Thermo Scientific Pierce蛍光ビオチン定量用キットは、標識抗体やその他の生体分子のビオチン化レベルを正確に測定するために必要なサンプル量は、わずか10マイクロリットルです。
蛍光ビオチン定量用キットの特長:
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迅速 — インキュベーションに必要なのはわずか5分です
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経済的 — 必要なサンプル量はわずか10µL(約750 ngのビオチン化IgG)
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高感度— ビオチンが10~60ピコモルの線形作業範囲
このマイクロプレートベースのビオチンアッセイは、提供された蛍光レポーターをビオチン化サンプルおよび希釈したバイサイトチン標準液に加えることで簡単に実施できます。アビジンは、弱相互作用のHABA(4'-ヒドロキシベンズアルデヒト-2-カルボン酸)がビオチンによって置換されると蛍光を発します。ビオチンの量は、サンプルの蛍光をビオシチン標準曲線と比較することで求められます。このアッセイはマイクロプレート比色分析HABAアッセイよりも少ないサンプル量で、はるかに高感度です。
アッセイ緩衝液、HABAアビジン蛍光レポーター溶液、およびビオシチンコントロールを
含みます。黒色不透明96ウェルマイクロプレートと蛍光プレートリーダー(励起494 nm、発光520 nm)が
必要です。アビジンまたはストレプトアビジンとビオチンとの特異的相互作用は、多くの浄化および検出システムの基礎となります。ビオチン標識手順が成功したかどうか、および特定のアプリケーションに使用するビオチン化分子の量を評価するには、ビオチン化の程度を定量化する必要があります。
HABA(4'-ヒドロキシベンズアルデヒト-2-カルボン酸)は、アビジンと弱相互作用する色素で、ビオチン:タンパク質比を迅速に推定するために
比色分析アッセイで一般的に使用されます。蛍光ビオチン定量用キットは、HABA色素も使用しますが、より高感度で正確です。蛍光アビジンとHABA(DyLight Reporter)の混合が、ビオチン化サンプルを含む溶液に追加されます。アビジンに対するアフィニティーが高いため、ビオチンはHABAを置換し、アビジンの蛍光を可能にします。蛍光をビオシチン標準曲線と比較することにより、マイクロプレートでビオチン量を測定します。
蛍光ビオチン定量用キットは、わずか10µLのサンプルしか必要としません。対照的に、従来の比色分析法では100µLのサンプルが必要であり、他の主要サプライヤーの蛍光アッセイキットでは50µLのサンプルが必要です。当社のキットは他のサプライヤーの蛍光ビオチンアッセイ(Brand I)よりも正確です。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.