UltraLink™ Hydrazide Resin
UltraLink™ Hydrazide Resin
Thermo Scientific™

UltraLink™ Hydrazide Resin

Thermo Scientific UltraLinkヒドラジドレジンは、抗体またはその他のグリコシル化タンパク質を用いたアフィニティーカラムの調製に使用されます。UltraLinkヒドラジドレジンの特長:•大容量—1~10mg の酸化抗体またはその他のレジン1ミリリットルあたりの糖タンパク質を固定化できます• 迅速、高効率—30分で迅速かつ効率的に固定化でき、ほとんどの糖タンパク質を4時間以内に少なくとも90%結合できます(効率はグリコシル化の量とタイプによって異なります詳細を見る
製品番号(カタログ番号)数量
5314910 mL
製品番号(カタログ番号) 53149
価格(JPY)
56,900
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数量:
10 mL
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Thermo Scientific UltraLinkヒドラジドレジンは、抗体またはその他のグリコシル化タンパク質を用いたアフィニティーカラムの調製に使用されます。

UltraLinkヒドラジドレジンの特長:

大容量—1~10mg の酸化抗体またはその他のレジン1ミリリットルあたりの糖タンパク質を固定化できます
迅速、高効率—30分で迅速かつ効率的に固定化でき、ほとんどの糖タンパク質を4時間以内に少なくとも90%結合できます(効率はグリコシル化の量とタイプによって異なります)
特異的固定化—ヒドラジド活性化UltraLinkレジンは、糖類(シアル酸など)が過ヨウ素酸で穏やかに酸化された精製糖タンパク質にのみ結合します
安定した結合—ヒドラゾン結合の共鳴構造は、調製した1バッチのレジンで複数のアフィニティー精製を行うために十分に安定しています。安定化のステップは必要ありません
抗体機能を維持—Fc領域を介してIgGを固定化することにより、両方の抗原結合部位をターゲットの捕捉に使用できます

ヒドラジド活性化レジンは、ポリクローナル抗体を持つアフィニティーカラムを調製するために使用されます。通常、これらのFc部分には豊富な炭水化物(グリコシル化)が含まれています。過ヨウ素酸酸化性糖質基を含むグリコシル化タンパク質(モノクローナル抗体も含む)を固定化し、再利用可能なアフィニティーカラムを作成できます。ヒドラジド固定化化学によって固定化された抗体は、抗原結合部位を遮るものがなく、最適な精製能力を備えています。安定した糖タンパク質または抗体を持つ調製済みカラムは、結合能を大幅に損なうことなく、アフィニティー精製のために少なくとも5回再生および再利用できます。

アプリケーション:
• 共有結合抗体を使用して抗原を浄化します
• 目的の糖タンパク質の結合パートナーを特定します
• 大規模なアフィニティー精製を実行します

UltraLinkヒドラジドレジンは、ポリクローナル抗体などの糖タンパク質に特に有用です。目的のアフィニティー精製に不可欠な活性結合部位に干渉しないドメインに分子を結合させる可能性があるためです。糖タンパク質中の糖鎖には、シスジオール基を持つ一般的な糖が含まれており、これらの糖はメタ過ヨウ素酸ナトリウムで容易に酸化され、アルデヒドを生成します。酸化によって生じたアルデヒド基は、ヒドラジドレジンのヒドラジド基と反応し、安定した共有結合を形成します。この反応はThermo Scientific GlycoLink結合触媒によって強化され、結合効率が向上し、インキュベーション時間が短縮されます。結合反応全体は、触媒を含む単純な非アミンバッファーで2~4時間で起こります。一般的には、抗体および一般的な糖タンパク質の結合効率は85%を超えており、Thermo Scientific UltraLinkヒドラジドレジン1ミリリットルあたり1~10 mgのタンパク質が固定化されます。

詳細な製品データ
糖タンパク質の固定化と結合の改善

関連製品
GlycoLink™固定化キット
GlycoLink™マイクロ固定化キット
研究用途にのみご使用ください。診断目的には使用できません。
仕様
カラムタイプアフィニティー、UltraLink™レジン
概要UltraLinkヒドラジドレジン
フォーマットBottle
数量10 mL
固定相ヒドラジド
容量(メートル法)1 to 10 mg Oxidized Antibody or Glycoprotein Immobilizing per mL Resin
製品ラインUltraLink
タイプ樹脂
Unit SizeEach
組成および保存条件
4℃で保存。

よくあるご質問(FAQ)

How many times can the same affinity column in the GlycoLink Immobilization Kit be used for purification?

The stability of the immobilized protein and the type of elution buffer used determines how many times a column can be reused. Typically, the columns can be reused at least five times without significant loss in performance.

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Will Hydrazide UltraLink Resins in the GlycoLink Immobilization kit couple chicken IgY?

Yes. Chicken antibodies have a total of 4 N-linked glycosylation sites and will couple to the resin.

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Can the Hydrazide UltraLink Resin in the GlycoLink Immobilization kit couple all types of antibodies?

The resin will couple any antibody that is adequately glycosylated. Although monoclonal antibodies are typically under-glycosylated, many have been effectively immobilized to this resin. To determine if a monoclonal antibody is glycosylated use the Thermo Scientific Glycoprotein Carbohydrate Estimation Kit (Cat. No. 23260).

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When oxidizing with sodium meta-periodate, is it possible to over-oxidize the antibody when using the GlycoLink Immobilization Kit?

If too much sodium meta-periodate is used or the sample is incubated for too long the oxidation can cause the protein to breakdown or favor an amine linkage to the resin. Furthermore, if used in excess, methionine residues might become oxidized. Typically, using 10 mM sodium meta-periodate for 30 minutes will oxidize only the carbohydrates and does not affect protein function.

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How do I oxidize a glycoprotein or antibody when using the GlycoLink Immobilization Kit?

The antibody or other glycoprotein is first diluted or desalted into the coupling buffer and transferred to a vial containing sodium meta-periodate at a final concentration of 10 mM (1 mM is sufficient for sialic acid residues). The mixture is incubated for 30 minutes at room temperature in the dark. Sodium meta-periodate concentration can be increased to 25mM if oxidation is not sufficient at 10 mM. Care must be taken not to over-oxidize the glycoprotein.

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