Pierce™ Fluorescence Biotin Quantitation Kit
Pierce™ Fluorescence Biotin Quantitation Kit
Thermo Scientific™

Pierce™ Fluorescence Biotin Quantitation Kit

Thermo Scientific Pierce蛍光ビオチン定量用キットは、標識抗体やその他の生体分子のビオチン化レベルを正確に測定するために必要なサンプル量は、わずか10マイクロリットルです。蛍光ビオチン定量用キットの特長:•迅速 — インキュベーションに必要なのはわずか5分です• 経済的詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
466101 kit
製品番号(カタログ番号) 46610
価格(JPY)
63,500
Each
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数量:
1 kit
一括またはカスタム形式をリクエストする
Thermo Scientific Pierce蛍光ビオチン定量用キットは、標識抗体やその他の生体分子のビオチン化レベルを正確に測定するために必要なサンプル量は、わずか10マイクロリットルです。

蛍光ビオチン定量用キットの特長:

迅速 — インキュベーションに必要なのはわずか5分です
経済的 — 必要なサンプル量はわずか10µL(約750 ngのビオチン化IgG)
高感度— ビオチンが10~60ピコモルの線形作業範囲

このマイクロプレートベースのビオチンアッセイは、提供された蛍光レポーターをビオチン化サンプルおよび希釈したバイサイトチン標準液に加えることで簡単に実施できます。アビジンは、弱相互作用のHABA(4'-ヒドロキシベンズアルデヒト-2-カルボン酸)がビオチンによって置換されると蛍光を発します。ビオチンの量は、サンプルの蛍光をビオシチン標準曲線と比較することで求められます。このアッセイはマイクロプレート比色分析HABAアッセイよりも少ないサンプル量で、はるかに高感度です。

アッセイ緩衝液、HABAアビジン蛍光レポーター溶液、およびビオシチンコントロールを含みます。


黒色不透明96ウェルマイクロプレートと蛍光プレートリーダー(励起494 nm、発光520 nm)が必要です。


アビジンまたはストレプトアビジンとビオチンとの特異的相互作用は、多くの浄化および検出システムの基礎となります。ビオチン標識手順が成功したかどうか、および特定のアプリケーションに使用するビオチン化分子の量を評価するには、ビオチン化の程度を定量化する必要があります。

HABA(4'-ヒドロキシベンズアルデヒト-2-カルボン酸)は、アビジンと弱相互作用する色素で、ビオチン:タンパク質比を迅速に推定するために比色分析アッセイで一般的に使用されます。蛍光ビオチン定量用キットは、HABA色素も使用しますが、より高感度で正確です。蛍光アビジンとHABA(DyLight Reporter)の混合が、ビオチン化サンプルを含む溶液に追加されます。アビジンに対するアフィニティーが高いため、ビオチンはHABAを置換し、アビジンの蛍光を可能にします。蛍光をビオシチン標準曲線と比較することにより、マイクロプレートでビオチン量を測定します。

蛍光ビオチン定量用キットは、わずか10µLのサンプルしか必要としません。対照的に、従来の比色分析法では100µLのサンプルが必要であり、他の主要サプライヤーの蛍光アッセイキットでは50µLのサンプルが必要です。当社のキットは他のサプライヤーの蛍光ビオチンアッセイ(Brand I)よりも正確です。
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
製品ラインPierce
製品タイプFluorescence Biotin Quantitation Kit
数量1 kit
Labeling Target抗体, タンパク質
標識または色素ビオチン
Unit SizeEach
組成および保存条件
マイクロプレートフォーマットの216個のサンプルに対応可能な量

• リン酸バッファー液食塩水(20X)、3 mL
• DyLight Reporter、1.3 mL
• 1 mMのビオシチンコントロール、0.1 mL

4℃で保存します。

よくあるご質問(FAQ)

How can I determine the degree of protein labeling?

To quantitate biotin, we offer two kits as follows:

  • Biotin Quantitation Kit (Cat. No. 28005): With this kit, a solution containing the biotinylated protein is added to a mixture of HABA reagent (4’-hydroxyazobenzene-2-carboxylic acid and avidin. Because of its higher affinity for avidin, biotin displaces the HABA and the absorbance at 500nm decreases proportionally. 
  • Fluorescence Biotin Quantitation kit (Cat. No. 46610): This microplate-based biotin assay is easy to perform by adding the supplied fluorescent reporter to the biotinylated samples and diluted biocytin standards. The avidin fluoresces when the weakly interacting HABA (4’-hydroxyazobenzene-2-carboxylic acid) is displaced by the biotin. The amount of biotin is determined by comparing the sample's fluorescence to the biocytin standard curve. This assay requires must less sample volume than the microplate colorimetric HABA assay and is much more sensitive

  • To determine the dye-to-protein ratio after fluorophore conjugation, absorbance readings of the protein:dye conjugate are taken and the molar ratio can then be calculated. Please go to this Tech Tip (https://tools.thermofisher.com/content/sfs/brochures/TR0031-Calc-FP-ratios.pdf")for more information

    Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Purification and Isolation Support Center.