の1級アミンを有しており、これはNHSエステルクロスリンク試薬の標的として利用できます。DSPクロスリンカーの切断不可能な類似体であるDSSは、還元剤の存在下で切断できない安定したスペーサーアームを必要とするアプリケーションに使用できます。

Lomant試薬の特長：

•反応基：NHSエステル（両端）
• 反応標的：アミノ基（1級アミン）
• アミン反応性NHSエステルは、1級アミン含有分子と迅速に反応
• スペーサーアームのジスルフィド結合は、10～50 mMのDTTまたはTCEPによりpH 8.5で容易に切断
• スペーサーアームは還元SDS-PAGE用サンプルローディングバッファーでも切断可能
• 切断可能なクロスリンカーであるため、クロスリンク産物を分離可能
• DTSSP（スルホ-DSP）とは異なり不水溶性（まずDMFまたはDMSOに溶解）
• 膜透過性であるため、細胞内クロスリンクが可能

アプリケーション：
• 細胞溶解と免疫沈降の前に細胞内タンパク質を化学的にクロスリンク
• 弱い、または一過性のタンパク質相互作用を同定するために、タンパク質相互作用を「固定」
• 免疫染色用に、RNAを損傷することなく組織を固定
• 1ステップの反応でバイオコンジュゲートを作成するためのタンパク質クロスリンク
• タンパク質をアミンコート表面へ固定

DSPの特性
• 別名：Lomant試薬、DTSP
• 分子式：C₁₄H₁₆N₂O₈S₂
• 分子量：404.42
• スペーサーアームの鎖長：12.0 Å（8原子）
• CAS番号：57757-57-0
• 反応基：NHSエステル、pH 7.0～9.0で1級アミンと反応

DSPの仕様：
BS3は、特異性が非常に高いバイオコンジュゲートを作成し、データの完全性を確保して最高レベルの一貫性を提供するよう、非常に高度な仕様を満たすよう製造されています。DSPの各ロットは、以下の最低限の仕様を満たすことが試験されています。
•同一性：IRスキャンでは、DSPの構造および官能基に特有のピークのみが現れる
• 純度：定量NMR測定で> 95%（クロスリンカー純度の最高基準）

製品リファレンス
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