Imject™ Maleimide-Activated Ovalbumin

Thermo Scientific Imjectマレイミド活性化オボアルブミンは、スルフヒドリル反応性オボアルブミン（OVA）で、システイン含有ペプチドやその他のチオール化抗原とのハプテン-キャリア結合に使用します。

Imjectマレイミド活性化オボアルブミンの特長：

•安定化剤を含むPBS（pH 7.2）中で凍結乾燥されたマレイミド活性化オボアルブミン
• オボアルブミン1モルあたり5～15モルのマレイミドで活性化されている
• システイン含有ペプチド抗原を結合させて免疫原またはスクリーニングターゲットを作製するのに最適
• 結合反応は2時間で完了し、安定した共有チオエーテル結合が得られる
• 分子量45,000ダルトンの単一のポリペプチドタンパク質
• 14個のアスパラギン酸残基と33個のグルタミン酸残基を有し、そのカルボキシル基はOVAの正味の負電荷（pI 4.63）に寄与
• 免疫原性はキーホールリンペットヘモシアニン（KLH）ほど高くはないが、DMSO（ジメチルスルホキシド）への溶解性は高く、この溶媒が必要なアプリケーションに適している
• KLHをキャリアタンパク質としてハプテンに対する免疫応答を生成した後に抗体スクリーニングやイムノアッセイにおいて非関連タンパク質キャリアとして使用するのに有用

この製品は、キャリアグレードの精製オボアルブミンをSMCC架橋剤で修飾してマレイミド基を付加したもので、ペプチドやその他の分子のシステイン残基上のスルフヒドリル（-SH）部分との共有結合を形成できます。免疫原は、末端システイン残基を正確な結合点として有するように設計されたペプチド抗原から簡単に調製できます。ペプチド配列内の一級アミンまたはカルボン酸に架橋することで、目的のエピトープをブロックすることなく、キャリアタンパク質分子ごとに複数の抗原分子を結合できます。

キャリアタンパク質は、注入することで免疫応答を誘発できる大きく複雑な分子です。小さな抗原（ペプチドまたは薬物化合物）に対する特異的な抗体を確実に生成するには、これらハプテンをより大きく複雑な分子（通常はタンパク質）に共有結合させ、免疫原性を高める必要があります。キャリアタンパク質は免疫原性、可溶性、およびキャリアと適切な結合を達成できるかどうかに基づいて選択します。

オボアルブミン（OVA）はニワトリ卵白中にもっとも豊富に含まれるタンパク質で、ラボでさまざまな用途に使用できる便利なタンパク質です。この45 kDaのタンパク質は、穏やかな免疫原として十分な大きさと複雑さを備えています。そのため、OVAはハプテンやその他の抗原の免疫原性を高めるキャリアタンパク質として使用できます。OVAは、一次免疫原の調製にはあまり使用されませんが、KLHなどの免疫原性の高いキャリアタンパク質を使用して産生された抗体の分析（プレートコーティングが必要なスクリーニングアッセイなど）に好適な抗原を作製するためのキャリアタンパク質としてよく用いられます。

Imjectオボアルブミンは、キーホールリンペットヘモシアニン（KLH）などの他のタンパク質ほど免疫原性は高くありません。しかし、独立した構造を持つOVAは、ELISAのような典型的なスクリーニングアッセイでは、そのままでは扱いにくいペプチドや他の小さな抗原に対するキャリアとして特に有用です。オボアルブミンは、BSAよりも疎水性が高く可溶性が低いにもかかわらず、最大70%のDMSOに可溶であり、溶解にDMSOを必要とするハプテンとの結合に有用です。オボアルブミンには多数の1級アミンが含まれており、その一部を修飾し、マレイミド活性化オボアルブミンを生成します。

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