Thermo Scientific Pierce磁気ChIPキットは、免疫沈降法(クロマチンIP)によりクロマチン結合DNAを効率的に単離し、その後PCRで定量するための便利な方法を提供します。
磁気ChIPキットの特長:
•
迅速—約8時間で定量PCRが可能な精製DNAが得られます
•
効率的で再現可能—ミクロコッカスヌクレアーゼ消化と核溶解は高度に最適化されています
•
高感度—最少10,000細胞(1 x 10^4)で結果を得ることができます
•
低バックグラウンド—Pierceタンパク質A/G磁気ビーズは、バックグラウンドを最小限に抑えるために、DNAを含まない試薬でブロックされています
•
一式—最適化された陽性対照試薬が含まれています:RNAポリメラーゼII抗体およびGAPDHプロモーターPCRプライマー
磁気ChIPキットには、最適化されたプロトコルを使用して、適切な制御を用いて30回のクロマチン免疫沈降(ChIP)アッセイを行うのに十分な試薬が含まれています。このキットには、細胞溶解、タンパク質-DNA複合体の捕捉、架橋結合の反転、およびDNA単離用の試薬が付属しています。ブロックされたPierceタンパク質A/G磁気ビーズは高結合能力、低非特異性バックグラウンドを備えており、多くの抗体種と連携します。これらのビーズは、磁気スタンドまたは自動プラットフォーム(Thermo Scientific KingFisherの機器など)と一緒に手動で使用できます。ChIPで検証され、品質保証された抗体は、Pierce Magnetic ChIP Kitでもご利用いただけます。
内容:キットには、クロマチン調製、IP、DNA精製、ポジティブコントロール(抗体とプライマー)のための試薬が含まれています。
が含まれています。必要なもの:Magnetic ChIP Kit
in vivo 架橋剤(ホルムアルデヒドなど)、マイクロチップソニケーター(Misonix™ Sonator 3000など)、選択したChIP修飾抗体、目的のDNA配列のPCRプライマー、PCRマスターミックス(qPCRが必要な場合は、SYBR™ Greenなどの色素を含む)、およびqPCR装置
アプリケーション:• PCRまたはChIP-Seq
•を用いてゲノムDNA上の特定のタンパク質とDNAの相互作用部位を決定します
ChIPアッセイを成功させるには、標的ゲノムDNAを検出する前に、いくつかの重要なステップ(架橋、クロマチン調製、免疫沈降)が必要です。個別のChIPプロトコルの各ステップは、最適化するのに時間のかかることがあります。Thermo Scientific Pierce Magnetic ChIP Kitは、ChIPプロセスを簡素化し、正確で再現性の高い結果を可能にします。
タンパク質とDNAの複合体は、まず
in vivoでホルムアルデヒドで架橋されます。このキットには、細胞を溶解させ、架橋結合複合体を抽出して溶解する試薬が含まれています。複合体は次に特定の抗体でインキュベートされ、Pierceタンパク質A/G磁気ビーズを使って分離されます。架橋を反転させ、タンパク質を消化した後、得られたDNA断片は精製され、標準または定量PCRの準備が整います。
その他の製品データ•
アンドロゲン依存性および非依存性の転写活性制御の解析関連製品Pierc™ Magnetic ChIP KitPierce™ ChIP-grade Protein A/G Magnetic Beads