Thermo Scientific UltraLinkヒドラジドレジンは、抗体またはその他のグリコシル化タンパク質を用いたアフィニティーカラムの調製に使用されます。
UltraLinkヒドラジドレジンの特長:
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大容量—1~10mg の酸化抗体またはその他のレジン1ミリリットルあたりの糖タンパク質を固定化できます
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迅速、高効率—30分で迅速かつ効率的に固定化でき、ほとんどの糖タンパク質を4時間以内に少なくとも90%結合できます(効率はグリコシル化の量とタイプによって異なります)
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特異的固定化—ヒドラジド活性化UltraLinkレジンは、糖類(シアル酸など)が過ヨウ素酸で穏やかに酸化された精製糖タンパク質にのみ結合します
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安定した結合—ヒドラゾン結合の共鳴構造は、調製した1バッチのレジンで複数のアフィニティー精製を行うために十分に安定しています。安定化のステップは必要ありません
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抗体機能を維持—Fc領域を介してIgGを固定化することにより、両方の抗原結合部位をターゲットの捕捉に使用できます
ヒドラジド活性化レジンは、ポリクローナル抗体を持つアフィニティーカラムを調製するために使用されます。通常、これらのFc部分には豊富な炭水化物(グリコシル化)が含まれています。過ヨウ素酸酸化性糖質基を含むグリコシル化タンパク質(モノクローナル抗体も含む)を固定化し、再利用可能なアフィニティーカラムを作成できます。ヒドラジド固定化化学によって固定化された抗体は、抗原結合部位を遮るものがなく、最適な精製能力を備えています。安定した糖タンパク質または抗体を持つ調製済みカラムは、結合能を大幅に損なうことなく、アフィニティー精製のために少なくとも5回再生および再利用できます。
アプリケーション:• 共有結合抗体を使用して抗原を浄化します
• 目的の糖タンパク質の結合パートナーを特定します
• 大規模なアフィニティー精製を実行します
UltraLinkヒドラジドレジンは、ポリクローナル抗体などの糖タンパク質に特に有用です。目的のアフィニティー精製に不可欠な活性結合部位に干渉しないドメインに分子を結合させる可能性があるためです。糖タンパク質中の糖鎖には、シスジオール基を持つ一般的な糖が含まれており、これらの糖はメタ過ヨウ素酸ナトリウムで容易に酸化され、アルデヒドを生成します。酸化によって生じたアルデヒド基は、ヒドラジドレジンのヒドラジド基と反応し、安定した共有結合を形成します。この反応はThermo Scientific GlycoLink結合触媒によって強化され、結合効率が向上し、インキュベーション時間が短縮されます。結合反応全体は、触媒を含む単純な非アミンバッファーで2~4時間で起こります。一般的には、抗体および一般的な糖タンパク質の結合効率は85%を超えており、Thermo Scientific UltraLinkヒドラジドレジン1ミリリットルあたり1~10 mgのタンパク質が固定化されます。
詳細な製品データ•
糖タンパク質の固定化と結合の改善関連製品GlycoLink™固定化キットGlycoLink™マイクロ固定化キット